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- 详细信息
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小鼠杂交瘤细胞；PK136说明书
- 细胞类型：
A类
- 肿瘤类型：
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- 供应商：
上海抚生
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42
- 生长状态：
贴壁生长
- 年限：
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- 运输方式：
低温冷藏
- 器官来源：
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- 是否是肿瘤细胞：
否
- 细胞形态：
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- 免疫类型：
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- 物种来源：
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- 相关疾病：
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- 组织来源：
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- 英文名：
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- 规格：
株
小鼠杂交瘤细胞；PK136说明书细胞常规说明：
培养条件：89%基础培养基+10%FBS+1%双抗
冻存液成分：10%DMSO+40%FBS+50%基础培养液
细胞质检情况：不含细菌、真菌、支原体等微生物污染
传代建议：1:2~1:3传代，2~3天换液1次
特别提醒：签收细胞后，如细胞状态不佳，或培养中遇到问题，烦请当天尽快联系，以便处理。当天及时反馈细胞情况和细胞照片是售后跟踪处理重要的参考依据，请务必重视。
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞；PK136说明书
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 杂交瘤细胞系PK136分泌一种小鼠单克隆抗体（IgG2a），此抗体与小鼠NK细胞起反应。 该细胞系由SP2/0-Ag14骨髓瘤和用CE小鼠脾细胞和骨髓细胞免疫的（C3H X BALB/C）F1小鼠的脾细胞融合而成。 此抗体对NK特异且在有补体时有细胞毒作用。 此抗体与不同小鼠株的细胞的反应方式，与常规的NK1.1抗血清的反应方式相符。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10% FBS
传代方法 1：
2。3天内可长满。
传代情况 PN5
冻存条件 完全培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
小鼠杂交瘤细胞；PK136说明书周期的概念:
细胞周期是可再生细胞从准备时期到分裂为两个细胞的一个循环阶段。
细胞周期分为细胞间期和细胞分裂期，细胞间期较长，而细胞分裂期较短。
FBS (fetal bovine serum, 胚牛血清), CS (calf serum, 小牛血清)和HS (horse serum, 马血清)，对细胞而言差异极大，请务必依据细胞株资料单指定之血清种类培养之。
将培养基置于 37 °C水槽中回温，回温后喷以70 % 酒精并擦拭之， 移入无菌操作台内。取出冷冻管， 立即放入37 °C 水槽中快速解冻， 水面高度不可接近或高过冷冻管之盖沿， 否则易发生污染。轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化后， 以70 % ethanol 擦拭冷冻管外部， 移入无菌操作台内。
小鼠杂交瘤细胞；PK136说明书注意事项：
1、实验进行前，无菌室及无菌操作台（laminarflow）以紫外灯照射30-60分钟灭菌，以70%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后，再进行下一个细胞株之操作。
2、无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置，其它实验用品用完即应移出，以利于气流之流通。实验用品以70%ethanol擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在抬面之中央无菌区域，勿在边缘之非无菌区域操作。
3、小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。
