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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输
- 保质期:
长期
- 英文名:
Bsu DNA Polymerase,Large Fragment
- 库存:
802
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应Bsu DNA聚合酶,大片段 工具酶,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:Bsu DNA聚合酶,大片段 工具酶
品牌:百奥莱博
英文名:Bsu DNA Polymerase,Large Fragment
编号:BTN130616
产地:国产|进口
Bsu DNA聚合酶大片段保留了Bacillus subtilis DNA聚合酶I的5´→3´聚合酶活性,但是缺失了5´→3´外切酶结构域。大片段缺乏3´→5´外切酶活性。
产品用途:
1.DNA等温扩增;
2.引物延伸;
3.80℃ 20分钟即可失活;
4.建议反应温度不要超过70℃,不能用于热循环测序或PCR。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| Bsu DNA聚合酶,大片段,5000U/mL | 0.04ml |
| 反应Buffer,10× | 1.25ml |
| 说明书 | 1份 |
活性单位定义:1单位指37℃条件下,30分钟内使10nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。
储存Buffer:25mM Tris-HCl(pH7.4),50mM NaCl,1mM DTT,0.1mM EDTA,50% Glycerol。
反应条件:1×Buffer[10mM Tris-HCl,50mM NaCl,10mM MgCl2,1mM DTT(pH7.9 @ 25℃)]。加入33μm dNTPs(不随酶提供),37℃孵育。
灭活:75℃ 20分钟。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
备注:
1.由于缺乏3´→5´核酸外切酶活性,Bsu DNA聚合酶大片段不能切除3´未配对的突出末端,因而不适用于生成平滑末端;
2.25℃时,Bsu DNA聚合酶,大片段保留50%的活性,是同温度下Klenow片段(3´→5´exo–)的两倍。
我公司的Bsu DNA聚合酶,大片段 工具酶,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·硅胶膜DNA离心吸附柱(大量提取)
编号:BTN90303
英文名称:Silica Spin Column For Maxiprep
规格:1套
硅胶膜离心吸附柱目前广泛用于基因组DNA提取、总RNA提取、DNA反应纯化、DNA胶回收和质粒DNA制备等分子生物学实验,但是由于硅胶膜吸附核酸的能力千差万别(详细分析见百奥莱博综述Silica-DNA结合原理及影响因素),使得市场上相关产品的质量也良莠不齐。百奥莱博经过精心研究,找到特殊的化学修饰方法,使普通硅胶膜吸附核酸的能力增加3-12倍,优于市场上绝大多数产品。本产品就是基于化学修饰硅胶膜的高载量离心吸附柱。
产品特点:
1.高载量,在同等上样条件下吸附能力比同类产品高1-2倍左右。
2.与50mL离心管兼容。
3.与各种常用的,基于Silica-DNA结合原理的上柱液和洗柱液兼容。
4.可以再生使用(需要百奥莱博的离心吸附柱再生液)。
5. 结合DNA的性能不会随放置的时间变化。
储存条件:常温运输及保存,有效期两年。
使用效果:
图注:高拷贝质粒pWXL001从70mL过夜培养菌液中提取得到。从左到右分别为第一次,第二次,第三次,第四次和第五次洗脱,每次洗脱体积均为1mL。上样体积为10μl,最后在0.8%琼脂糖凝胶中电泳后紫外观察。使用的染料为百奥莱博绿如蓝染料,电泳缓冲液为超快电泳液。第一次洗脱约25%的质粒DNA,第二次洗脱约35%的质粒DNA;第三次洗脱约20%的质粒DNA;第四次洗脱约10%的质粒DNA;第五次洗脱约8%的质粒DNA。本次实验质粒DNA产量是465.5μg,产率是6.65μg/mL
Bsu DNA聚合酶,大片段 工具酶关键词:Bsu DNA聚合酶,大片段,Bsu DNA Polymerase,Large Fragment,BTN130616
BL1383 SABC小鼠IgG-POD kit
ARB11029 人阿立新A(OrexIn A)检测服务 Human orexin a ELISA KIT
ARB10680 人血管舒缓激肽(BK)ELISA检测服务 Human bradykinin,bk ELISA KIT
