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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
337
- 英文名:
NTP Solution,10mM
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输、-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应NTP溶液(10mM)优惠促销,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:NTP溶液(10mM)优惠促销
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
编号:BTN70906
英文名:NTP Solution,10mM
本产品是ATP、UTP、GTP、CTP四种核苷酸的混合液,每种核苷酸的浓度为10mM,纯度在98%以上(HPLC检测),不含DNA内切酶、DNA外切酶、RNA酶和磷酸酶的污染,可以直接用于体外RNA转录合成。使用浓度请参考相关手册。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期两年。
NTP的分子结构

关于NTP溶液(10mM)优惠促销的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·CN/DAB底物套装
编号:BTN131113
规格:1套
结合DAB的高灵敏性和CN的易于拍照成像的特性。4-CN和DAB经常因为其各自独特的性能被混合在一起使用。本试剂盒具有极好的灵敏性,产生的深黑色沉淀易于拍照成像。CN/DAB底物在免疫印迹和斑点印迹应用中表现优秀。
储存条件:低温运输,-20℃避光保存,有效期一年。
·超快非醇核酸沉淀剂
编号:BTN60402
英文名称:Magic Solution DNArc
规格:30次
本产品是我司独创的一管式非醇DNA/RNA沉淀剂,其主要特点超快速度,是只需要离心2分钟即可快速沉淀回收溶液中的单双链DNA或RNA(包括探针),可广泛用于DNA/RNA的去盐,去蛋白,反应纯化,浓缩等。
产品特点:
1. 明显提高DNA或RNA沉淀的得率和DNA或RNA提取的产率。
2. 本产品无核酸污染也无DNA酶和RNA酶活性。
3. 痕量DNA和RNA(20pg)回收率达95~98%。
4. 不影响酶切、连接、转录、PCR、转化、转染等实验。
5. 不影响电泳和DNA-蛋白相互作用。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。溶液A呈红色,如果颜色发生变化,则表示pH已经改变,请弃之不用。溶液B为无色液体,会在瓶底产生少量晶体状产生沉淀,用前无需溶化,直接取上清液使用)。
使用方法:
1.将1/10体积的溶液A加入到DNA溶液中(包括PCR,酶切反应液等),振荡混匀。如果回收20 Kb以上的DNA片段,混匀时需要温和;对20Kb以下的DNA片段,可以剧烈震荡。
2.室温静置至少2分钟。此步十分关键,不能省略而直接离心。
3.13000 g室温离心5分钟后,小心吸弃上清。
4.加入0.8mL溶液B,充分震荡混匀。
5.13000 g室温离心2分钟,小心吸弃上清。
6.再用0.2mL溶液B重复第4-5步一次。
7.小心吸弃上清后即得纯化的DNA沉淀,加入少量TE或水,充分吹打溶解。如果最后还会有少量白色不溶沉淀,属于正常现象。
疑难解答:
Q:电泳为何不能检测到回收的DNA?
A:最可能原因是各步加入溶液后没有充分震荡混匀,其次是沉淀在各步吸弃上清时候不小心吸走而丢失,三是溶液A的pH发生改变,四是DNA溶液的盐离子浓度或pH值太高。
Q:电泳时为何有残留荧光物在加样孔中?
A:可能是琼脂糖凝胶中的杂质吸附的DNA,吸取 DNA样品时最好先短暂离心,只取上清液。这些不溶杂质一般不影响后续反应。使用高纯度的琼脂糖可以减少杂杂质的污染。百奥莱博一般使用 OXOID的琼脂糖,得到的DNA可以用于常见的分子生物学后续反应。
Q:本产品与贵公司的Magic Gel DNArc是否相同。
A: Magic Gel DNArc 有离心管和特殊的融胶液,专门用于从胶中回收DNA;本产品用于从反应液中纯化回收DNA,不需要另外提供离心管和融胶液。Magic Gel DNArc的溶液B和溶液C 分别与本产品的溶液A和溶液B类似但浓度不完全相同,建议不要互用。
NTP溶液(10mM)优惠促销关键词:NTP溶液(10mM),BTN70906,NTP Solution,10mM
·dGTP溶液(2.5mM)
编号:BTN130914
英文名称:dGTP Solution(2.5mM)
规格:2mL
dGTP分子式为C10H13N5O13P3Na3,分子量是507.2,消光系数为13.7×103 M-1×cm-1(pH7.0)。λmax为253nm。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
·PCR抑制物清除剂
编号:BTN60804
英文名称:Scavengers of PCR inhibitor
规格:1mL
用血液、土壤、植物、中药材等样品中提取的DNA 经常含有会抑制PCR的产物。本产品专门用于解除这些PCR 抑制剂的抑制作用,使DNA 能够用于PCR扩增。
产品特点:
1. 使用简单,直接加入PCR反应体系中使用。
2.适用范围广,可以用于解除血液、土壤、植物、中药材等DNA样品中的PCR 抑制剂。