4、工作人员应注意自身之安全，须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作，并选择适当等级之无菌操作台（至少ClassⅡ）。操作过程中，应避免引起aerosol之产生，小心毒性药品，例如DMSO及TPA等，并避免尖锐针头之伤害等。
5、定期检测下列项目：5.1CO2钢瓶之CO2压力5.2CO2培养箱之CO2浓度、温度、及水盘是否有污染（水盘的水用无菌水，每周更换）。5.3.无菌操作台内之airflow压力，定期更换紫外线灯管及HEPA过滤膜，预滤网（300小时/预滤网，3000小时/HEPA）。6.水槽可添加消毒剂（Zephrin1:750），定期更换水槽的水
6、粉末培养基配制好后（加了血清），一般在4度尽量不要超过1个月，如在-20度存放时间可长一些，但最好也不要超过3-4个月，可能对于永生化细胞株来说要求不是太高，细胞娇弱，放置时间不宜过长。
7、开紫外线照射台的时候，就将培养基、酶、DHANKS液那到室外让它自然升温。这样40分钟后，温度也升上来了。有很多人将他放到37度水浴锅里加热。一定要注意水浴锅的卫生，有的常年不清洗，里面很脏，容易在外面瓶身上吸附大量细菌。因此用它的也一定要勤换水。从水浴锅拿出后，最好找个毛巾擦干上面的水。
小鼠杂交瘤细胞；PK136说明书操作流程与注意事项
1.如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室
2.拧松瓶盖，细胞瓶竖立培养8h（或过夜）
3.待细胞沉底后吸除上层液体（含碎片残渣，请小心操作），然后吸取沉底的细胞层（2ML左右转移到新的培养瓶，加入新鲜的完全培养基（如细胞状态较差可将血清浓度调高到15%）继续培养
ELISA Kit for Human C-X-C motif chemokine 9小鼠促生长激素释放激素(GHRH)ELISA试剂盒，英文名：GHRH ELISA Kit人碳酸酐酶(Carbonic anhydrase 12)ELISA试剂盒人96T31.2-2000 pg/mL小鼠胶原酶I(Collagenase I)ELISA试剂盒，英文名：Collagenase I ELISA Kit人肥大细胞类糜蛋白酶1(CMA1)ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠低氧诱导因子1α(HIF-1α)ELISA试剂盒，英文名：HIF-1α ELISA Kit人肌肽酶1(CNDP1)ELISA试剂盒人96T1.56-100 ng/mL小鼠β-防御素(β-DF)ELISA试剂盒，英文名：β-DF ELISA Kit人心磷脂合成酶(CRLS1)ELISA试剂盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠生长分化因子15(GDF-15)ELISA试剂盒，英文名：GDF-15 ELISA Kit人β-防御素126(β-DF126)ELISA试剂盒人96T0.625-40 ng/mL小鼠载脂蛋白A1(APOA1)ELISA试剂盒，英文名：APOA1 ELISA Kit人中性粒细胞弹性蛋白酶(NE/ELA2/HNE)ELISA试剂盒人96T78-5000 pg/mL小鼠突触素(SYP)ELISA试剂盒，英文名：SYP ELISA Kit
人钙粘蛋白5 (Cadherin-5) ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠白蛋白(albumin)ELISA试剂盒，英文名：albumin ELISA Kit人衰老关键蛋白5 ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)ELISA试剂盒，英文名：PCSK9 ELISA Kit人葡萄糖6磷酸脱氢酶(G6PD)ELISA试剂盒人96T0.78-50 mIU/mL小鼠基质金属蛋白酶12(MMP12)ELISA试剂盒，英文名：MMP12 ELISA Kit人透明质酸合成酶2(Hyaluronan synthase 2)ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠二氢硫辛酸脱氢酶(DLD)ELISA试剂盒，英文名：DLD ELISA Kit人胰岛素降解酶(IDE)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠白介素17F(IL17F)ELISA试剂盒，英文名：IL17F ELISA Kit人白介素11(IL-11)ELISA试剂盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠ATP结合盒转运蛋白G2(ABCG2)ELISA试剂盒，英文名：ABCG2 ELISA Kit人白细胞免疫球蛋白样受体亚家族B成员4(LILRB4)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠游离β绒毛膜促性腺激素(f-βCG)ELISA试剂盒，英文名：f-βCG ELISA Kit
