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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
234
- 英文名:
Instant Realtime RT-PCR Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
2~8℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")即用型荧光定量RT-PCR试剂盒优惠,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:即用型荧光定量RT-PCR试剂盒优惠
规格:50次
产地:国产|进口
编号:BTN101219
品牌:百奥莱博
英文名:Instant Realtime RT-PCR Kit
本产品是基于荧光染料检测的即用型双酶一管式RT-PCR试剂盒,可以对靶片段进行实时定量RT-PCR分析(quantitative RT-PCR、qRT-PCR)。产品含有经过优化的缓冲液组分、MMLV-Taq DNA聚合酶混合物、dNTPs、MgCl2及新型荧光染料DNAgreen等所有一管式实时定量RT-PCR所需要的成分,用户只需加入RNA模板和引物即可进行实时定量RT-PCR反应,具有广泛的用途。
产品特点:
1.一管式完成qRT-PCR反应,避免样品交叉污染,尤其适合临床应用。
2. 即开即用,用户不需要单独准备qRT-PCR所需的各种试剂。
3. 主要成分只有两个(RT-PCR buffer和MMLV-Taq Mix),将加样步骤减少到最低,极大降低了加样误差,增加了可重复性。
4. 使用范围广,适用于从病毒RNA到人RNA的各种RNA模板。
5.高灵敏度,每个RT-PCR体系最低可以检测200拷贝的RNA分子,可扩增的模版RNA的最长达2000nt。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 双酶一管式qRT-PCR Buffer,2× | 750μl |
| MMLV-Taq Mix | 100μl |
| RNase-free水 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。
使用方法:
1.在一干净的无RNase的PCR管中,先加入下列成分(下面只列出样品管的设置情况,用户可自己根据需要设置阳性和阴性对照):
| 成分 | 样品 |
| 自备RNA模板(分下面三种情况) | 见下 |
| 总RNA | 100-500ng |
| 或poly(A)mRNA | 10-500ng |
| 或体外转录得到的专一RNA | 0.01pg-500ng |
| RNA特异性引物一(自备) | 终浓度300nM(注1) |
| RNA特异性引物二(自备) | 终浓度300nM |
| RNase-free水 | 补到10μL |
| 双酶一管式qRT-PCR Buffer(2×) | 15μl |
| 自备ROX(某些荧光PCR机型需要) | 3μL(注2) |
| MMLV-Taq Mix | 2μl |
注1:通常初次使用本试剂时,可用引物浓度300nM进行实验,根据实验结果具体情况,在200~800nM范围内调整引物浓度。引物、待检样品的具体加量用户可以根据实际情况调整,同时增减RNase-free水用量,保证总反应体积不变即可。
注2:如果使用ABI公司的7500,7700和7900三种型号的荧光PCR仪器,则需用自备的ROX进行Ct值校正。对ABI 7700和7900,ROX的最佳浓度为1×(即在每30μl反应体系中加3μl 10×ROX)。对ABI 7500,ROX的最佳浓度为0.05-0.1×(每30μL反应体系加0.3μL 10×ROX;也可将10×ROX稀释到1×,然后每个反应体系加入3μL 1×ROX)。ROX会在溶解曲线中产生噪音,因此,如果出现了杂峰,将软件中“Passive Reference Dye”中的“ROX”选项取消打勾,然后重新分析数据。对于iCycler IQ,MJ Opticon,MJ Chromo4,MX3000,MX4000,RotorGene3000,RotorGene 6000和LightCycler 480等型号的荧光PCR仪器,ROX不是必须的,但加入的话也不会影响整个PCR分析。
2. 轻柔混合均匀后放入PCR仪中进行荧光定量RT-PCR。
3. 设定RT-PCR反应条件时,一般将RT的条件设定成42℃ 30分钟,后接94℃变性5分钟,然后进入PCR循环(PCR参数将根据自备引物的Tm值和PCR产物长度由用户自行决定注)、最后72℃ 5分钟。并在退火或延长步骤中记录荧光信号。本产品中所含的荧光染料在没结合DNA时,最大吸收光谱在471nm,结合DNA时的最大吸收光谱在500nm,最大发射光谱在530nm。