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:将本产品按1:10的比例加入到PCR反应体系中即可进行PCR,如果PCR反应体系为50μL,则需要加本产品5μL。
·His标记蛋白质微量纯化套装
编号:BTN100102A
英文名称:One-Stop His-Tagged Protein Miniprep Pack(A)
规格:2mL
本产品基于His-Ni亲和层析的蛋白质纯化方法是目前分离纯化重组表达蛋白质的重要方法,本产品就是专门用于上述实验的一站式产品。
产品特点:
1.一站式套装,含所需的介质、溶液和层析柱,用户只需要提供表达His蛋白的细菌(酵母、杆状病毒、培养细胞)即可,非常方便。
2. 专一性强,一次过柱即可获得纯度高达95%的His-标记蛋白。
3.变性和非变性条件均可使用,也适用于纯化包涵体中的His标记蛋白。
4. 每次可以处理20mL的表达菌液,适合初步筛选和鉴定。
5. 提供4mL浓度为50%的Ni-Agarose介质,其最大载量为20-30mg His标记蛋白质/mL介质。
6. 介质为CL-6B琼脂糖,含四个Ni离子螯合基团,比只有四个Ni离子螯合基团的Ni-IDA更有效。
7. 本介质可以反复使用多次。
试剂盒组成:
| 成份 | 规格 |
| Ni-Agarose介质,50% | 4mL |
| 1M咪唑溶液 | 25mL |
| 1M Tris-HCl pH7.9 | 25mL |
| 5M NaCl溶液 | 25mL |
| 溶菌酶(20 KU/mg) | 30mg(A型无) |
| Benzonase(2U/μL) | 20μL(A型无) |
| 盐*(代"酸")胍 | 6g |
| 尿素 | 20g |
| PMSF(10mg/mL) | 0.5mL |
| 亲和层析柱,6mL | 1套 |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,但介质需4℃保存,溶菌酶、Benzonase和PMSF需-20℃保存,有效期一年。
自备试剂:去离子水、20%乙醇、0.45μm滤膜
使用方法:
1.将Ni-Agarose介质充分混匀后,取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中(介质用量需要根据His蛋白产量决定,其最大载量为20-30mg His标记蛋白质/mL介质,请根据实验需要取适量的Ni-Agarose介质加入层析柱)。
2.用5倍柱体积(指填料的体积,下同)自备去离子水洗柱,共三次。
3.用5倍柱体积的新配结合液洗柱(配方如下,以10mL为例),共三次:
| 成分 | 用量 | 在结合缓冲液中浓度 |
| 1M Tri-HCl(pH7.9) | 0.2mL | 20mM |
| 1M咪唑溶液 | 0.1mL | 10mM |
| 5M NaCl溶液 | 1mL | 500mM |
| 自备去离子水 | 8.7mL | - |
4.室温5000g离心10分钟收集20mL表达菌液,弃上清,沉淀(约100mg)放冰上待用或放-80℃保存。最好用不加诱导物的菌液做对照样。
5.如果用本产品A型:加入1mL冰浴的结合液(1mL菌液需要用50μL结合液),再加入25μL PMSF(10mg/mL)溶液,冰上超声裂解菌体直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。超声参数需根据仪器型号自行摸索,但裂解物必须不粘稠,否则会堵塞层析柱。如果用本产品B型:加入1mL冰浴的含溶菌酶的结合液(先取20mL结合液,加入所有30mg溶菌酶干粉,溶解后分装成1mL/管,剩余的-20℃放置),再加入25μL PMSF(10mg/mL)溶液和1μL Benzonase,冰上放置30分钟。
6.4℃下13000-15000g离心10分钟,去除残留细胞和细胞碎片以防堵柱,收集上清,留样做SDS-PAGE电泳对照。如果要纯化裂解液中可溶部分的His标记蛋白,则直接进入第7步;如果要纯化裂解液中包涵体(沉淀部分)中的His标记蛋白,则直接进入第12步。
A、纯化细胞裂解液中可溶部分的His标记蛋白
7.将上步得到的上清液上柱,让重力使裂解液自然流出。如要提高His标记蛋白与介质的结合效率,可用试剂盒提供的红盖将层析柱下的漏液口堵上,让细菌裂解液和介质在4℃结合30分钟或过夜。
8.用10倍柱体积结合液洗柱(配方见上表),收集并保存穿透液(含杂质或没被吸附的His标记蛋白,可做SDS-PAGE电泳的对照)。
9.如果用一步式洗脱法(适合已经找到最佳咪唑浓度的情况),则直接用适量的新鲜配制的洗脱液洗柱,收集并保存穿透液(含His标记蛋白)。洗脱液的配方如下(以1mL体积和最佳咪唑浓度是500mM为例):
| 成分 | 用量 | 在洗脱液中的浓度 |
| 1M Tri-HCl(pH7.9) | 20μL | 20mM |
| 1M咪唑溶液 | 500μL | 500mM |
| 5M NaCl溶液 | 100μL | 500mM |
| 自备去离子水 | 380μL | - |
10.如果用多步式洗脱(适合不知道最佳咪唑浓度或一步式洗脱杂质多的情况),则按上表配制一系列咪唑浓度不同(如40、60、100、200、300和500mM),其他成分浓度不变的洗液,按从低到高的顺序洗涤并收集样品,SDS-PAGE电泳检测His标记蛋白所在的区域。
11.洗脱后,依次使用10倍柱体积的去离子水洗涤柱子,再用3倍柱体积的20%乙醇平衡(乙醇要将填料浸没),最后堵住层析柱下端的漏口,4℃保存待下次使用。
B、纯化包涵体中His标记蛋白
