菌落PCR试剂盒2.0优惠

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")菌落PCR试剂盒2.0优惠，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：菌落PCR试剂盒2.0优惠
编号：BTN50901
品牌：百奥莱博
规格：50次
产地：国产|进口
菌落PCR是筛选重组子的有效方法，可以使质粒鉴定过程从两天缩短到几小时。但由于它直接以E.coli菌落为PCR而菌落中常常含有未进入细菌的、来源于连接反应的载体DNA和插入片段，所以十分容易产生假阳性。本产品针对此缺点进行了改良。

产品特点：
1. 无假阳性率，特殊的溶菌方式能有效降低菌落中未转化DNA 对PCR的干扰，使假阳性率低于5%，远低于绝大部分同类产品。
2. 简单快速，用户只需要提供PCR引物和E.coli菌落，不需要细菌培养和质粒提取,整个筛选过程从一天缩短到2-3小时，节约时间和成本。本产品与常用E.coli菌株和载体兼容。既可小规模筛选，也适用于大规模筛查。
3.高灵敏度，既可用于高拷贝质粒，也适合于低拷贝质粒。
4. PCR反应体系中含有惰性电泳染料，反映完成后可直接上样电泳，不需另加上样液。
5.处理过的菌落样品低温长期保存后仍能用于PCR 筛查。
6. 性价比高，价格跟质粒提取试剂盒相当，但节约一天时间。

成分	规格
溶菌液A	0.5ml
溶菌液B	0.1ml
PCR 2.0	0.75ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 标记1.5mL塑料离心管，除样品管外，还必须加上阳性和阴性对照管。
在每个管中加入下列成份配制100μL 溶菌液：

H2O(自备)	88μl
溶菌液A	10μl
溶菌液B	2μl
合计	100μl

2. 用无菌牙签或无菌移液枪头从培养皿上挑取一个菌落或部分菌落，放入溶菌液中，充分震荡直到菌落彻底分散混匀。为方便回查，最好在培养皿上给已取样的菌落做好标记。
3. 重复第2 步直到待筛查菌落全部转移到相应的离心管中。
4.在阳性对照管中，加入已知含有待筛选质粒的菌落；如果没有此菌落，直接进入第6 步，用连接反应液直接作PCR的阳性对照。
5.在阴性对照管中，加入已知的不含有待筛选质粒的任何E.coli菌落(如常见的宿主细菌)，其他处理同第2 步。
6. 将所有离心管置于37℃保温30分钟，然后转入100℃水浴处理10分钟。振荡混匀溶液数秒后10,000 g离心1分钟，转移上清到一新的离心管中待用。此溶液为样品DNA溶液。
7. 标记与第1 步数量相同的PCR 管，每个管中分别加入下列成份并充分混匀：

样品DNA溶液	1-5μl
PCR MagicMix	15μl
引物1(10 pmol/μL)	1μl(自备)
引物2(10 pmol/μL)	1μl(自备)
Taq物DNA聚合酶(5U/μL)	0.2-0.4μL(1-2U)
补水到	30μl

 注意:引物选择有三种情况，
 一是选用商品化的能与多克隆位点两边顺序结合的通用引物(如T7、T3、SP6等)；
 二是使用用户自己合成的能与插入片段结合的引物(如果插入片段是PCR产物，引物是现成的)；
 三是组合第一种情况和第二种情况的引物。选择前两种引物在筛查到重组子后还必须用其他方法(如质粒制备后酶切或使用载体引物/插入片段引物PCR)进一步确定插入方向。选择第三种引物则可以同时完成重组子筛选和DNA 插入方向确定两项工作。用户可以根据自己的具体情况选择。
8. 将PCR 管放入PCR 仪器中进行扩增，PCR 温度参数根据引物和模板情况由客户自己预先确定。
9. PCR结束后取10μl电泳直接进行琼脂糖电泳分析。(注：本试剂盒提供的PCR buffer中已经含有电泳染料和甘油，故可以直接上样)

除菌落PCR试剂盒2.0优惠外，我公司正在打折促销以下产品：

·柱式拭子DNA提取试剂盒
编号：BTN80801
英文名称：Swab DNA column extraction kit
规格：50次
拭子是一种常用的的生物样品取材方法，可以用于PCR等分子生物学分析。拭子取材的主要特点是快捷和非介入性(不会对对象造成伤害)，尤其适用于大规模筛查取样和特殊群体(如儿童)和组织(如口腔)的取样。市场上专门用于拭子样品DNA提取的产品不多，为此我司开发了本产品。

产品特点：
1.快速柱式操作，整个过程只需要十分钟。
2. DNA纯度高，OD比值一般在1.8左右。
3. 回收率高，一般在0.5μg DNA/拭子左右。
4. 环保安全，不需要使用任何有毒的试剂(包括酚和*仿)。
5. 提取的DNA能够用于电泳、酶切、杂交检测和PCR。
6. 本产品可以跟拭子保存液(BTN80802)结合使用，用于提取保存的样品。

