大肠杆菌DNA连接酶报价

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")大肠杆菌DNA连接酶报价，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：大肠杆菌DNA连接酶报价
产地：国产|进口
英文名：E.coli DNA Ligase
规格：1000U
本酶催化相邻DNA链的5´-P末端和3´-OH末端以磷酸二酯键结合的反应，需NAD作辅酶。本酶只能催化突出末端DNA之间的连接，但如果在PEG及高浓度一价阳离子存在的条件下，也能连接平滑末端的DNA，但不能催化DNA的5´-P末端与RNA的3´-OH末端以及RNA之间的连接。其工作原理图如下：


产品用途：
1．DNA片段和载体DNA的连接。
2．DNA片段和Linker或Adaptor DNA的连接。
3．cDNA的第二条链的合成。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：在20μl的连接反应体系中，6μg的λDNA-Hind III的分解物在16℃下反应30分钟时，有90%以上的DNA片段被连接所需要的酶量定义为一个活性单位。

纯度：
1．360U的本酶和1μg的λ-Hind III片段在37℃下反应16小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
2．360U的本酶和1μg的Supercoiled pBR322 DNA在37℃下反应16小时，DNA的电泳谱带不发变化。
3．360U的本酶和1μg的16S，23S rRNA在37℃下反应1小时，RNA的电泳谱带不发生变化。

备注：BSA在-20℃下易产生沉淀，应尽量避免多次反复冻融。短期使用请在4℃下保存。产生稍许沉淀不影响反应效果。

欲咨询购买大肠杆菌DNA连接酶报价，请致电北京百奥莱博科技有限公司，为您提供最全面周到的产品服务，除此之外，我公司正在促销以下产品：

·核酸稀释液，测OD专用
编号：BTN131179
英文名称：Diluent for NA OD Detection
规格：250mL
测定核酸的OD需要一定的pH和盐浓度，本产品就是根据这一特点开发的、专门用于溶解和稀释核酸样品的溶液。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

·TdT加尾法DNA探针标记试剂盒
编号：BTN90605A
英文名称：TdT-Tailing DNA Labeling Kit
规格：5次
本试剂盒是基于TdT末端转移酶能够在DNA的3´端添加dNTP尾巴的原理而设计，该反应的示意图如下：


产品特点：
1.快速，15分钟即可完成标记反应。
2. 不但可用于单链DNA和DNA Oligo标记，还可用于3´突出的双链DNA标记，但后者标记效率稍低。
3.可用同位素底物和非同位素底物(生物素和地高*(代"辛")标记的核苷酸等)。
4. 提供不带标记核苷酸、带生物素标记核苷酸和带地高*(代"辛")标记核苷酸三种选择。
5. 同时提供非标记的dATP，用户可以用其调节加尾长短和标记核苷酸掺入比例。
6. 标记的探针可用于电泳迁移率实验(EMSA)、原位杂交(ISH)、Northern Blot(不推荐用于低丰度RNA检测)、小RNA Northern、Southern Blot(不推荐用于单拷贝基因检测)、菌落杂交、斑点印迹杂交分析等。

试剂盒组成：

 

成分	规格
TdT缓冲液，5×	20μl
TdT(末端转移酶，10U/μL)	10μl
dATP，2mM	5μl
标记核苷酸	(A、B、C不同，见注)
超纯水	1ml
说明书	1份

注：A型用于自选标记，用户需自备标记核苷酸，本产品不提供标记核苷酸；B型提供5μl Biotin-11-dUTP；C型提供含5μl DIG-11-dUTP。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在0.2mL微量离心管中按下表设置一个20μl体系的标记反应(如果需要标记更多探针，请增加标记体积而不要增加探针DNA的浓度)：

成份	用量
探针DNA	100-200 pmol
TdT Buffer，5×	4μl
标记核苷酸，1mM (A型需自备标记核苷酸)	1μl
dATP，2mM	(见下注)
TdT末端转移酶(10U/μL)	2μl
超纯水	补到20μl