BTN120406 柱式植物叶绿体DNAOUT Column Plant Chloroplast DNAOUT
ARB13057 小鼠肾上腺素(EPI)代做ELISA实验 Mouse epinephrine/adrenaline,epi ELISA KIT
多聚半乳糖醛酸 D-Aspartic acid dimethyl ester hydrochloride 25990-10-7
PY01-008A 牛肉浸粉 250克|1公斤
ARB10538 人主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)酶联免疫定量检测 Human major Histocomp*(代"a")tibility complex Ⅱ,mhcⅡ/hla-Ⅱ ELISA KIT
BTN120628 GTP溶液,100mM GTP Solution
BL1210 石炭酸复红染液(*酚品红染液)
BTN3070 动物RNAOUT Animal RNAOUT(TRIzol)
Acr-Bis(40%,37.5:1) 500ml
A2207-56 猪血清 100ml|500ml
偶氮脒类引发剂V60 Poly U 78-67-*(代"1")
HC0145 湿盒避光
BTN3092 *化乙锭清除剂 EB Erasol
Bsu DNA聚合酶,大片段 工具酶关键词:Bsu DNA聚合酶,大片段,Bsu DNA Polymerase,Large Fragment,BTN130616
·氧钒核糖核苷复合物(RVC/VRC)
编号:BTN3110
英文名称:Ribonucleoside Vanadyl Complex
规格:10mL
本品是一种能抑制多种RNase活性的过渡态化合物,适用于加入到RNA提取、FISH和Microdissection等缓冲液中保护RNA分子的完整性。RVC 尤其适合于抑制植物中的RNase。
产品特点:
1. 抑制RNase活性,RVC 能抑制动物、植物和真菌的各种RNase的活性,Ki 值为10 微摩尔,加入到RNA提取液中能明显改善RNA提取效果。
2.与蛋白质的RNase inhibitor相比,其保存不需要DTT。
3. 性价比高于RNase inhibitor。
储存条件:低温运输,-20℃运输及保存,有效期一年。
使用方法:
将RVC 原液(200mM)在65℃融化,然后按1/10-1/20的比例直接加入各种缓冲液中即可使用(RVC的工作浓度在10-20mM之间)。可以加入的缓冲液包括各种RNA提取液、FISH和Microdissection缓冲液等。
注意事项:
1. RVC不稳定,不能预先加入缓冲液中,必须即配即用。
2.溶液中最好不要有EDTA,否则RVC复合物容易分解。
3. RVC会抑制体外转译系统。
4.在浓度高达2mM时,可以抑制AMV催化的逆转录反应。
5. RVC不抑制DNase,故可以与DNase一起使用去除RNA样品中的DNA污染。
6.反应后如果需要去除RVC,可加入10倍浓度的EDTA,然后用乙醇沉淀RNA。
·石蜡包埋组织直接RT-PCR试剂盒(免RNA提取)
编号:BTN131176
英文名称:FFPE direct RT-PCR Kit (RNA extraction-free)
规格:30次
本品是一种能抑制多种RNase活性的过渡态化合物,适用于加入到RNA提取、FISH和Microdissection等缓冲液中保护RNA分子的完整性。RVC 尤其适合于抑制植物中的RNase。
产品特点:
1. 抑制RNase活性,RVC 能抑制动物、植物和真菌的各种RNase的活性,Ki 值为10 微摩尔,加入到RNA提取液中能明显改善RNA提取效果。
2.与蛋白质的RNase inhibitor相比,其保存不需要DTT。
3. 性价比高于RNase inhibitor。
储存条件:低温运输,-20℃运输及保存,有效期一年。
使用方法:
将RVC 原液(200mM)在65℃融化,然后按1/10-1/20的比例直接加入各种缓冲液中即可使用(RVC的工作浓度在10-20mM之间)。可以加入的缓冲液包括各种RNA提取液、FISH和Microdissection缓冲液等。
注意事项:
1. RVC不稳定,不能预先加入缓冲液中,必须即配即用。
2.溶液中最好不要有EDTA,否则RVC复合物容易分解。
3. RVC会抑制体外转译系统。
4.在浓度高达2mM时,可以抑制AMV催化的逆转录反应。
5. RVC不抑制DNase,故可以与DNase一起使用去除RNA样品中的DNA污染。
6.反应后如果需要去除RVC,可加入10倍浓度的EDTA,然后用乙醇沉淀RNA。
·农杆菌GV3101化学感受态细胞
编号:BTN140384
英文名称:E.coli GV3101 Chemical Competent Cell
规格:10×100μL
本产品为GV3101农杆菌化学感受态细胞,其具有利福平和庆大霉素抗性,适用于拟南芥、烟草、玉米、土豆等植物的转基因操作,经pCAMBIA2301质粒检测转化效率高达104cfu/μg。