BCL-2(humen) 人细胞凋亡相关基因BCL-2Multi-class antibodies规格： 48T
Anti-CK4 细胞角蛋白4抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh NRG3 神经调节蛋白3抗体 规格 0.2ml
Multicolor Broad Range Protein Ladder 预染彩色高范围蛋白质分子量Marker(10-260kDa)/10条带 250ul
Tetranectin 英文名称： 四连接素TN抗体 0.2ml
C8orf76 英文名称： 8号染色体开放阅读框76抗体 0.2ml
Anti-CK4 细胞角蛋白4抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
Anti-IL-18R alpha/CD218a 白细胞介素-18受体α链抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
Anti-Actin alpha 肌动蛋白α抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-CDK6 (Tyr24) 磷酸化周期素依赖性激酶6抗体 规格 0.1ml
兔IgG干粉 10mg/50mg/100mg 国产
WASP 英文名称： 湿疹血小板减少伴免疫缺陷综合征相关蛋白抗体 0.1ml
DOCK5 英文名称： 细胞质分裂付出蛋白5抗体 0.2ml
Anti-Actin alpha 肌动蛋白α抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
小鼠杂交瘤细胞；PK136说明书Mouse Anti-human IgG(3D3)/HRP 辣根过氧化物酶标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 0.1ml
FBXO33 英文名称： F-box蛋白相关蛋白33抗体 0.2ml
转录因子E2F-2抗体 Anti-E2F2 0.1ml
Anti-PDGF-R-B/FITC 荧光素标记血小板源性生长因子受体-B抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-TLK1(Ser695) 磷酸化调节染色体组装激酶1抗体 规格 0.1ml
Rabbit Anti-Goat IgG/FITC 荧光素标记兔抗羊IgGMulti-class antibodies规格： 0.3ml
培养条件：89%基础培养基+10%FBS+1%双抗
冻存液成分：10%DMSO+40%FBS+50%基础培养液
细胞质检情况：不含细菌、真菌、支原体等微生物污染
传代建议：1:2~1:3传代，2~3天换液1次
特别提醒：签收细胞后，如细胞状态不佳，或培养中遇到问题，烦请当天尽快联系，以便处理。当天及时反馈细胞情况和细胞照片是售后跟踪处理重要的参考依据，请务必重视。
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞；PK136说明书
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 杂交瘤细胞系PK136分泌一种小鼠单克隆抗体（IgG2a），此抗体与小鼠NK细胞起反应。 该细胞系由SP2/0-Ag14骨髓瘤和用CE小鼠脾细胞和骨髓细胞免疫的（C3H X BALB/C）F1小鼠的脾细胞融合而成。 此抗体对NK特异且在有补体时有细胞毒作用。 此抗体与不同小鼠株的细胞的反应方式，与常规的NK1.1抗血清的反应方式相符。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10% FBS
传代方法 1：
2。3天内可长满。
传代情况 PN5
冻存条件 完全培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
小鼠杂交瘤细胞；PK136说明书周期的概念:
细胞周期是可再生细胞从准备时期到分裂为两个细胞的一个循环阶段。
细胞周期分为细胞间期和细胞分裂期，细胞间期较长，而细胞分裂期较短。
FBS (fetal bovine serum, 胚牛血清), CS (calf serum, 小牛血清)和HS (horse serum, 马血清)，对细胞而言差异极大，请务必依据细胞株资料单指定之血清种类培养之。
将培养基置于 37 °C水槽中回温，回温后喷以70 % 酒精并擦拭之， 移入无菌操作台内。取出冷冻管， 立即放入37 °C 水槽中快速解冻， 水面高度不可接近或高过冷冻管之盖沿， 否则易发生污染。轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化后， 以70 % ethanol 擦拭冷冻管外部， 移入无菌操作台内。
小鼠杂交瘤细胞；PK136说明书注意事项：
1、实验进行前，无菌室及无菌操作台（laminarflow）以紫外灯照射30-60分钟灭菌，以70%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后，再进行下一个细胞株之操作。
