北京现货DNA Shuffling试剂盒哪里卖

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应北京现货DNA Shuffling试剂盒哪里卖，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：北京现货DNA Shuffling试剂盒哪里卖
英文名：DNA Shuffling Kit
编号：BTN131178
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
规格：10次
DNA Shuffling即DNA分子的体外同源重组，它是一种分子水平上的定向进化(directed evolution)技术，它以一个或多个基因为起始材料，通过先随机断裂成小片段，再进行互为模板和引物的PCR(无外加引物)，最后再进行常规PCR(外加引物)等处理，最后得到含有大量DNA重组突变的PCR产物。其原理示意图如下：


产品特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品DNA模板，无需单独准备各成分。
2.操作手册经过优化，1-2天即可完成，节省大量优化时间。
3.本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

试剂盒组成：

 

成分	规格
PCR Mix 3.0，2×	1.5mL
DNase I溶液(1U/μL)	10μl
溶液A，10×	60μl
溶液B，10×	60μl
超纯水	1mL
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，保存期限一年。

使用方法：
1.待突变基因片段的制备：待突变基因片段可以用含此基因的质粒为模板、用PCR法或酶切法制备。制备时需保证含此基因(或此基因的一部分)的DNA片段总长度不要超过1kb，同时比DNA shuffling终产物(第二轮PCR产物)长200-400bp。每次DNA Shuffling实验至少需要2μg起始DNA片段(如果含几个基因片段，则彼此的比例为1:1)，并且必须通过胶回收的方法回收，以便彻底去除残留的质粒模板、引物和非特异扩增产物等。最后需用分光光度法准确定量。
2.提前准备37℃和75℃水浴，同时新鲜配制0.1U/μL的DNase工作液放冰上待用(必须在用时才配制，方法是将1μl 本试剂盒提供的1U/μL的DNase I溶液和1μl溶液A和8μl超纯水混合)。此溶液需在24小时内使用。
3.在一个离心管中，按顺序加入下列成分：

成分	用量
待突变基因片段(第1步制备)	2μg
溶液A	5μl
溶液B	5μL
DNase I工作液(第2步制备)	2μL
超纯水	36μL

4.充分轻柔吹打混匀后37℃水浴8分钟，然后立即放75℃水浴处理10分钟以灭活DNase I。
5.在2-3%琼脂糖凝胶上电泳，用常规的胶回收法回收25-150bp范围的所有片段待用。注意：一定要加合适的DNA marker以便确定片段范围，最好使用本公司生产的绿如蓝核酸染料(可见光型)作为电泳染料以避免用UV照射DNA，否则UV使DNA发生的交联将极大降低后续扩增效果。
6.分光光度法精确测定回收片段的浓度。
7.在PCR管中按顺序加入0.5μg上步回收得到的回收片段、50μl 2×PCR Mix、加超纯水到100μl。
8.按下面的PCR反应参数进行第一轮无引物PCR：

过程	温度	时间
PCR前变性	94℃	150s
PCR反应(40循环)	94℃	30s
	47.5℃	45s
	72℃	10s，每次循环后增加5s
PCR后延伸	72℃	10min

9.取5-10μl进行电泳检测，然后进行PCR回收，得到第一轮PCR产物。
10.将回收的第一轮PCR产物1μl原液作为模板设置3管第二轮PCR反应。

成分	用量
回收的第一轮PCR产物	1μL
PCR Mix 3.0，2×	50μL
自备DNA Shuffling引物	各1μM
超纯水	加水到100μL

11.按下列PCR参数进行第二轮PCR。

过程	温度	时间
活化	94℃	150s
PCR反应(25次循环)	94℃	30s
	47.5℃	45s
	72℃	60s，每次循环后增加5s
PCR后延伸	72℃	10min

12.电泳检测，回收预期大小的PCR产物，用于后续的构建克隆文库实验(略)。

疑难解答：
Q：易错PCR和DNA Shuffling有何区别？
A：前者引入的是点突变，后者引入的是重组突变。示意图如下：


北京现货DNA Shuffling试剂盒哪里卖正在火爆热销，除此之外，为您推荐下别热销产品：

·SP6 RNA聚合酶
编号：BTN120307
英文名称：SP6 RNA Polymerase
规格：1000U
本酶是鼠伤寒沙门氏菌的噬菌体SP6 DNA编码的酶，对SP6启动子序列具有高度特异性，不能识别其它生物来源的启动子。本酶是依赖于DNA的RNA聚合酶，具有 5´→3´的RNA聚合酶活性，以含有SP6启动子序列的双链DNA为模板，以NTP为底物，合成与启动子下游的单链DNA互补的RNA。