即用型荧光定量RT-PCR试剂盒优惠极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
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·*酚蓝溶液(电泳级)
编号:BTN100882
英文名称:Bromophenol Blue Solution
规格:10mL
*酚蓝分子式为C19H10Br4O5S,分子量为669.97,CAS号为115-39-9。易溶于*氧化*溶液,溶于甲醇、乙醇和*酚,是一种pH指示剂,在pH3.0(黄)~4.6(蓝紫)范围,颜色由黄变蓝。本产是*酚蓝的1%水溶液,用作制备常用做电泳指示染料,其泳动率在0.5-1.4%琼脂糖中,相当于300bp dsDNA,在8% PAGE变性胶中相当于20bp dsDNA。如果含*酚蓝的上样液跟样品混合后变黄,则表示样品中酸性物质没去除干净,必须用1M Tris pH8.8调到*酚蓝呈蓝色,否则蛋白将向相反方向移动。
储存条件:常温运输及避光干燥保存,有效期一年。
·柱式病毒RNA提取试剂盒
编号:BTN71001
英文名称:Virus RNA column extraction kit
规格:50次
本试剂盒是在一管式病毒RNA提取试剂盒的基础上开发的、专门用于从血清(血浆)等液体样品中提取微量病毒RNA的产品。
试剂盒特点:
1. 操作简单,整个过程只需要20分钟左右,不需要额外在洗柱液中补加乙醇。
2. 灵敏度高,通过RT-PCR检测到的最终灵敏度可以达到50拷贝/mL。
3. 安全无毒,不需要使用*酚和*仿等有机溶液。
4. 如果加上病毒离心富集步骤,最多可以处理1.5mL液体病毒样品。
5.与RT-PCR和荧光RT-PCR兼容。
6. 价廉物美,性价比远低于国外同类产品。
7.适用于各种材料,包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等无细胞材料。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 柱式病毒RNA提取溶液A | 30ml |
| 离心吸附柱(小提) | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| RNA洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.在1.5mL离心管中加入0.1-0.2mL液体病毒样品。如果病毒需要富集,可以将1.5mL液体在4℃下24000 g冷冻离心60分钟,移弃1.3mL后继续操作。
2. 加入0.6mL溶液A,振荡30秒混匀后室温放置10分钟。注意:溶液A在 4℃放置后可能会产生沉淀,使用前必须放在 65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 将溶液全部转移到离心吸附柱中,室温放置2分钟。
4. 12000~15000g室温离心1分钟,弃收集管中穿透液。
5. 加入0.8mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心1分钟,弃收集管中穿透液。
6. 12000~15000g室温离心半分钟。
7.在离心吸附柱的滤膜的中部加入30-100μl通用洗脱液,然后将离心吸附柱套入一新的1.5mL离心管中,室温放置2分钟。
8. 12000~15000g室温离心1分钟,离心管中收集的样品即为RNA。
9. RNA样品可以直接用于RT-PCR或逆转录反应,也可放-80℃长期保存。
即用型荧光定量RT-PCR试剂盒优惠关键词:BTN101219,即用型荧光定量RT-PCR试剂盒,Instant Realtime RT-PCR Kit
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文献和实验actin,山东大学提供样品基因。cDNA制备:测定小鼠肝脏总RNA浓度后,使用BioTeke Super RT Kit 制备20μl cDNA.操作步骤参照试剂盒说明书。一步法荧光定量PCR:Bioteke One-step SYBR real-time RT-PCR Kit20μl反应体系包括:10μl 2×One-step SYBR premixture,7.2μl RNA Free Water,0.4μl Primer F,0.4μl Primer R,1μl cDNA,1μl One-step
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