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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
271
- 英文名:
dTTP Solution,100mM
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输和-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货dTTP溶液,100mM促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货dTTP溶液,100mM促销
编号:BTN120617
产地:国产|进口
规格:0.5mL
品牌:百奥莱博
英文名:dTTP Solution,100mM
本产品纯度在98%以上(HPLC检测),不含DNA内切酶、DNA外切酶、RNA酶和磷酸酶的污染,可以直接用于PCR、RT-PCR、cDNA合成、DNA测序、DNA探针标记等反应。
dTTP分子式为C10H14N2O14P3Na3,分子量是548.1,消光系数为:9.6×103M-1×cm-1(pH7.0)。λmax为267nm。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
北京现货dTTP溶液,100mM促销正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:
·链霉亲和素磁珠
编号:BTN130521
英文名称:Magnetic beads binding with streptavidin
规格:2mL
本产品是由磁性纳米颗粒与高纯度的链霉亲和素共价偶联而成。这种微球能用于捕获生物素标记的底物,如抗原、抗体和核酸等。链霉亲和素(streptavidin)与生物素(biotin)的结合是最著名的非共价生物交互作用之一,因此,这也是亲和层析法所使用的一种强大工具。生物分子可以与生物素轻松融合,而层析基质上固定的链霉亲和素配体可以与之结合,而且这种链霉亲和素-生物素相互作用具有较低的非特异亲和性,捕获所需的底物能够直接应用于后续实验。本产品可广泛应用于免疫学检测、核酸纯化、核酸固相杂交检测、细胞分选等分子生物学实验。
产品特点:
1. 对于生物素化样品的捕获、漂洗及检测等流程操作更加简便。
2. 体系经过优化,更易于大规模、多样品、自动化操作。
3. 磁珠浓度:1%磁珠含量;
固相载体:超顺磁性硅基磁珠;
磁珠粒径:1μm;
pH耐受范围:2-9。
4. 载样量(每毫克磁珠):﹥3000pmol游离生物素;﹥450pmol生物素标记的单链寡核苷酸;﹥20μg生物素化IgG。
5.缓冲液:10mM PBS,0.1% BSA,0.05% sodiu*(代"m") azide,0.1% Tween20。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 取适量磁珠(推荐每次取30μL-50μL 磁珠混悬液,用户可根据样品种类及需求调整使用量)于干净离心管中,通过磁力架磁分离后弃上清。
注:磁珠使用前请使用上样缓冲液淋洗磁珠3-5次,以保证磁珠的使用效果。
2. 加入待反应样品,室温振荡反应10-30分钟后(反应时间根据生物素化分子的大小及空间结构的复杂性可适当延长),置于磁力架上进行磁分离,弃上清,并用上样缓冲液重复淋洗3次。
3. 链霉亲和素和生物素的结合非常迅速,且结合后不受pH,温度,有机溶剂和其他变性剂的影响。下表列出了常用链霉亲和素和生物素的解离办法及效率(基于游离生物素,与偶联复合物的生物素数据有明显差异),用户也可根据自己样品的需求自行设定洗脱方式。
4. 洗脱后的样品客户可根据需求采用适当方法检测。
洗脱条件参照表:
| 洗脱温度和时间 | 洗脱溶液 | 洗脱效率 |
| 90℃ for 10min | 10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺 | 96.8% |
| 90℃ for 5min | 10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺 | 96.4% |
| 90℃ for 2min | 10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺 | 96.8% |
| 65℃ for 5min | 10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺 | 96.4% |
| 65℃ for 2min | 10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺 | 97.9% |
| 37℃ for 10min | 10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺 | 41.9% |
| 90℃ for 10min | H2O | 7.3% |
| 90℃ for 10min | 10mM EDTA pH8.2 | 52.0% |
| 90℃ for 10min | 95%甲酰胺 | 35.9% |
| 90℃ for 10min | 30mM NaOAc pH9 and 95%甲酰胺 | 95.5% |
| 90℃ for 10min | 80mM NaOAc pH9 and 95%甲酰胺 | 97.3% |
| 90℃ for 10min | 140mM NaOAc pH9 and 95%甲酰胺 | 95.4% |
使用举例:
利用链霉亲和素磁珠从总RNA中提取mRNA的方法
1. 取0.1-1mg的总RNA样品加入到无菌、无RNase的1.5ml离心管中,加入无菌去离子水至终体积为500μl(注:总RNA 量可低至50μg,但是在该条件下所提取得到的mRNA 常规电泳检测不到,需要采用RT-PCR进行微量检测)。
2. 将上步样品管于65℃温浴10min。
3. 加入3μl 生物素化的Oligo(dT)和13μl的20×SSC溶液到总RNA样品中,温和混匀,室温放置至完全冷却,这一步需要约10min左右。
4.预处理链霉亲和素磁珠:将链霉亲和素磁珠充分混匀后,取适量磁珠于1.5mL无菌、无RNase的离心管内,放在磁力架上,待磁液分离后,移除上清。加1mL 0.5× SSC 洗涤磁珠,放在磁力架上磁液分离,移除上清,重复两次。加100μl 0.5× SSC重悬链霉亲和素磁珠。
5. 将第3 步制备的总RNA 混合溶液加入到上步制备的已经洗涤好且重悬的链霉亲和素磁珠溶液中。
6.室温放置10min,期间每隔1-2min 轻柔混匀以防磁珠出现沉降现象。采用磁力架分离磁珠,小心移除上清,过程中不要触碰到磁珠,该步上清在确定mRNA已经结合并洗脱后再弃掉。
7. 加300μl 0.1×SSC溶液温和吹打或是轻弹洗涤磁珠,然后置于磁力架上分离磁珠,磁液分离后小心移除上清,重复三次,最后一步洗涤后尽可能移除所有上清液。
8. 加入100μl 无RNase 去离子水(洗脱液),温和吹打或轻弹离心管使磁珠和洗脱液充分混匀。65℃水浴2分钟。
