一站式miRNA柱式大提试剂盒哪里卖

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百奥莱博专业生产销*(代"售")一站式miRNA柱式大提试剂盒哪里卖，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：一站式miRNA柱式大提试剂盒哪里卖
规格：5次
品牌：百奥莱博
英文名：One-stop miRNA column large-scale extraction kit
编号：BTN80906
本试剂盒是在柱式miRNA提取试剂盒(BTN80104)基础上自主开发的大提升级产品，是目前国内外市场上最快速最简单的小RNA分离纯化产品。

试剂盒特点：
1.样品处理量大，一次最多可以处理2g的样品。
2.一步法直接分离纯化小RNA，比Ambion的两步法和PAGE电泳回收法更简单。整个过程只需要二十多分钟。
3. 得到的小RNA 长度大部分在200nt以下，包括 5S RNA、tRNA、miRNA、Pre-miRNA、pri-miRNA、siRNA、shRNA和snRNA等。
4.小RNA 纯净，OD260/280一般都在1.9以上。无基因组DNA的污染。可用于RT-PCR、miRNA 标记、microarray等后续实验。
5.产率一般为20-40μg/100mg动物组织。
6.适用范围广，可以用于动物组织、血液及部分植物组织等实验材料。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	50ml
溶液C	100ml
离心吸附柱(大提)	10套
通用洗柱液	100ml
RNA洗脱液	5ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
由于离心吸附柱的吸附量限制，本产品每次提取只能处理2 g左右的各种组织，可以在50mL塑料离心管中操作。
1. 新鲜配制裂解液20mL。将溶液A和溶液B按 1:1的比例混合(即溶液A和溶液B各10mL)，然后根据组织细胞类型的不同分为下面几种情况使用。注意：溶液A和溶液B混合后必须立即使用，不要放置，否则会产生沉淀。如果产生沉淀，需加热到65℃使其溶解后才能使用。
a)对贴壁细胞：吸尽培养液，按每10 平方厘米细胞中加入1mL 新鲜配制的裂解液，用枪轻柔吹打数次，确保细胞全部裂解。
b)对悬浮细胞：离心收集细胞，吸尽液体，按每 1-5×106悬浮细胞中加入1mL 新鲜配制的裂解液，用枪轻柔吹打数次，确保细胞全部裂解。如果是fibroblasts或carcinoma cell，1mL 新鲜配制的裂解液的细胞使用量不要超过1×106个细胞。
c)对新鲜的动物组织：先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入50mL塑料离心管中，每克组织加10mL 新鲜配制的裂解液，用匀浆器匀浆30秒左右。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA)，建议组织的使用量不要超过50mg/ mL 裂解液，否则十分容易产生DNA污染。
d)对新鲜的植物组织：先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入50mL塑料离心管中，每50-100mg 组织加1mL 新鲜配制的裂解液，用匀浆器匀浆30秒左右。
e)对 RNAhold 保存动物或植物组织：先用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块，放入50mL塑料离心管中，每50-100mg 组织加1mL 新鲜配制的裂解液，用匀浆器匀浆30秒左右。
2. 将裂解物转移至一个干净的50mL塑料离心管中，然后加入0.2-0.3倍体积的自备*仿(1mL 裂解物需0.2-0.3mL *仿)，振荡器上充分振荡混均30秒。
3. 12000～15000g室温离心3～5分钟。
4. 将上清液(约12-16mL)转移到一个离心吸附柱(大提)中以去除大RNA。注意：离心后下层有机相和中间层含有DNA和蛋白质，避免触及，否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见，可以留下部分上清液不取。同时吸取上清时最好缓慢进行，否则容易吸出交界面的不可见的丝状DNA。本试剂盒提供的离心吸附柱(大提)之间没任何区别，可以随机选一个做大RNA 吸附，另一个做小RNA 吸附。
5. 12000～15000g室温离心离心吸附柱(大提)1分钟，收集管中的穿透液。大RNA 将与离心吸附柱的膜结合，小RNA 将存在于穿透液中。如果需要回收大RNA，请按附录的方法操作，但需要单独购买本公司的通用洗柱液和RNA 洗脱液。
6.在穿透液中加等体积的溶液C，混匀。此时溶液的总体积约30mL。
7. 分一次或分两次将混合液转移到新的离心吸附柱(大提)中，每次转移后需要12000～15000g室温离心1分钟，弃收集管中的穿透液。
 注意：不要使用已经使用过的、用来吸附大RNA的离心吸附柱(大提)。
8. 加 10mL 通用洗柱液到离心吸附柱(大提)中，12000～15000g室温离心1分钟，弃穿透液。
9. 加 10mL 通用洗柱液到离心吸附柱(大提)中，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
10. 12000～15000g室温离心1分钟以甩出残留液体。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会影响 miRNA的使用。
11. 将离心吸附柱(大提)转移到一自备的、50mL RNase-free 收集管中，加入0.5-1mL RNA 洗脱液。
12. 12000～15000g室温离心1分钟，离心管中收集的溶液即为miRNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。

