小鼠杂交瘤细胞；PK136

细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
 

 
订购信息：
 

产品名称	小鼠杂交瘤细胞；PK136
生长特性	悬浮生长
货号	XG-X 17275

细胞名称    小鼠杂交瘤细胞；PK136
形态特性  淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性  杂交瘤细胞系PK136分泌一种小鼠单克隆抗体（IgG2a），此抗体与小鼠NK细胞起反应。 该细胞系由SP2/0-Ag14骨髓瘤和用CE小鼠脾细胞和骨髓细胞免疫的（C3H X BALB/C）F1小鼠的脾细胞融合而成。 此抗体对NK特异且在有补体时有细胞毒作用。 此抗体与不同小鼠株的细胞的反应方式，与常规的NK1.1抗血清的反应方式相符。
培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10% FBS
传代方法  1:2。3天内可长满。
传代情况 PN5
冻存条件  完全培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性　
STR
同工酶     
染色体      　
使用权限     A类
细胞的种类：
产品仅用于科研第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞处理：
1）复苏细胞产品名称：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM，常温条件下离心5分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
氟甲喹（标准品）  Flumequine   质量规格：HPLC>98%，标准品 兔子碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)ELISA检测试剂盒rabbitbasicfibroblastgrowthfactor,bFGFELISAKit 96T/48T
氟甲喹  Flumequine   质量规格：>98%，BR，进分 兔子胶原酶I(CollagenaseI)ELISA检测试剂盒RabbitCollagenaseIELISAKit 96T/48T
噁喹酸/奥啉酸  Oxolinic acid  质量规格：≥97% 兔子胶原酶II(CollagenaseII)ELISA检测试剂盒RabbitCollagenaseTypeIIELISAKit 96T/48T
柄曲霉素  Sterigmatocystin from Aspergillus Versicolor  质量规格：>98%,进分 兔子巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA检测试剂盒RabbitMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISAkit 96T/48T
尼日利亚菌素钠盐  Nigericin   质量规格：>98%,进分 兔子巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA检测试剂盒rabbitmacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISAKit 96T/48T
无活菌素  Nonactin  质量规格：>98%,美国进口 兔子抗中性粒细胞颗粒抗体(ANGA)ELISA检测试剂盒Rabbitai-neuophilgranulesaibody,ANGAELISAKit 96T/48T
曲古柳菌素A  Trichostatin A from Streptomyces sp  质量规格：>98%,进分 兔子可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA检测试剂盒rabbitsolubleE-selectin,sE-selectinELISAKit 96T/48T
罗布麻宁；夹竹桃麻素(标准品)  Acetovanillone  质量规格：GC>98%,标准品 兔子可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA检测试剂盒rabbitsolubleP-selectin,sP-selectinELISAKit 96T/48T
罗布麻宁；夹竹桃麻素  Acetovanillone  质量规格：>98%,BR 兔子可溶性白细胞分化抗原40配体(sCD40L)ELISA检测试剂盒Rabbitsolubleclusterofdiffereiation40ligand,sCD40LELISAKit 96T/48T
虎杖甙/虎杖苷/白藜芦醇苷  Polydatin  质量规格：HPLC>97%,BR 兔子可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA检测试剂盒rabbitSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1ELISAKit 96T/48T
小鼠可溶性肌球蛋白重链2(sMHC-2)Elisa试剂盒     Ethyl 3-(4-(methylamino)-3-nitro-N-(pyridin-2-yl)benzamido)propanoate  42 9659-01-8   中文名：  分子式：C18H20N4O5  度：98.0%   
小鼠可溶性肌球蛋白重链2(sMHC-2)ElisaKit     Ethyl 2-(3-formyl-4-hydroxyphenyl)-4-methylthiazole-5-carboxylate  中文名：  分子式：C14H13NO4S  度：98.0%
小鼠可溶性肌球蛋白重链1(sMHC-1)Elisa试剂盒              Ethyl 3-(4-(methylamino)-3-nitro-N-(pyridin-2-yl)benzamido)propanoate  42 9659-01-8   中文名：  分子式：C18H20N4O5 
小鼠可溶性肌球蛋白重链1(sMHC-1)ElisaKit     Ethyl 2-(3-formyl-4-hydroxyphenyl)-4-methylthiazole-5-carboxylate  中文名：  分子式：C14H13NO4S 
小鼠可溶性坏死因子相关凋亡诱导配体(sAIL)ELISA试剂盒     Makisterone A 20,22-monoacetonide  中文名：  分子式：C31H50O7
Flumethasone  2135-17-3  中文名：氟米松  分子式：C22H28F2O5  度：98.0%  关键词：    小鼠β甘露糖苷酶elisa试剂盒   小鼠β甘露糖苷酶试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠β甘露糖苷酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠β甘露糖苷酶试剂盒、小鼠β甘露糖苷酶eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  
Flumequine   42835-68-7  中文名：氟甲喹钠  分子式：C14H11FNNaO3  度：98.0%      小鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISA试剂盒  
Flumequine  42835-25-6  中文名：氟甲喹  分子式：C14H12FNO3  度：98.0%      小鼠水通道蛋白2(AQP-2)ELISA试剂盒  
Fludarabine  21679-14-1  中文名：氟达拉宾  分子式：C10H12FN5O4  度：98.0%  关键词：    小鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA试剂盒  
Floribundone 1  118555-84-3  中文名：  分子式：C32H22O10  度：99.0%  关键词：  光叶决明; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA试剂盒
小鼠杂交瘤细胞；PK136尼美舒利  Nimesulide  质量规格：>99% 751型分光光度仪1毫升1厘米光径玻璃比色皿1个
硝酸咪康唑  Miconazole Nitrate  质量规格：>99% MouseGlucose-dependeinsulin-releasingpolypeptide,GIPELISA试剂盒小鼠葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
硝酸咪康唑(标准品)  Miconazole Nitrate  质量规格：>99%,标准品 小鼠天冬酰胺內肽酶(LGMN)ELISA试剂盒 ，英文名： LGMN ELISA Kit
硫酸小诺霉素/硫酸小诺米星/硫酸沙加霉素  Micronomicin Sulfate  质量规格：含量≥590 µg/mg 豚鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA检测试剂盒GuineaPigplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit 96T/48T
小诺霉素（标准品）  Micronomicin Sulfate  质量规格：效价测定 牛皮质醇(Coisol)试剂盒 Bovine Coisol ELISA Kit
MUG;4-甲基伞型酮-beta-D-葡糖苷酸  4-MUG  质量规格：>98%,BR 英文名称HumanMMP-1——Maixmetalloproteinase-1ELISAkit人基质金属蛋白酶1(MMP-1)规格：96T/48T
米诺地尔  Minoxidil  质量规格：>98% 动物全组织糖蛋白高酸希尔(PAS)法阿尔新蓝(ALCIANBLUE)染色试剂盒10
米诺地尔(标准品)  Minoxidil  质量规格：>98%,标准品 RatProstaticAcidPhosphatase,PAPELISA试剂盒大鼠前列腺酸性0酸酶(PAP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
米诺地尔（硫酸盐）敏乐啶  Minoxidil Sulfate  质量规格：>99.0% 小鼠天冬酰胺合成酶(ASNS)ELISA试剂盒 ，英文名： ASNS ELISA Kit
米诺地尔（硫酸盐）敏乐啶(标准品)  Minoxidil Sulfate  质量规格：HPLC>98%,标准品 豚鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA检测试剂盒GuineaPigcalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISAKit 96T/48T
注意事项：
1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色
，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。