9. 置于磁力架上分离磁珠,将上清转移到一个新的无RNase的离心管内,不要触碰到磁珠(注:如果在转移过程中将磁珠悬起,可将样品管置回磁力架上重新吸取上清)。
10. 回收洗脱液中的mRNA。
链霉亲和素磁珠提取生物素化IgG
1.预处理链霉亲和素磁珠:链霉亲和素磁珠的保存需要加入BSA以保持其活性,故在使用链霉亲和素磁珠之前要彻底除去磁珠储存缓冲液中的BSA、叠氮*和Tween20。使用前需用PBS缓冲液于30分钟之内清洗3次以使磁珠达到最佳使用效果。
注:在使用前必须彻底重悬链霉亲和素磁珠以保证最佳使用效果和重复性。如果磁珠出现结块现象请勿再继续使用。
2. 将生物素化的IgG 溶解于PBS,IgG浓度大于2mg/mL 较利于筛选。
3. 取100μl预处理过的链霉亲和素磁珠充分震荡混匀,置于磁力架上分离磁珠,去除上清,该过程尽量不要触碰到磁珠团。
4. 取500μl PBS 重悬磁珠,放于磁力架上,磁液分离后,移除上清,重复洗两次。PBS 重悬磁珠,使磁珠恢复到最初的浓度10mg/mL。
5. 将第2 步制备的IgG 加到磁珠管内,室温震荡反应30min。保持磁珠处于悬浮状态,以达到好的结合效率。反应结束后,置于磁力架上,磁液分离后,用移液器小心将上清移至一干净离心管内。注:该步上清可以用来检测未结合到链霉亲和素磁珠上的IgG浓度。
6. 加入1mL PBS溶液重悬淋洗磁珠,置于磁力架上,磁液分离后,移除上清,重复淋洗两次。
7. 选择合适的洗脱方式洗脱IgG。
北京现货dTTP溶液,100mM促销关键词:dTTP溶液,100mM,dTTP Solution,100mM,BTN120617
H1401 小鼠血浆(去红细胞、无菌过滤) 100ml/200ml/500ml
ARB12824 小鼠干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)定量分析 Mouse stem cell factor/mast cell growth factor,scf/mgf ELISA KIT
9037-22-3 支链淀粉 Amylopectin
300bp DNA ladder(300-5000bp) 100次
66-81-*(代"9") Cycloheximide
ARB10448 人甲酰甲硫*酸(fMet)尿液中含量检测 Human formylmethionine,fmet ELISA KIT
553-24-2 Neutral Red Certified中性红
油红O异丙醇饱和液 100ml
ARB11002 人补体1抑制物抗体(C1INH)代做ELISA实验 Human complement 1 inhibitor autoantibody,c1inh ELISA KIT
CYB165029 生物素化兔抗鸡IgG(Y)
王树脂 β-carotene
ARB13336 牛免疫球蛋白A(IgA)酶联免疫定量检测
KT205 Taq Plus MasterMix
红细胞稀释液(计数用) 100ml
ARB10919 人抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体(MOG-Ab)elisa检测
ARB12663 大鼠碱性成纤维生长因子(bFGF)血清中含量检测 Rat basic fibroblast growth factor,bfgf ELISA KIT
结晶紫甲醇溶液(2.5%) 100ml
PY08-084 品红亚硫*(代"酸")*琼脂平板 9CM 10皿/盒,用于饮用水、水源中大肠菌群的选择性分离培养
北京现货dTTP溶液,100mM促销关键词:dTTP溶液,100mM,dTTP Solution,100mM,BTN120617
·小牛胸腺DNA溶液
编号:BTN131207
英文名称:Calf Thymus DNA Solution
规格:1mL
本产品是浓度为10mg/mL的、经过热变性处理的单链小牛胸腺DNA溶液,可以用于Southern、Northern预杂交,还可以用于酵母化学转化和电转化。本产品即开即用,非常方便。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
·大肠杆菌HB101化学感受态细胞
编号:BTN81221
英文名称:E.coli HB101 Chemical Competent Cell
规格:0.1mL*10
HB101菌株是E.coli K12菌株与E.coli B菌株的杂合产物(同时也是Stbl3的原始菌株)。recA13突变可有效抑制长片段末端重复区的重组,降低错误重组的概率;但不含核酸酶endA1突变,体内核酸酶含量较高,提取质粒时务必使用质粒提取试剂盒中去蛋白液。hsdS20 背景使HB101缺失内切酶系统,增强了外源DNA的稳定性和提取质量。本产品是采用大肠杆菌HB101特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。
产品特点:
1. 具有链霉素抗性。
2.基因型:F- mcrB mrr hsdS20(rB- mB-)recA13 leuB6 ara-14 proA2 lacY1galK2 xyl-5 mtl-1rpsL20((strR)glnV44λ-。
3. 不存在 lacIqZΔM15,不可用于蓝、白斑筛选。
4. 该菌株遗传性能稳定,使用方便,适用于各种基因重组实验。
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞处于冰水混合状态时,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μL感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴25分钟。
3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟,晃动会降低转化效率。
4. 每个离心管中加入450μL 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,200rpm 振荡培养60分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含有相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃倒置培养12-16小时。
注意事项:
1. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
2. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μL转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(5000rpm,1分钟)收菌后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
3. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
4. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
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