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文献和实验Nature 子刊：超声波调控肿瘤内细菌的基因表达，助力肿瘤免疫治疗
了一种超声响应性工程菌。测试结果表明，携带 mCherry 基因的工程菌在 37℃ 孵育后未产生任何荧光信号，而在 45℃ 孵育后可以观察到强烈的红色荧光信号，表明热诱导可以解除 TcI 的抑制启动 mCherry 基因的表达。将热诱导时间从 5min 延长到 25min，可见基因表达的荧光信号强度逐渐增加。 接着研究团队对超声参数进行了优化，结果表明在 4.93 MPa 声压下，超声 3s 间隔 5s 的辐照参数可以将靶区温度维持在 45℃。经优化后超声参数进行辐照细菌后，可见细菌表达荧
表达效率往往更高。 将IL基因以5’端 Eco RI和3’端 Bam HI酶切位点插入pBV220载体多克隆位点中，转化到大肠杆菌JMl03内，便能通过温度的变换控制CI蛋白的活性，继而调节启动子的活性，使IL基因连同其5’端上游带SD序列转录成mRNA并转录终止于rrnB位点，SD序列与ATG的间距为6bp，mRNA作为模板使核糖体高效翻译出IL产物。 实验材料和试剂 （一）实验材料
温度诱导型原核表达载体pBV220工作原理及全序列 实验原理 PLPR启动子是大肠杆菌l噬菌体中控制早期转录的启动子，具有极强的起始RNA转录的功能，基因工程中常用它来构建高效表达载体，它受抑制物CI蛋白的负调控。在实际中CI蛋白被改造成温度敏感型(CIts)，由DNA片段CIts857（857bp长）编码。CIts在30℃时具有抑制启动子的活性，在42℃时失活而失去抑制启动子的活性，因此，改变工程菌的培养温度即可控制目的基因的表达，这一点比用诱导剂诱导表达的系统要节省操作步骤和成本
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