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一站式miRNA柱式大提试剂盒现货

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  • ¥160 - 2100
  • 百奥莱博
  • 北京
  • BTN80906-RIJ
  • 2025年07月13日
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      常温运输

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      一年

    • 英文名

      One-stop miRNA column large-scale extraction kit

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      453

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产供应一站式miRNA柱式大提试剂盒现货,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。


    名称:一站式miRNA柱式大提试剂盒现货
    规格:5次
    品牌:百奥莱博
    英文名:One-stop miRNA column large-scale extraction kit
    编号:BTN80906
    本试剂盒是在柱式miRNA提取试剂盒(BTN80104)基础上自主开发的大提升级产品,是目前国内外市场上最快速最简单的小RNA分离纯化产品。

    试剂盒特点:
    1.样品处理量大,一次最多可以处理2g的样品。
    2.一步法直接分离纯化小RNA,比Ambion的两步法和PAGE电泳回收法更简单。整个过程只需要二十多分钟。
    3. 得到的小RNA 长度大部分在200nt以下,包括 5S RNA、tRNA、miRNA、Pre-miRNA、pri-miRNA、siRNA、shRNA和snRNA等。
    4.小RNA 纯净,OD260/280一般都在1.9以上。无基因组DNA的污染。可用于RT-PCR、miRNA 标记、microarray等后续实验。
    5.产率一般为20-40μg/100mg动物组织。
    6.适用范围广,可以用于动物组织、血液及部分植物组织等实验材料。

    试剂盒组成:

     
    成分 规格
    溶液A 50ml
    溶液B 50ml
    溶液C 100ml
    离心吸附柱(大提) 10套
    通用洗柱液 100ml
    RNA洗脱液 5ml
    说明书 1份


    储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。

    使用方法:
    由于离心吸附柱的吸附量限制,本产品每次提取只能处理2 g左右的各种组织,可以在50mL塑料离心管中操作。
    1. 新鲜配制裂解液20mL。将溶液A和溶液B按 1:1的比例混合(即溶液A和溶液B各10mL),然后根据组织细胞类型的不同分为下面几种情况使用。注意:溶液A和溶液B混合后必须立即使用,不要放置,否则会产生沉淀。如果产生沉淀,需加热到65℃使其溶解后才能使用。
    a)对贴壁细胞:吸尽培养液,按每10 平方厘米细胞中加入1mL 新鲜配制的裂解液,用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解。
    b)对悬浮细胞:离心收集细胞,吸尽液体,按每 1-5×106悬浮细胞中加入1mL 新鲜配制的裂解液,用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解。如果是fibroblasts或carcinoma cell,1mL 新鲜配制的裂解液的细胞使用量不要超过1×106个细胞。
    c)对新鲜的动物组织:先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入50mL塑料离心管中,每克组织加10mL 新鲜配制的裂解液,用匀浆器匀浆30秒左右。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA),建议组织的使用量不要超过50mg/ mL 裂解液,否则十分容易产生DNA污染。
    d)对新鲜的植物组织:先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入50mL塑料离心管中,每50-100mg 组织加1mL 新鲜配制的裂解液,用匀浆器匀浆30秒左右。
    e)对 RNAhold 保存动物或植物组织:先用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块,放入50mL塑料离心管中,每50-100mg 组织加1mL 新鲜配制的裂解液,用匀浆器匀浆30秒左右。
    2. 将裂解物转移至一个干净的50mL塑料离心管中,然后加入0.2-0.3倍体积的自备*仿(1mL 裂解物需0.2-0.3mL *仿),振荡器上充分振荡混均30秒。
    3. 12000~15000g室温离心3~5分钟。
    4. 将上清液(约12-16mL)转移到一个离心吸附柱(大提)中以去除大RNA。注意:离心后下层有机相和中间层含有DNA和蛋白质,避免触及,否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见,可以留下部分上清液不取。同时吸取上清时最好缓慢进行,否则容易吸出交界面的不可见的丝状DNA。本试剂盒提供的离心吸附柱(大提)之间没任何区别,可以随机选一个做大RNA 吸附,另一个做小RNA 吸附。
    5. 12000~15000g室温离心离心吸附柱(大提)1分钟,收集管中的穿透液。大RNA 将与离心吸附柱的膜结合,小RNA 将存在于穿透液中。如果需要回收大RNA,请按附录的方法操作,但需要单独购买本公司的通用洗柱液和RNA 洗脱液。
    6.在穿透液中加等体积的溶液C,混匀。此时溶液的总体积约30mL。
    7. 分一次或分两次将混合液转移到新的离心吸附柱(大提)中,每次转移后需要12000~15000g室温离心1分钟,弃收集管中的穿透液。
     注意:不要使用已经使用过的、用来吸附大RNA的离心吸附柱(大提)。
    8. 加 10mL 通用洗柱液到离心吸附柱(大提)中,12000~15000g室温离心1分钟,弃穿透液。
    9. 加 10mL 通用洗柱液到离心吸附柱(大提)中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
    10. 12000~15000g室温离心1分钟以甩出残留液体。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响 miRNA的使用。
    11. 将离心吸附柱(大提)转移到一自备的、50mL RNase-free 收集管中,加入0.5-1mL RNA 洗脱液。
    12. 12000~15000g室温离心1分钟,离心管中收集的溶液即为miRNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。