12.将第6步离心得到的包涵体沉淀重悬于1-3mL含盐*(代"酸")胍结合液中或1-3mL含尿素结合液中(建议优先使用尿素做变性剂,因为得到的洗脱液可以直接跑SDS-PAGE,而用盐*(代"酸")胍的洗脱液需先除盐后才能电泳)。冰浴1小时以使包涵体溶解,期间可轻柔摇晃几次。含变性剂的结合液配方如下(以10mL为例):
| 成分 | 含盐*(代"酸")胍结合液 | 含尿素结合液 |
| 1M Tri-HCl(pH7.9) | 200μL | 200μL |
| 5M NaCl溶液 | 1mL | 1mL |
| 盐*(代"酸")胍(MW=95.6) | 5.7g | 无 |
| 尿素(MW=60.1) | 无 | 4.8g |
| 自备去离子水 | 加水到10mL | 加水到10mL |
13.室温10000×g离心20分钟,沉淀为未溶解的包涵体。将上清(含溶解后的His标记蛋白)以自备的0.45μm滤膜过滤。
14.将滤过液上柱,后续纯化步骤同第7-第11步。只是所用结合液和洗脱液均含变性剂,含变性剂的洗脱液配方见下表(以1mL为例):
| 成分 | 含盐*(代"酸")胍洗脱液 | 含尿素洗脱液 |
| 1M Tri-HCl(pH7.9) | 20μL | 20μL |
| 1M咪唑溶液 | 500μL | 500μL |
| 5M NaCl溶液 | 100μL | 100μL |
| 盐*(代"酸")胍(MW=95.6) | 0.57g | 无 |
| 尿素(MW=60.1) | 无 | 0.48g |
| 自备去离子水 | 补水到1mL | 补水到1mL |
注意事项:整个实验需避免含巯基乙醇、DTT和EDTA等成分。若洗脱液不能将His标记蛋白洗脱下来,可改用pH6.5- 4.5的pH递减的Tris-HCl洗脱。
NTP溶液(10mM)优惠促销关键词:NTP溶液(10mM),BTN70906,NTP Solution,10mM
·核酸液相杂交液
编号:BTN131165
英文名称:Nucleic Acid Hybridization Solution
规格:10mL
本产品为4×核酸液相杂交液,可专门用于核酸液相杂交实验,如差减杂交(SSH)等实验。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·大肠杆菌JM109感受态细胞
编号:BTN90207
英文名称:E.coli JM109 Chemical Competent Cell
规格:0.1mL*10
本产品是采用大肠杆菌JM109菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。
产品特点:
1. 使用pUC19质粒检测,转化效率可达108,-80℃保存几个月转化效率不发生改变。
2. recA1和endA1突变阻止对克隆DNA的修饰或对宿主菌染色DNA的重组,提高纯化质粒的产量和质量。
3. JM109菌株基因型:endA1 recA1 gyrA96 thi hsdR17(rk-mk+)relA1 supE44 D(lac-proAB)[F’traD36 proAB laqlqZ Δ M15 ]
4. 本产品质量稳定,使用方便,质优价廉。
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:无菌超纯水,SOB和SOC液体培养基,相关抗菌素。
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl,可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3. 42℃热击90秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
注意事项:
1、涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm ,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2、新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
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文献和实验, 2.2M dNTP’s 100mM EDTA 0.5M EtBr 10mg/ml Gelatin 2% Glucose 1; 1.5; 2M Guanidine HCl 1-8M HEPES 1M Imidazol 2M Paraformaldehyde 37% PEG 40% PMSF 100mM Retinoic acid 10mM Sucrose 1; 2; 2.5M Tris Cl 1M
EDTA 0.5M EtBr 10mg/ml Gelatin 2% Glucose 1; 1.5; 2M Guanidine HCl 1-8M HEPES 1M Imidazol 2M Paraformaldehyde 37% PEG 40% PMSF 100mM Retinoic acid 10mM
的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的值大约降低0.03个单位。 4.2.9 、 配制1L 10 ×TEBuffer(pH7.4,7.6,8.0) 100mM Tris-HCl,10mM EDTA (1)量取溶液1M Tris-HClBuffer(pH7.4,,7.6,8.0)100ml,500mM EDTA(pH 8.0) 20ml,置于1烧杯中。 (2)向烧杯中加入800ml的去离子
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