注：dATP可以不加，但这样得到的加尾全部是标记核苷酸，由于空间阻碍，灵敏度不一定最佳。如果杂交效果不好，掺入一定比例的dATP到标记核苷酸中，以控制标记的密度，提高比活。具体比例如何可以自己优化。
2. 37℃反应15分钟，延长到30分钟也可以。如果没有非标记核苷酸存在，一般可以加尾3-5个Biotin或DIG标记的核苷酸(标记物空间阻碍抑制延长)；如果有在加尾反应中加入一定比例的非标记核苷酸dATP(其他dNTP也可，只是本试剂盒只提供dATP而已)，每条探针上可加上约100个核苷酸，平均含5个标记核苷酸
3. 70℃ 10分钟灭活TdT酶。
4. 如果需要，可以PAGE电泳+银染(相关试剂需要另购)检测标记效率，带标记的探针泳动速度将低于没标记的探针。
5. 如果是非同位素标记，探针不需纯化可以直接用于杂交。如果需要纯化非同位素标记的探针，请不要酚/*仿抽提，因为非同位素标记物一般会使探针DNA进入有机相而丢失。
6. 使用时需将探针以1-8 ng/μL的终浓度加入到杂交液中(如果探针是双链DNA，加入前还需热变性)。如果不立即使用，非同位素标记的探针DNA可-20℃长期放置一年，同位素标记的探针DNA不能放置。


大肠杆菌DNA连接酶报价关键词：E.coli DNA Ligase,大肠杆菌DNA连接酶,BTN120419


·丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")干粉(49.5%T,3%C)
编号：BTN160802
规格：300mL

·真菌DNA提取试剂盒
编号：BTN60304
英文名称：Fungus DNA extraction kit
规格：50次
本试剂盒是基于液氮研磨法的真菌基因组DNA快速提取试剂盒，尤其适用于从真菌的菌丝体和子实体提取DNA(如果提取孢子和有坚硬细胞壁的单个真菌细胞，则建议选用本公司的玻璃珠法柱式真菌DNA提取试剂盒)，提取过的真菌包括酵母(如：Saccharomyces cerevisiae、Schizosaccharomyces pomb、Pichia pastoris)、动物病原真菌(如：Candida albicans、Aspergillus niger)和植物病原真菌(如：Collectotrichum musae、Fusarium oxysporum)。

试剂盒特点：
1. DNA 纯净，OD260/280一般都在1.9左右，可直接用于PCR、酶切、杂交等。DNA大小在50 Kb左右。
2. 操作简单，整个过程约30分钟左右，比大多数同类产品短。
3.液体培养物处理量在0.1-3mL 之间，真菌菌丝、子实体的处理量在0.1-0.5 g 之间。
4. 价廉物美，与国外同类产品相比质量相当，但价格便宜。
5. 安全无毒，不需要使用*化苄等有毒物质，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	50ml
RNase A溶液(10mg/ml)	0.75ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

使用方法：
1. 先将全部RNase A溶液全部加入到溶液A中，摇匀后再取用，未用完的溶液A最好在4℃保存。
2. 称取0.1-0.5g 湿的真菌菌丝、子实体或0.1-3mL液体培养物离心得到的沉淀，转移到塑料研钵中，液氮研磨成粉后转移到一个干净的1.5mL塑料离心管中。注意：最好避免使用含二氧化硅的玻璃研钵，因为DNA 会吸附在表面，影响得率。如果菌丝或子实体等已经十分干燥，则使用量最好比上面推荐的使用量低5-10倍；如果需要预先从环境中对真菌进行纯化(如从血液病原真菌中提取DNA，则需要先去除红细胞等成份)，请按相关的标准方法先将该真菌预纯化出来，以沉淀物的形式放液氮研磨。
3.在离心管中加入1mL 65℃预热的溶液A并用移液枪头充分吹打混匀(如果溶液A有沉淀，需先在65℃加热溶解后摇匀再使用)。
4. 65℃保温5-30分钟，其间最好吹打混匀2-3次。
5. 12000～15000g室温离心3分钟，将不超过0.75mL的上清转移到新离心管中。有时候上清液中还会有少量细小悬浮物，但对后续操作没有影响，不必进行特殊处理。
6.在上清液中加入等体积的溶液B，上下颠倒30秒充分混匀，溶液将呈白色混浊状，将其置于冰浴中放置5-10分钟。
7. 12000～15000g室温离心3分钟，转移上清到新离心管中。
8. 加入0.2mL的*仿(自备)，震荡器上充分振荡30秒混匀。
9. 12000～15000g室温离心3分钟，两相交界面将有白色膜状物，小心转移上清到新离心管中。
10. 重复第7-第8 步操作一次。
11. 加入0.6-1倍体积的异丙醇(自备)，上下颠倒30秒混匀，12000～15000g离心5分钟，弃上清，管底将有微小DNA沉淀。
12. 用1mL 70%乙醇清洗沉淀2次后(一次洗涤是指加入70%乙醇震荡，12000～15000g室温离心3分钟，小心吸弃上清)，再短暂离心一次，吸弃残留的液体(约50μL。吸出残留的乙醇很重要，否则它会严重影响后续的电泳上样、酶切、杂交等实验)。
13. 加入50-100μl自备缓冲液(如TE)和5-15μl RNase A溶液溶解沉淀(由于基因组DNA较大，一般需要过夜溶解)。DNA 即可用于电泳，酶切和PCR等反应。如果需要测OD，则必须乙醇沉淀去除降解的RNA。