附录：
1. 用 10mL自备的通用洗柱液洗涤结合有大RNA的离心吸附柱(大提)。
2. 重复上步一次。
3.干甩一次。
4. 加入0.5-1mL RNA 洗脱液，室温放置2-3分钟。
5. 12000～15000g室温离心1分钟，离心管中收集的溶液即为大RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。

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·LB-Lennox培养基
编号：BTN100820
英文名称：LB-Lennox Medium Powder
规格：250g
LB培养基全名是Lysogeny Broth(非Luria-Bertani)，它是由美国科学家Giuseppe Bertani在1951年独立开发。Lennox将其Glucose去掉，并将NaCl浓度从0.5 g/L增加到15 g/L。本产品就是根据Lennox配方制备，可用于各种细菌培养。其盐浓度较LB Miller低一倍，主要跟盐敏感抗菌素(如Zeocine)一起使用。本产品加水灭菌后即得液体培养基，即可使用。配制一升液体培养基需要25g本产品。

储存条件：常温运输及保存，有效期半年。

·液体样品蛋白纯化回收试剂盒
编号：BTN121208
英文名称：Liquid Sample Protein Purification Kit
规格：50次
本产品专门用于对液体样品进行蛋白提取浓缩、脱盐、脱去垢剂、脱还原剂等。

产品特点：
1.适用于各种液体样品，包括蛋白溶液、胞浆提取液、胞核提取液、细胞或微生物培养基上清液、血液、尿液、脑脊液等。也适于原代或传代细胞悬液。
2. 灵敏，对一般蛋白样品，最低浓度可达1μg/mL；对含SDS的样品，最低浓度为5μg/mL。
3.蛋白回收率95-100%，远高于经典的丙*(代"酮")或三*醋酸沉淀法，且可有效去除样品中的脂质，不影响后续SDS-PAGE和Western Blot等生物实验
4. 得到的蛋白质可用于后续的SDS-PAGE、免疫沉淀和质谱分析等实验。但蛋白已经变性，没有活性。
5. 能有效去除液体样品中的盐(1M)、还原剂(1%巯基乙醇或DTT)、去垢剂(5%SDS、1% Triton X-100、1% NP-40)和油脂等。
6. 操作方便迅速，只需要混匀后离心，不需要其他仪器。
7.产品稳定，可室温长期放置。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	0.5ml
溶液B	1ml
溶液C	50ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：

使用方法一(用于不含SDS的液体样品，但样品蛋白浓度不能低于1μg/mL)
1．将100μL需要液体蛋白样品转移到一个自备的1.5mL塑料离心管中。
2．加入10μL溶液A，涡旋激烈震荡10-30秒混匀。
3．冰上放置15分钟。
4．加入10μL溶液B，轻轻混匀。
5．冰上放置60分钟。
6．4℃12000～15000×g离心10分钟。
7．小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
8．加入1mL 冰浴的溶液C，震荡混匀后4℃12000～15000×g离心15分钟。
9．小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
10．短暂离心，小心移弃残留上清液后，将有蛋白沉淀的离心管敞开放置在冰上，空气晾干。一般需要10分钟左右。
11．样品放4℃保存或立即电泳检测。可直接用1×SDS-PAGE上样液或其他电泳缓冲液溶解蛋白沉淀，取适量上样。如果蓝色的*酚蓝染料变黄，则说明有残留酸性物质污染，必须加少量自备的1M Tris-HCl(pH8.8)缓冲液，直到颜色变成蓝色为止，否则将影响电泳结果。

使用方法二(用于含SDS的液体蛋白样品，但样品蛋白浓度不能低于5μg/mL)
1．将200μl液体蛋白样品转移到一个自备的1.5mL塑料离心管中。
2．加入8μl溶液B，涡旋激烈震荡10-30秒混匀。
3．冰上放置30分钟或-20℃放置15分钟(过夜放置更好)。
4．4℃ 12000～15000×g离心15分钟。
5．小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
6．加入1mL 冰浴的溶液C，震荡混匀后4℃ 12000～15000×g离心15分钟。
7．小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
8．短暂离心，小心移弃残留上清液后，将有蛋白沉淀的离心管敞开放置在冰上，空气晾干。一般需要10分钟左右。
9．样品放4℃保存或立即电泳检测。可直接用1×SDS-PAGE上样液或其他电泳缓冲液溶解蛋白沉淀，取适量上样。如果蓝色的*酚蓝染料变黄，则说明有残留酸性物质污染，必须加少量自备的1M Tris-HCl(pH8.8)缓冲液，直到颜色变成蓝色为止，否则将影响电泳结果。

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