- ￥2129
- Thermo
- EK0032
- 2025年07月15日
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- 详细信息
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- 技术资料
- 英文名：
T4 多聚核苷酸激酶 (10 U/μL)
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- 供应商：
嵘崴达
- 规格：
2500 U
T4 多聚核苷酸激酶 (10 U/μL)
产品描述
产品优势
• 在 Thermo Scientific 限制性内切酶、RT 和 T4 DNA 连接酶缓冲液中均有活性
应用
• 标记核酸的 5'-末端，用作以下物质：
--用于杂交的探针
--用于转录本映射的探针
--用于凝胶电泳的标志物
--用于 DNA 测序的引物
--用于 PCR 的引物
• 连接前寡核苷酸、PCR 产物、其他 DNA 或 RNA 的 5'-磷酸化
• PCR 引物的磷酸化
• 通过 [32P]-标记后试验进行的 DNA 修饰检测
• 去除 3'-磷酸基
注
• 可通过正向反应或交换反应标记核酸的 5'-末端。
• 聚乙二醇 (PEG) 和亚精胺改善磷酸化反应的速率和效率。PEG 用于交换反应混合物。
•由于 T4 多聚核苷酸激酶受到铵离子抑制，在磷酸化之前请使用醋酸钠来沉淀 DNA。
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致力于向国内生命科学研究人员提供合格产品和完善服务。
主要经营的试剂品牌：
Roche试剂，部分常用现货，周三定货，2-3周到货。
GE试剂，耗材，部分常用现货，周二，周五定货，3周左右。
SIGMA试剂，周一，五定货，3周左右到货。
R&D试剂，周一定货，3-4周到货。
THERMO试剂，部分现货，周三定货，2-3周到货。
ABCAM试剂，国内现货三天左右，期货四周左右。
Peprotech试剂，部分常用现货，周三定货，2-3周到货。
罗氏原料，请来电来邮咨询。
OXOID，BD培养基础货期八周左右，部分现货。
MCE激动剂，ACROS、ALFA、阿拉丁等生化试剂现货定购。
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文献和实验Blunt PCR克隆乃利用传统T4连接酶方法，但载体和Topo平端的一样，含ccdB基因，所以同样可降低菌落背景，易于筛选。 表10 PCR克隆试剂盒的选择 Amplification Enzyme Application of Cloned PCR Product Ligation Method Product
用 T4 标记的 5’ 末端 1． 无菌的 1.5ml 为了离心管置冰浴上顺序混合下列组分： 50 pmol 合成的寡核苷酸 2.5 μ l 10 ×反应缓冲液 10 μ l γ -[32 P]ATP （ 33pmol ） 1.5 μ l T4 多核苷酸激酶（ 15U ） 灭菌双蒸水加至 25 μ l 2． 37 ℃温育 30min 。 3． 当反应物正温育时，以 2000 × g 离心 2min 制备
【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
液： 1X T4 DNA Ligase Buffer: [50 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 10 mM DTT, 1 mM ATP, 25 µg/ml BSA, (pH 7.5 @ 25°C)]。推荐DNA浓度(0.1 - 1 µM 的5′末端)。 使用注意：ATP是反应必须的辅因子。这一点与要求NAD作辅因子的大肠杆菌DNA连接酶不同。 如在反应体系中补加1 mM的ATP，连接反应还可以在NEB提供的四种限制性内切酶缓冲液(NEBuffers)或在T4 DNA多聚核苷酸激酶
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