基因型:C58(rifR)Ti pMP90(pTiC58DT-DNA)(gentR/strepR)Nopaline。
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期一年。
自备试剂:质粒DNA、液氮等
使用方法:
转化前准备
1. 冰水浴和37℃水浴。
2.液氮或干冰/乙醇混合物。
3. 将抗性平板在 28℃培养箱中平衡至少15分钟。
转化方法
1. 取-80℃保存的农杆菌感受态细胞于冰水浴中融化。
2. 无菌条件下,向刚刚融化的感受态细胞悬液中加入需要转化的质粒,每100μL感受态细胞加1μg质粒DNA,轻柔混匀。冰水浴中静置10分钟。
3. 将离心管置于液氮中速冻 5分钟(注:也可以用干冰和无水乙醇混合物替代液氮)。
4. 迅速将离心管置于37℃水浴静置中5分钟,不要晃动水面。然后快速转至冰水浴中静置5分钟。
5. 加入800μl 无抗生素的2×YT或LB液体培养基,28-30℃振荡培养2~3小时。使菌体复苏,表达抗性。
6. 5000rpm离心1分钟收菌,保留100μl左右上清,轻轻吹打重悬菌体,均匀涂布到含有相应抗生素的LB 固体培养基平板上,待平板中的液体完全吸收后,倒置平板,28-30℃培养48-72小时。
注:当平板只含有50μg/mL kan时,28℃培养48小时即可;平板中同时加入50μg/mL kan,20μg/mL rif时,需 28℃培养 60h;如果使用的平板含有50μg/mL rif 则需要 28℃培养 72-90小时。
注意事项:
1. 加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10 ;质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,转化效率急剧下降;质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。
2. 混入质粒时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
4. 利福平浓度不应高于25μg/μL,过高的利福平浓度不利于农杆菌生长,会降低其生长速度和转化效率。本公司感受态计算转化效率时所用平板只含有 50μg/mL kan,若所用平板含有 20μg/mL rif 则转化效率降低到1/2。
5.培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌;根据所用菌株抗性加入链霉素或庆大霉素可防止 Ti质粒丢失,但链霉素不利于农杆菌的转基因操作,所以一般培养农杆菌时不考虑链霉素或庆大霉素,Ti质粒丢失的概率极低(可以忽略)。
6.相关抗生素配方:
| 抗生素 | 配方 | 原液 | 工作液 |
| 羧苄青霉素(carb) | 双蒸水溶解 | 50mg/mL | 50μg/mL |
| 硫*(代"酸")卡那霉素(kan) | 双蒸水溶解 | 50mg/mL | 50μg/mL |
| 链霉素(strep) | 双蒸水溶解 | 10mg/mL | 50μg/mL |
| 利福平(rif) | DMSO溶解 | 10mg/mL | 20μg/mL |
| 庆大霉素(gent) | 双蒸水溶解 | 20mg/mL | 40μg/mL |
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文献和实验DNA聚合酶Ⅰ 或其大片段(Klenow) ①缺口平移制作标记DNA探针 ②合成cDNA的第二链 ③填补双链DNA3’凹端 ④DNA序列分析 耐热DNA聚合酶(Taq DNA聚合酶等) 聚合酶链反应(PCR) DNA连接酶 连接两个DNA分子
录酶(反转录酶) 逆转录酶 是一种依赖RNA的DNA聚合酶。 此酶首先是1970年从鼠白血病毒和劳氏肉瘤病毒中发现的。这两个课题组的论文都发在了同一期的《Nature》杂志上。 最普遍使用的是从鸟类骨髓母细胞瘤病毒(AMV)分离出来的。 活性:一种可以有效地将mRNA反转录成DNA的酶,其产物称为cDNA(complementary DNA). 主要用途是 将mRNA转录成cDNA以制备基因片段。 四、修饰性工具酶
相关专题 重组DNA技术工具酶 基因工程让一切皆有可能 基因工程 操作中涉及一系列相互关联的酶促反应。已经知道有许多重要的核酸酶,如限制性内切核酸酶、外切核酸酶、DNA连接酶、DNA聚合酶、反转录酶、DNA及RNA的修饰酶等,在基因工程的操作中有着广泛的用途。 1.限制性内切核酸酶 限制性内切核酸酶(restrictionendonuclease)是一类能识别双链DNA中特殊核苷酸序列,并在合适的条件下使每一
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