2×Long PCR Master Mix(不含染料)

特别提示：包括2×Long PCR Master Mix(不含染料)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：2×Long PCR Master Mix(不含染料)
英文名称：2×Long PCR Master Mix (No Dye)
产品货号：SY0032
产品规格：1ml

Long PCR Master Mix (No Dye)包含Long Taq DNA Polymerase，dNTP以及优化的缓冲体系，只需加入引物和模板即可进行扩增，大大简化实验的操作步骤，提高了高通量操作和实验结果的重现性。Long Taq DNA Polymerase是Taq DNA Polymerase与一种含有3"→5’外切酶活性（校对活性）的蛋白组成的混合酶，保真度是Taq DNA Polymerase的6倍。配合独特的缓冲体系，Long Taq DNA Polymerase可从人基因组模板中扩增长达15 kb的片段。

Mix中不含有溴酚蓝染料，其中的保护剂使得Mix 经过反复冻融后仍可保持稳定的活性。PCR产物的3’端带A，可轻松克隆至T载体。

质量控制
核酸外切酶残留检测：20 μl本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在74 ºC下孵育1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测：20 μl本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74 ºC下孵育1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留DNA检测: 50 μl体系中，以ddH2O为模板，扩增E.coil 16s rDNA基因。35个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，无扩增条带。
功能检测：50 μl体系中，以100 ng人基因组DNA为模板扩增dystrophin基因。30个循环后取10% PCR产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，观察到单一的15 Kb条带。

操作注意事项
由于Long Taq DNA Polymerase在室温下也有一定的反应活性，建议在冰上配制PCR反应体系，再置于PCR仪上进行扩增。这样有利于提高扩增的特异性，减少非特异扩增，得到良好的PCR结果。

引物设计注意事项
1）引物3’端最后一个碱基最好为G或者C；
2）引物3’端最后8个碱基应避免出现连续错配；
3）引物3’端尽量避免发夹结构出现；
4）引物的Tm值调整至55℃-65℃之间。
5）引物额外附加序列，即与模板非配对序列，不应参与引物Tm值计算；
6）引物的GC含量控制在40%-60%之间；
7）正向引物和反向引物Tm值以及GC含量尽可能一致。

除了2×Long PCR Master Mix(不含染料),，我公司还供应以下相关产品：


BTN60804 PCR抑制物清除剂 1mL
BTN51208B dNTP溶液(10mM) 0.5mL
BTN131178 DNA Shuffling试剂盒 10次
BTN131179 核酸稀释液，测OD专用 250mL
YT388 dTTP溶液(100mM) 250μl
WE0114 2×BaHF MasterMix(含染料) 5ml
WE0126 防污染多重PCR MasterMix(含UNG酶) 1ml
WE0127 全血Taq DNA聚合酶 2500U
WE0137 一步法Real-Time RT-qPCR试剂盒 100次
WE0153 快速实时荧光定量PCR的预混体系(荧光探针)(高含量ROX校正染料) 5ml
ALH272 一步法耐热RT-PCR试剂盒 50μl×50次|50μl×100次
ALH193 两步法耐热RT-qPCR试剂盒 50μl×25次|50μl×50次
ALH195 一步法荧光定量RT-PCR试剂盒 50μl×50次|50μl×100次
RFT093 2×pfu PCR MasterMix 500μl|5×500μl
SY0029 2×PCR Plus Master Mix(不含染料) 5×1ml
SY0041 脱氧腺苷三磷酸溶液(100 mM)(dATP) 400ul
JN0064 10mM dUTP溶液 250μl×5
QN0949 2×SYBR Green PCR Mastermix 50T|200T
QN0960 通用引物 Random 250μl(10uM)
CZ035 热启动Taq DNA聚合酶(无外切酶活性) 250U/1000U/10000U
BTN170705 2×Lamp MasterMix 1mL
MT0028 Bst DNA聚合酶2.0 1600U|16000U
GL1304 二磷酸腺苷溶液(ADP,1mmol/L) 10ml