pCDNA3.1-VEGFA人源基因哺乳表达质粒

【求助】逆转录病毒、慢病毒载体与其他真核表达载体在稳定筛选时的区别？

roy_liu823 逆转录病毒和慢病毒载体经包装后可以得到携带外源基因的病毒，将病毒感染细胞后，外源基因可以整合到细胞基因组中，经过稳定的筛选后，就可以得到稳定表达外源基因的细胞。 而一些真核表达载体如pcDNA3.1经脂质体转染进细胞后，也可以整合到细胞基因组中，并经过G418的筛选后，也可以得到稳定表达外源基因的细胞。我就很困惑：这两者有什么区别？用逆转录病毒或慢病毒载体的优势在哪？如果我想得到能稳定表达某一基因的骨髓基质干细胞，是不是用pcDNA3

核酸疫苗载体及表达调控元件

系统应用最为常见，以CMV启动子构建的pcDNA3能在大多数哺乳动物细胞中高效表达所插入的外源基因，并且是高拷贝数质粒，为大量制备质粒DNA带来了方便。       (1)质粒骨架元件：表达质粒的复制起始位点是质粒自我复制的基础，它确定了在免疫细胞中质粒的拷贝数和质粒DNA的产生数。目前常用的复制起点是大肠杆菌质粒ColEI复制起点，该起点可确保质粒在大肠杆菌细胞中维持20个以上的拷贝数。       (2)启动子和增强子元件：启动子为重要的调控序列，是一段位于转录

【原创】表达载体的选择及构建方法

  表达载体的构建方法及步骤 一、载体的选择及如何阅读质粒图谱 目前，载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒 DNA 是一种新的非病毒转基因载体。 一个合格质粒的组成要素： （1）复制起始位点 Ori 即控制复制起始的位点。原核生物 DNA 分子中只有一个复制起始点。而 真核生物 DNA 分子有多个复制起始位点。 （2）抗生素抗性基因可以便于加以检测，如 Amp+ ,Kan+ （3）多克隆位点 MCS 克隆携带外源基因片段 （4） P/E 启动子/增强