2、无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置，其它实验用品用完即应移出，以利于气流之流通。实验用品以70%ethanol擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在抬面之中央无菌区域，勿在边缘之非无菌区域操作。
3、小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。
4、工作人员应注意自身之安全，须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作，并选择适当等级之无菌操作台（至少ClassⅡ）。操作过程中，应避免引起aerosol之产生，小心毒性药品，例如DMSO及TPA等，并避免尖锐针头之伤害等。
5、定期检测下列项目：5.1CO2钢瓶之CO2压力5.2CO2培养箱之CO2浓度、温度、及水盘是否有污染（水盘的水用无菌水，每周更换）。5.3.无菌操作台内之airflow压力，定期更换紫外线灯管及HEPA过滤膜，预滤网（300小时/预滤网，3000小时/HEPA）。6.水槽可添加消毒剂（Zephrin1:750），定期更换水槽的水
6、粉末培养基配制好后（加了血清），一般在4度尽量不要超过1个月，如在-20度存放时间可长一些，但最好也不要超过3-4个月，可能对于永生化细胞株来说要求不是太高，细胞娇弱，放置时间不宜过长。
7、开紫外线照射台的时候，就将培养基、酶、DHANKS液那到室外让它自然升温。这样40分钟后，温度也升上来了。有很多人将他放到37度水浴锅里加热。一定要注意水浴锅的卫生，有的常年不清洗，里面很脏，容易在外面瓶身上吸附大量细菌。因此用它的也一定要勤换水。从水浴锅拿出后，最好找个毛巾擦干上面的水。
小鼠杂交瘤细胞；PK136说明书操作流程与注意事项
1.如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室
2.拧松瓶盖，细胞瓶竖立培养8h（或过夜）
3.待细胞沉底后吸除上层液体（含碎片残渣，请小心操作），然后吸取沉底的细胞层（2ML左右转移到新的培养瓶，加入新鲜的完全培养基（如细胞状态较差可将血清浓度调高到15%）继续培养
ELISA Kit for Human C-X-C motif chemokine 9小鼠促生长激素释放激素(GHRH)ELISA试剂盒，英文名：GHRH ELISA Kit人碳酸酐酶(Carbonic anhydrase 12)ELISA试剂盒人96T31.2-2000 pg/mL小鼠胶原酶I(Collagenase I)ELISA试剂盒，英文名：Collagenase I ELISA Kit人肥大细胞类糜蛋白酶1(CMA1)ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠低氧诱导因子1α(HIF-1α)ELISA试剂盒，英文名：HIF-1α ELISA Kit人肌肽酶1(CNDP1)ELISA试剂盒人96T1.56-100 ng/mL小鼠β-防御素(β-DF)ELISA试剂盒，英文名：β-DF ELISA Kit人心磷脂合成酶(CRLS1)ELISA试剂盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠生长分化因子15(GDF-15)ELISA试剂盒，英文名：GDF-15 ELISA Kit人β-防御素126(β-DF126)ELISA试剂盒人96T0.625-40 ng/mL小鼠载脂蛋白A1(APOA1)ELISA试剂盒，英文名：APOA1 ELISA Kit人中性粒细胞弹性蛋白酶(NE/ELA2/HNE)ELISA试剂盒人96T78-5000 pg/mL小鼠突触素(SYP)ELISA试剂盒，英文名：SYP ELISA Kit
人钙粘蛋白5 (Cadherin-5) ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠白蛋白(albumin)ELISA试剂盒，英文名：albumin ELISA Kit人衰老关键蛋白5 ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)ELISA试剂盒，英文名：PCSK9 ELISA Kit人葡萄糖6磷酸脱氢酶(G6PD)ELISA试剂盒人96T0.78-50 mIU/mL小鼠基质金属蛋白酶12(MMP12)ELISA试剂盒，英文名：MMP12 ELISA Kit人透明质酸合成酶2(Hyaluronan synthase 2)ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠二氢硫辛酸脱氢酶(DLD)ELISA试剂盒，英文名：DLD ELISA Kit人胰岛素降解酶(IDE)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠白介素17F(IL17F)ELISA试剂盒，英文名：IL17F ELISA Kit人白介素11(IL-11)ELISA试剂盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠ATP结合盒转运蛋白G2(ABCG2)ELISA试剂盒，英文名：ABCG2 ELISA Kit人白细胞免疫球蛋白样受体亚家族B成员4(LILRB4)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠游离β绒毛膜促性腺激素(f-βCG)ELISA试剂盒，英文名：f-βCG ELISA Kit
