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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
750
- 英文名:
Top10 Competent cell
- 保质期:
6个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-80℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括北京现货Top10化学感受态细胞(国产,进口)在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应北京现货Top10化学感受态细胞(国产,进口),产品信息:
类别:克隆与表达
英文名:Top10 Competent cell
| 产品名 | 产品编号 | 包装规格 |
| Top10化学感受态细胞 | RFT167 | 20×100μl |
英文名:Top10 Competent cell
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
本公司生产的Top10感受态细胞采用经特殊工艺处理得到,可用于DNA的化学转化。使用pUC18质粒检测,转化效率可达108cfu/μg,-70℃保存几个月转化效率不发生改变。
基因型:F- mcrA △(mrr-hsdRMS-mcrBC) j80 lacZ△M15△?lacⅩ74 recA1 deoR araD139△(ara-leu) 7697 galU galK rpsL (StrR) endA1 nupG
特点:一种用于铺制与培养质粒平板和粘粒平板的重组缺陷的抑制型菌株。其j80 lacZ△M15基因的产物可与pUC载体编码的 b-半乳糖苷酶*基端实现a互补,可用于蓝白斑筛选。
操作方法:(以下操作均按无菌条件的标准进行)
1、取感受态细胞置于冰浴中,如需分装可将刚融化细胞悬液分装到无菌预冷的离心管中,置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl,可以根据实际情况分装使用。应注意所用DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。以下实验以100μl感受态细胞为例。
2、向感受态细胞悬液中加入目的DNA(50μl的感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),轻轻旋转离心管以混匀内容物,在冰浴中静置30分钟。
3、将离心管置于42℃水浴中放置45秒,然后快速将管转移到冰浴中,使细胞冷却2-3分钟,该过程不要摇动离心管。
4、向每个离心管中加入500μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素), 混匀后置于37℃摇床振荡培养45分钟(150转/分钟),目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达,使菌体复苏。
5、将离心管内容物混匀,吸取100μl已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB或LB固体琼脂培养基上,用无菌的弯头玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。将平板置于室温直至液体被吸收,倒置平板,37℃培养12-16小时。
注意:涂布用量可根据具体实验来调整。如转化的DNA总量较多,可取更少量转化产物涂布平板;反之,如转化的DNA总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。如果预计的克隆较少,可通过离心(4,000 rpm, 2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。(涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少可以将剩下的菌液再涂布新的培养板)
注意事项:
1、感受态细胞应保存在-70℃,不可多次冻融和放置时间过长,以避免感受态细胞的转化效率。
2、进行转化操作时,应根据相应温度及无菌条件的要求进行。
3、为防止转化实验不成功,可以保留部分连接反应液,以重新转化,将损失降到最低。
储存条件:-70℃,有效期6个月。
北京现货Top10化学感受态细胞(国产,进口)专业优质供应商:北京百奥莱博科技有限公司
关键词:Top10化学感受态细胞,RFT167,Top10 Competent cell
Top10化学感受态细胞如何储存?
化学试剂的变质,大多数情况是因为受外界条件的影响,如空气中的氧气、二氧化碳、水蒸气、空气中的酸碱性物质以及环境 温度、光照等,都可使化学试剂发生氧化、还原、潮解、风化、析晶、稀释、锈蚀、分解、挥发、升华、聚合、发霉、变色以及燃爆等变化。经常检查储存中的化学 试剂的存放状况发现实际起过的储存期或变质应及时报告,并按规定妥善处理 ( 降级使用或报废) 和销帐。在正常储存条件下,一般化学试剂贮有不宜超过2年,基准试剂不超1年。为了避免环境和其他因素的干扰,所有化学试剂一经取出不得放回贮有容器: 属于必须回收的试剂或指定、退库、的试剂,必须另设专用容器回收或贮存,具有吸潮性或易氧化,易变质的化学试试剂必须密封保存,避免吸湿解,氧化或变质。 定期盘点,核对出现差错应及时检查原因,并报主管领导或部门处理。
北京现货Top10化学感受态细胞(国产,进口)正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:
| 编号 | 类别 | 名称 |
| RFT038 | DNA纯化 | 植物基因组DNA提取试剂盒 |
| RFT091 | 核酸扩增(PCR) | 2×GC Buffer |
| RFT009 | 核酸电泳和回收 | 50bp DNA ladder(50~400bp) |
| RFT107 | 核酸扩增(PCR) | RNase抑制剂 |
| RFT064 | 蛋白质研究 | 30%丙稀酰胺溶液(19:1) |
| RFT026 | 核酸电泳和回收 | λDNA/HindIII(125~23130bp) |
| RFT072 | 蛋白质研究 | 5×Tris-甘*酸-SDS电泳缓冲液 |
| RFT020 | 核酸电泳和回收 | DNA Marker III(300~5000bp) |
| RFT098 | 核酸扩增(PCR) | Long Taq DNA聚合酶 |
| RFT094 | 核酸扩增(PCR) | 2×SYBR qPCR MasterMix |
| RFT152 | 核酸电泳和回收 | EB染色液 |
| RFT005 | 核酸电泳和回收 | 200bp DNA ladder(200~3000bp) |
| RFT052 | 蛋白质研究 | 双色预染宽分子量蛋白质Marker(10~170kD) |
| RFT162 | 核酸扩增(PCR) | 10mM dNTP溶液 |
| RFT097 | 核酸扩增(PCR) | 5×加A反应液 |
| RFT173 | 抗生素类 | 即用型潮霉素B溶液 |
| RFT151 | 蛋白质研究 | 高分子量非变性电泳蛋白质Marker(66~669 kD) |
| RFT007 | 核酸电泳和回收 | 300bp DNA ladder(300~5000bp) |
| RFT013 | 核酸电泳和回收 | 2kb DNA ladder(100~2000bp) |
| RFT039 | 蛋白质研究 | 14.4KD蛋白Marker |
| RFT102 | 核酸扩增(PCR) | Taq DNA聚合酶 |
| RFT188 | 核酸电泳和回收 | 2×DNA上样液(变性凝胶电泳) |
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