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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
171
- 英文名:
Taq Platinum DNA Polymerase
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
250U|500U
特别提示:包括热启动高保真Taq DNA聚合酶在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:热启动高保真Taq DNA聚合酶
英文名称:Taq Platinum DNA Polymerase
产品货号:WH0072
产品规格:250U|500U
本制品是经过化学修饰的热启动耐热聚合酶,具有3′-5′外切酶活性和5′-3′外切核酸酶活性。在常温下Taq Platinum DNA Polymerase的酶活性被封闭,在94℃加热5-10分钟才能回复正常活力,从而避免了PCR反应起始循环前低温条件下由引物非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增,大大提高了PCR反应的灵敏度及特异性。同时Taq Platinum DNA Polymerase具有很高的保真度,仅次于Pfu聚合酶,且DNA聚合时的延伸速度比Pfu聚合酶快,扩增效率更高。PCR产物可直接进行T/A载体克隆,如需提高克隆效率,建议先纯化,加A后再进行T/A载体克隆。本制品可用于从复杂模板中如基因组等扩增高保真产物,如表达基因的克隆、基因的定点突变和细胞内基因点突变的分析(SNP)等。
产品组成:
| 组分 | WH0072-1 | WH0072-2 |
| Taq Platinum DNA Polymerase | 250U | 500 U |
| 10×Taq Platinum Buffer Ⅰ | 1.8ml | 1.8ml |
| 10×Taq Platinum Buffer Ⅱ | 1.8ml | 1.8ml |
10×Taq Platinum Buffer:
BufferⅠ:200mM Tris-HCl (pH 8.8);100 mM KCl;100 mM (NH4)2SO4;15 mM MgSO4;其它成分。
BufferⅡ:200mM Tris-HCl (pH 9.0);200mM KCl;60 mM (NH4)2SO4;15 mM MgCl2;其它成分。
注意:请先使用BufferⅠ,当使用BufferⅠ不能扩增时再试用BufferⅡ
储存条件:-20℃保存
活性定义:
1单位(U)Taq Platinum DNA Polymerase活力定义为在74℃、30min内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,将10nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
质量控制:
SDS-PAGE检测纯度大于99%;经检测无外源核酸酶活性;PCR方法检测无宿主残余DNA;能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因;室温存放一周,无明显活性改变。
使用举例:
注意:以下举例为常规PCR反应系统,仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异,需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物长短等具体情况,设定zuì佳反应条件。以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段
1.反应体系的建立:50μl反应体系如下(可根据比例放大或缩小反应体系):
| 组份 | 体积 |
| Template | <1μg |
| Primer 1(10μM) | 1 μl |
| Primer 2(10μM) | 1 μl |
| 10×Taq Platinum Buffer | 5 μl |
| dNTP Mixture(2.5 mM) | 4 μl |
| Taq Platinum(2.5 U/μl) | 0.5-1 μl |
| ddH2O | 补至50μl |
2.PCR反应循环的设置:
3.结果检测:反应结束后取5 μl反应产物,琼脂糖凝胶电泳检测。
我公司销售的热启动高保真Taq DNA聚合酶,Taq Platinum DNA Polymerase质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验释放酶活;一类是抗体法修饰的热启动酶,如 Champagne Taq ,预变性 95℃30s 即可释放酶活。使用时注意预变性时间,方能获得满意的扩增效果。 2. 选择 Lamp 扩增长片段 大于 5Kb 的长片段又该如何扩增呢?如果实验对保真度的需求不高,那么就可以使用 LAmp DNA 聚合酶。其保真度是 Taq 酶的 6 倍,可扩增超过 20Kb 的基因组、cDNA 片段,对于低拷贝、低纯度、以及不同 GC 含量的模板都具有很高的成功率。 3. 选择高保真酶快速高效扩增 如果实
【分享】Taq DNA聚合酶、Pfu DNA聚合酶等酶的特点及应用
Platinum:热启动高保真耐热DNA聚合酶。如果对保真度要求很高,而用Pfu扩增有难度,可选用Taq Platinum,一般扩增长度可达4kb。 根据不同的实验目的选择最合适的酶, 克隆普通长度的目的DNA 片段:Taq、Taq Plus 保真度要求较高,片段比较短,如点突变、基因筛选等:Pfu、Taq Platinum 高保真长片段扩增,如构建基因图谱及分子遗传学研究等:Long Taq、Taq Plus 扩增基因组模板,需要降低背景:Hotstart Taq、Taq Platinum
下,活性被化学基团封闭,要在94-95℃加热数分钟才能回复正常活力开始反应,避免了起始循环较低温度下的非特异性扩增,提高了反应的灵敏度和特异性。 Long Taq:具有3’-5’外切酶活性的耐热DNA聚合酶,它不但扩增效率高而且错配率低,对于简单模板可扩增长达40kb的模板,对复杂模板也可扩增长达15kb的片段。 Taq Platinum:热启动高保真耐热DNA聚合酶。如果对保真度要求很高,而用Pfu扩增有难度,可选用Taq Platinum,一般扩增长度可达4kb。 不同实验
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