    附录:
    1. 用 10mL自备的通用洗柱液洗涤结合有大RNA的离心吸附柱(大提)。
    2. 重复上步一次。
    3.干甩一次。
    4. 加入0.5-1mL RNA 洗脱液,室温放置2-3分钟。
    5. 12000~15000g室温离心1分钟,离心管中收集的溶液即为大RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。

    欲了解更多一站式miRNA柱式大提试剂盒现货的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:

    ·10%SDS溶液(DNA级)
    编号:BTN101201
    规格:250mL

    ·利福平溶液
    编号:BTN120700
    英文名称:Rifampicin Solution
    规格:10mL
    本产品为浓度为100mg/mL的利福平溶液(溶剂为DMSO)。利福平(甲哌利福霉素;3-(4-甲基-1-哌*(代"嗪")基亚胺甲基)利福霉素SV;Rifampin;Rifamycin AMP),分子式:C43H58N4O12,分子量:822.94,CAS号:13292-46-1。利福平是从利福霉素B得到的一种半合成抗生素,能抑制细菌DNA转录合成RNA,可抑制成熟病毒粒子DNA和蛋白质的合成,是细菌核糖核酸聚合酶的特殊抑制剂,可用于治疗结核病、肠球菌感染等。除作为抗生素应用外,在分子生物学中可用做从细菌中去除质粒的试剂利福平。

    储存条件:常温运输,4℃保存,有效期6个月。

    ·牛血清白蛋白标准品(BSA标准品)(2mg/mL)
    编号:BTN131070
    英文名称:BSA Standard
    规格:1mL
    本产品为通用型标准品,被公认为比色法蛋白浓度测定中蛋白定量的工业标准;稳定纯度高,在0.9%的超纯生理盐水溶液(加0.05%的叠氮化*)中提供,室温下稳定;本产品浓度为2mg/mL。本品仅用于科研实验,不能用作医疗及临床诊断。

    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    自备试剂:0.9%NaCl溶液或PBS缓冲液、BCA工作液。

    使用方法:
    本产品可应用于蛋白分析定量(BCA蛋白分析、考马斯-Bradford分析等)、抗体脱盐回收或其他层析操作的对照、SDS-PAGE电泳和分光光度计紫外灯的常规校准(吸收峰在280nm)等实验。由于蛋白操作彼此差别太大,本手册只列出此产品用于BCA蛋白分析的实验流程,其他流程不在此详述。

    1.标准品溶液的稀释方法见下表。此标准品溶液的稀释可使用去离子水、0.9% NaCl或PBS。
    2mg/mL本产品(μl) 稀释液(μl) 稀释后产品终浓度(μg/ml)
    120 0 2000
    90 30 1500
    60 60 1000
    45 75 750
    30 90 500
    15 105 250
    10 110 125
    0 120 0(空白对照)

    2.本产品标准曲线的制备
    1)分别取50μL稀释后的本标准品溶液加入到1.5mL离心管中,每个浓度取2个平行样。
    2)在每管中各加入1mL工作液后,立即混匀。
    3)37℃水浴槽中反应30分钟后,冷却至室温。
    4)使用分光光度计测定562nm处的吸光度值。测定时,使用1mL比色皿,用水校零。尽可能在20分钟内检测完毕所有样品。
    5)各浓度本标准品溶液的吸光度值减去空白对照的平均值,绘制本标准品溶液的标准曲线。
    3.检测样品的测定
     检测样品建议与本标准品溶液同时进行测定,测定方法同上,与本标准品的测定方法一致。如果必要也可选择与本标准品溶液相同的稀释方法稀释检测样品后测定。


    一站式miRNA柱式大提试剂盒现货关键词:BTN80906,One-stop miRNA column large-scale extraction kit,一站式miRNA柱式大提试剂盒

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