BCL-2(humen) 人细胞凋亡相关基因BCL-2Multi-class antibodies规格： 48T
Anti-CK4 细胞角蛋白4抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh NRG3 神经调节蛋白3抗体 规格 0.2ml
Multicolor Broad Range Protein Ladder 预染彩色高范围蛋白质分子量Marker(10-260kDa)/10条带 250ul
Tetranectin 英文名称： 四连接素TN抗体 0.2ml
C8orf76 英文名称： 8号染色体开放阅读框76抗体 0.2ml
Anti-CK4 细胞角蛋白4抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
Anti-IL-18R alpha/CD218a 白细胞介素-18受体α链抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
Anti-Actin alpha 肌动蛋白α抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-CDK6 (Tyr24) 磷酸化周期素依赖性激酶6抗体 规格 0.1ml
兔IgG干粉 10mg/50mg/100mg 国产
WASP 英文名称： 湿疹血小板减少伴免疫缺陷综合征相关蛋白抗体 0.1ml
DOCK5 英文名称： 细胞质分裂付出蛋白5抗体 0.2ml
Anti-Actin alpha 肌动蛋白α抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
小鼠杂交瘤细胞；PK136说明书Mouse Anti-human IgG(3D3)/HRP 辣根过氧化物酶标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 0.1ml
FBXO33 英文名称： F-box蛋白相关蛋白33抗体 0.2ml
转录因子E2F-2抗体 Anti-E2F2 0.1ml
Anti-PDGF-R-B/FITC 荧光素标记血小板源性生长因子受体-B抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-TLK1(Ser695) 磷酸化调节染色体组装激酶1抗体 规格 0.1ml
Rabbit Anti-Goat IgG/FITC 荧光素标记兔抗羊IgGMulti-class antibodies规格： 0.3ml
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文献和实验相关实验
，无菌复溶 9. 淋巴细胞M密度梯度分离液（Accurate Chemical and Scientific），室温 10. RPMI-10完全培养基 11. FITC标记的抗CD3抗体和PE标记的PK136抗体（PharMingen） 12. 15ml和50ml带盖聚丙烯锥底离心管 13. Beckman CS-6R离心机（或同类离心机） 14. 血清学吸管 实验方法： 1. 处死小鼠，无菌取脾脏。 2. 制备脾脏
位点） VH5’IgG-GGGGCGGCCGC GTTTTGGCTG[A/C][A/G]GAGAC[A/G/T]GTGA VH3’IgM-GGGGCGGCCGC TGACTCTCTG[A/C][A/G]GAGAC[A/G/T]GTGA 4)小鼠VL3’端引物（引入NotⅠ酶切位点） VL5’-GCGGCGGCCGC AGCCCGTTT[G/T]ATTTCCA[A/G]CTT (2)从杂交瘤细胞提取RNA，反转录成cDNA,均按试剂盒说明书操作。
时代。近年来，抗体细胞工程技术已趋完善，并在小鼠-小鼠杂交瘤的基础上，又发展了小鼠-大鼠、小鼠-人以及人-人杂交瘤技术。制备McAb的小鼠B淋巴细胞杂交瘤技术包括动物免疫、细胞培养、细胞融合、杂交瘤细胞系克隆和再克隆、抗体检测和扩增以及杂交瘤细胞株保存和复苏等技术步骤和操作流程。（一）动物免疫杂交瘤技术常用的瘤细胞来自于BALb/c小鼠，因此，一般选用6~10周龄，健康、发育良好的雌性BALb/c小鼠进行免疫。根据病原体的抗原性、免疫原性和小鼠免疫反应性决定免疫途径，免疫次数，间隔时间和持续
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