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- Thermo
- 16314015
- 2026年06月08日
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- 英文名：
末端脱氧核苷酸转移酶 (TdT) 缓冲液
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见产品外包装
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- 供应商：
嵘崴达
- 规格：
2 x 0.8 mL
末端脱氧核苷酸转移酶 (TdT) 缓冲液
货号 16314015
产品描述
末端脱氧核苷酸转移酶，重组 (rTdT) 是一种 DNA 聚合酶，可催化向 DNA 的3fi 羟基末端添加脱氧核苷酸的反应。提供 TdT 技术公告。
应用：对载体和插入片段进行同聚物加尾，以用于克隆。用生物素 (1,2) 标记寡核苷酸、32P 标记或 35S 标记 (3)，或在细胞凋亡 (TUNEL) (4,5) 中。
来源：从小牛胸腺 TdT 的杆状病毒克隆纯化。
性能和质量检测：核酸内切酶、3´ 和 5´ 脱氧核糖核酸外切酶和已测定的掺入水平。
单位定义：一个单位掺入 1 nmoL dATP 进入酸性可沉淀材料（1 h 内、在 37°C 下、使用 d(pA)50 作为引物。
危险警告：有毒；反应缓冲液中有二jia胂酸钾。还含有剧毒化学物质：氯hua钴。
参见 MSDS。
单位反应条件：0.2 M 二甲shen酸钾 (pH 7.2)、10 mM MgO4 C4 H6、1 mM 2-巯ji乙醇、0.5 mg/ml BSA、
100 flM d(pA)50、1 mM [3H]dATP 和酶（0.15 mL、1 h、在 37°C 下）。
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文献和实验（一）原理 凋亡细胞是由于内源性核酸内切酶的激活后，将DNA 切割成许多双链DNA 片段以及高分子量DNA 单链断裂点（缺口），暴露出大量3- 羟基末端，如用末端脱氧核苷酸转移酶（TdT ）将标记的dUTP 进行缺口末端标记，则可原位特异地显示出凋亡细胞。主要应用的是荧光标记法和酶标记法。 （二）荧光标记法 1 ．材料与试剂 采用德国Boehringer-Mannheim 公司In Situ Cell
原位末端转移酶标记技术 （ISEL）检测细胞凋亡 根据细胞凋亡时核酸内切酶被激活，将细胞核染色体DNA从核小体连接处切断，产生单股或双股DNA链。根据这一生化特性，将外源性核苷酸和酶（末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）和DNA聚合酶I或Klenow大片段）渗入到凋亡细胞中，催化标记的外源性核苷酸与断裂的 DNA链相结合，并通过一定的显示系统显色。 由于凋亡细胞内的内源性核酸酶被激活后，将自身染色体或DNA切割，产生与DNA断裂数目相同
利用RACE [Rapid Amplification of cDNA ENDs，cDNA末端的快速扩增]，可以很简单地得到mRNA的5＇末端序列，然而5＇RACE是一个很复杂的技术，它的成功依赖每一步反应的有效完成。cDNA第一链的合成是由一个反义的基因特异性引物（Gene－specific primer，GSP）来起始的，cDNA第一链纯化后，利用末端脱氧核苷酸转移酶（Terminal deoxynucleotidyl transferase，TdT）在cDNA的5＇末端加上一个合成
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