试剂盒组成：

成分	规格
无菌拭子	50只
通用上柱液	25ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：
1. 将拭子涂抹面颊的口腔内表面约十次，放入加有0.5mL通用上柱液的1.5mL塑料离心管中。
2. 剪去口腔拭子柄部，留药棉头于离心管中，盖上离心盖后振荡一分钟。
3. 将上清液(约0.4mL)和拭子一起全部转移到离心吸附柱中。
4. 12000rpm离心一分钟后弃穿透液和拭子。
5.在离心吸附柱中加入700μl的通用洗柱液，室温12000rpm离心1分钟，弃收集管中废液。
6.室温12000rpm离心1分钟，甩干残留液体。此步不能省略，否则残留乙醇会影响DNA的后续使用(如DNA上样时不能沉淀到加样孔中)。
7. 将离心吸附柱置于一个新的1.5mL塑料离心管(自备)中，加入30-50μl DNA洗脱液，室温放置2分钟。
8.室温12000rpm离心1分钟，离心管底溶液即DNA。

附:从非冻型拭子DNA保存液保存的拭子中提取DNA(仅供参考，本产品不提供所需试剂，如果需要请另行购买)
1. 将0.5mL非冻型拭子DNA保存液加入到自备的1.5mL塑料离心管中待用。
2. 用拭子涂抹口腔内表面、鼻腔表面或其他待取样器管的表面约十次。
3. 将拭子放入到加有的1.5mL塑料离心管中，剪去专用拭子柄部，留药棉头于离心管中，盖上离心管管盖后即可长期保存、运输。
4. 保存或运输结束后将药棉头挤干溶液后取出。
5.在剩下的溶液(约0.5mL)中加入1mL通用上柱液，颠倒混匀。
6. 先取0.75mL混合液到离心吸附柱中，室温12000rpm离心1分钟后弃穿透液，然后在将剩下的0.75mL混合液到离心吸附柱中，室温12000rpm离心1分钟后弃穿透液。
7.其余操作接柱式拭子DNA提取试剂盒操作(见上)的第5步。


菌落PCR试剂盒2.0优惠关键词：Colony PCR Kit 2.0,BTN50901,菌落PCR试剂盒2.0

Hanks平衡盐粉剂(含酚红)  1×HBSS 1L|10×1L
间甲*甲*(代"酸") Trifluorothymidine 99-04-7
ARB12448 大鼠*结合蛋白(CR)代做ELISA实验 Rat calretinin,cr ELISA KIT
14930-96-2 Cytochalasin B  细胞松弛素B
BL1173 土壤基因组DNA提取试剂盒
ARB10481 人白介素1β转换酶(ICE)含量检测 Human interleukin 1β converting enzyme,ice ELISA KIT
CYB167070 兔抗HRP
GUS染色液   100ml
钨酸* 2-Ethoxybenzoic acid 10213-10-2
无水*化金 AMPD 13453-07-1
Ehrlich试剂   100ml|500ml
PY08-025  三糖铁琼脂斜面  10支/盒，用于革兰氏阴性肠杆菌的生化鉴定
酵母聚糖A L-Alanine methyl ester hydrochloride 58856-93-2
ARB12383 大鼠肺表面活性物质相关蛋白c(SP-c)elisa检测说明书 Rat associated protein c,sp-c ELISA KIT
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·去离子水
编号：BTN81209
英文名称：Deionized water
规格：250mL

·*蛋白酶抑制剂Ⅰ溶液(10mg/mL)
编号：BTN130537
英文名称：Calpain InhibitorⅠSolution
规格：10mL
本品为10mg/mL的甲醇溶液，工作浓度为17μg/mL。*蛋白酶抑制剂Ⅰ(N-acetyl-Leu-Leunorleucinal,Ac-LLnL-CHO)，分子量是383.5，不溶于水。可以抑制*依赖性的中性半胱*酸蛋白酶活性。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期6个月(4℃稳定一周)。避免反复冻融。

·*霉素溶液
编号：BTN60207
英文名称：Chloramphenicol Solution
规格：10mL
本产品是浓度为25mg/mL的*霉素溶液，可以加入到细菌液体或固体培养基中培养含*霉素抗性基因的细菌。

作用原理：*霉素通过与细菌核糖核蛋白体的50S亚基23S rRNA的A2451和A2452位点结合，抑制peptidyle transferase活性而阻断蛋白质的合成，最后抑制细菌生长。

抗性机制：抗性基因cat特异性表达*霉素乙酰转移酶(chloramphenicol acetyltrasnferase)，它通过乙酰化*霉素而使之不能与核糖体结合。

储存条件：低温运输，-20℃避光保存，有效期6个月。

·放线菌*(代"素")D
编号：BTN120680
英文名称：Actinomycin D Solution
规格：1mL
本品为浓度为1mg/mL 放线菌*(代"素")D的DMSO溶液。放线菌*(代"素")D(更生霉素；Cosmegen、Meractinomycin),分子式为C62H86N12O16，分子量：1255.41。可作为代谢抑制剂，细胞质膜研究。它能抑制RNA的合成，作用于mRNA，干扰细胞的转录过程，阻止蛋白质的合成。吞食有极高毒性。

抗性机制：放线菌*(代"素")D分子中含有一个*氧环结构，通过它连接两个等位的环状肽链。此肽链可与DNA分子的脱氧鸟嘌呤发挥特异性相互作用，使dactinomycin D嵌入DNA双螺旋的小沟中，与DNA形成复合体，阻碍RNA多聚酶的功能，抑制RNA的合成，特别是mRNA的合成。

储存条件：低温运输，-20℃避光保存，有效期6个月。

北京百莱博科技有限公司专业生产克隆与表达产品，欢迎来电咨询选购菌落PCR试剂盒2.0优惠。