产品用途：
1．为Northern杂交以及Southern杂交制作高标记探针。
2．制作RNA剪接反应的前体。
3．以帽类似物为引物，制作Capped mRNA。

产品组成：

成份	规格
SP6 RNA聚合酶	50μL(20U/μL)
5×转录缓冲液	0.25mL
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1个活性单位是指在37℃、60分钟内将1nmol的AMP合成掺入到寡聚核苷酸片段(DE-81光吸收形式)所需的酶量。


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·生物素化的Oligo(dT)
编号：BTN130977
英文名称：Biotinylated Oligo(dT)
规格：5μg
本产品是生物素标记的Oligo(dT)，其可与大部分真核生物 mRNA中携带的ploy(A)形成共价杂交偶联实现的，通过生物素和链霉亲和素的亲和作用，实现对mRNA的直接分离，也可用于从总 RNA中进行第二轮纯化mRNA。

储存条件：常温运输及保存、有效期一年。

·Southern级真菌DNA提取试剂盒
编号：BTN130943
英文名称：Fungus DNA extraction kit(Southern Grade)
规格：10次
本产品是生物素标记的Oligo(dT)，其可与大部分真核生物 mRNA中携带的ploy(A)形成共价杂交偶联实现的，通过生物素和链霉亲和素的亲和作用，实现对mRNA的直接分离，也可用于从总 RNA中进行第二轮纯化mRNA。

储存条件：常温运输及保存、有效期一年。

·DNA洗脱液
编号：BTN70705
英文名称：Fungus DNA extraction kit(Southern Grade)
规格：10mL
本产品是生物素标记的Oligo(dT)，其可与大部分真核生物 mRNA中携带的ploy(A)形成共价杂交偶联实现的，通过生物素和链霉亲和素的亲和作用，实现对mRNA的直接分离，也可用于从总 RNA中进行第二轮纯化mRNA。

储存条件：常温运输及保存、有效期一年。

·DNA marker(100-600bp)
编号：BTN70503B
英文名称：DNA ladder(100-600bp)
规格：50次
 本系列产品用作凝胶电泳中双链线状DNA的分子量大小参照。它们是由一系列大小不同的单一DNA片段混合组成。成分中已经含有上样缓冲液，所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确，明亮清晰，背景较低，稳定性很好。每次加样量为5μL，可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

使用方法：直接上样电泳，每次加样量为5μL。

使用效果：

注：400bp条带为20ng/uL,其余每条带为10ng/uL

疑难解答：
a)如对带型要求较高，建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液，电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液，电压为80V)，同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖，同时要经常更换电泳缓冲液。
c)本产品条带均匀，亮度相当，但在EB胶中长时间电泳有可能会出现250bp以下的条带变淡。可以通过先电泳再染色，加大EB浓度等方法解决。


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D-(-)水杨苷 Arsenazo III 138-52-3
SuperReal PreMix(Probe) 
BL1130 ELISA终止液
磷酸* 3-(2-Aminoethylamino)propyldimethoxymethylsilane 10377-52-3
ARB10255 人二级淋巴组织趋化因子(SLC/CCL21)血清中含量检测 Human secondary lymphoid-tissue chemokine,slc ELISA KIT
ARB10953 人肝细胞生长因子受体(HGFR)代做ELISA实验 Human hepatocyte growth factor receptor, hgfr ELISA KIT
ARB11538 人高铁血红蛋白(MHB)检测服务 Human methemoglobin,mhb ELISA KIT
ARB10865 人抗核仁纤维蛋白抗体(AFA/snoRNP/U3RNP)ELISA代测服务 Human anti-fibrillarin antibody,afa/snornp/u3rnp ELISA KIT
ARB10336 人水通道蛋白3(AQP-3)酶联免疫定量检测 Human aquaporin 3,aqp-3 ELISA KIT
F030620 FITC标记兔抗马IgG抗体 Rabbit Anti-Horse IgG*FITC
C0401 标准新生牛血清(无菌过滤) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
PY08-068  改良马丁培养基 225ml  20瓶/箱，用于生物制品霉菌检验
甲基蓝水溶液 Methyl blue Solution 1% 100ml
BL0819 HRP标记兔抗牛IgG抗体
ARB13237 小鼠蛋白*(代"磷")酸酶(PP)elisa检测 Mouse protein phosphatase,pp ELISA KIT

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