大肠杆菌DNA连接酶报价关键词：E.coli DNA Ligase,大肠杆菌DNA连接酶,BTN120419


·酵母产孢培养基
编号：BTN130902
英文名称：Sporulation Medium
规格：250mL
本产品由1% KOAc和2%的琼脂组成，用于MATa/MATa二倍体细胞不经过营养生长的过程直接在18-24小时后产孢。如果二倍体细胞是营养缺陷性，则还需要补充加入营养成分。

储存条件：常温运输及保存，有效期两年。

·Orth固定液
编号：BTN140411
英文名称：Orth Fixative Solution
规格：250mL
该固定液固定组织较缓慢，不适合作为临床的活检固定液，4毫米厚的组织固定时间需36-72小时，该液对于染色质的固定好，显示清晰，但可溶解部分红细胞和含铁血黄素。

该固定液不能沉淀蛋白质，它必须和醋酸配成混合固定液。它不能长期固定组织，经它固定的组织应充分水洗后保存于80%酒精中。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

·Pfu DNA聚合酶
编号：BTN51207
英文名称：Pfu DNA Polymerase
规格：100U
Pfu DNA Polymerase是Pyrococcus furiosis(激烈火球菌)DNA Polymerase基因在大肠杆菌中表达并经多次过柱纯化分离而得。可用于高保真PCR、长链PCR的扩增，还可以用于DNA片段的粘转平反应。

产品特点：
1．它具有3´-5´聚合酶活性，跟常用的Taq DNA聚合酶一样，能够用于PCR反应。
2．与Taq DNA Polymerase不同的是，它还具有3´-5´外切酶活性，能纠正DNA扩增过程中产生的碱基错配。
3．其出错率最低的是具有校正功能的耐高温DNA Polymerase中最低的。
4．Pfu DNA聚合酶比普通Taq DNA聚合酶热稳定性更好，95℃ 1小时仍维持90％以上活性。

产品组成：

成分	规格
Pfu DNA聚合酶(3U/μL)	100U
10×Pfu Buffer	0.1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存。

使用方法：(以λDNA为模板进行PCR扩增反应为例)

1．按下列组份配制PCR反应液

Pfu DNA聚合酶(3U/μL)	0.5-1μL
10×Pfu Buffer	5μL
dNTP Mixture(各2.5mM)	4μL
模板DNA	见下
引物1(10 uM)	1μL
引物2(10 uM)	1μL
灭菌蒸馏水	Up to 50μL

推荐50μL PCR反应体系中模板DNA推荐使用量

哺乳动物基因组DNA	0.5-1μg
酵母基因组DNA	5-500ng
细菌基因组DNA	0.5-50ng
质粒DNA	5-500pg
PCR回收片段	1-100pg

2．PCR反应条件
以λDNA为模板，扩增1kbp的DNA片段的PCR反应条件如下：

温度	时间	循环数
94℃	3min
94℃	30sec	30~50循环数
55℃	30sec
72℃	2min
72℃	5min

注：PCR反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况，设定最佳的反应条件(温度、时间等)。

注意事项：
PCR的反应液请在冰中配制，然后置于PCR反应仪上进行PCR反应。这种冷启动法可增强PCR扩增的特异性，减少PCR过程中的非特异性反应，能得到良好的PCR结果。

10×Pfu Buffer的组成：200mM Tris-HCl(pH8.8)，100mM KCl，100mM(NH₄)2SO₄，500mM MgSO₄

活性定义：用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在74℃，30分钟内，摄入10nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位。

质控标准：
1．SDS-PAGE 考马市亮蓝染色无杂带污染。
2．无核酸内切酶活性检测(切刻酶活力)、核酸外切酶活性、核酸酶活性检测。

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