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- 详细信息
- 文献和实验
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379
- 英文名:
BCIP/NBT Solution,Premixed
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
阴凉干燥
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")BCIP/NBT即用型显色液厂家,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:BCIP/NBT即用型显色液厂家
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
编号:RFT082
英文名:BCIP/NBT Solution,Premixed
规格:100ml
本染色液为即用型工作液,可以直接使用,不用稀释。BCIP+NBT是碱性磷酸酶(AP)最佳的底物组合之一。在碱性磷酸酶的催化下,BCIP会被水解而产生强反应性的产物,该产物与NBT发生反应,形成不溶性的深蓝色至蓝紫色化合物。该试剂盒可用于AP系统的IHC 和Western Blot 实验的酶促显色。在AP催化下,在组织切片或印迹膜上结合了AP偶联物的地方产生深蓝色沉淀,可根据颜色反应来确定目的蛋白的位置及表达情况。
使用方法:
1. 印迹膜显色:
将本产品滴加在待检测的印迹膜上(或将印迹膜浸入到 BCIP/NBT 显色液中),室温避光孵育 10-20 分钟。显色完毕后,将膜浸入水中,终止反应。
注:印迹膜显色前要用1×TBST漂洗3次,每次10分钟。不要用1×PBST漂洗,因为无机磷是AP的强烈抑制剂。
2. 组织切片或细胞爬片显色:
滴加适量的BCIP/NBT显色液于需要显色的组织切片或细胞爬片上,室温避光孵育10-20分钟。显微镜下观察控制显色时间,当达到最佳显色效果后,自来水冲洗终止显色。显色后的切片经复染、脱水透明,封片后可长期保存。
储存条件:2~8℃,有效期一年。
除BCIP/NBT即用型显色液厂家外,我公司正在打折促销以下产品:
·高保真平末端pfu DNA聚合酶
编号:RFT101
英文名称:pfu DNA Polymerase
规格:100U(40μl)|5×100U(5×40μl)
本品是嗜热古细菌来源的DNA聚合酶,该酶除具有5’-3’DNA聚合酶活性外,还具有很强的3’-5’外切酶活性,增强了PCR扩增的保真度。与Taq酶相比,pfu聚合酶热稳定性更好,更能忍耐较高的变性温度。Pfu的保真性是Taq DNA聚合酶的10-15倍。延伸速度为0.5kb/分钟。PCR产物3’端不带碱基A,为平滑末端,要通过平滑末端克隆法进行克隆。适用于高保真的DNA片段的扩增、DNA片段的平滑化。
试剂盒组成:
pfu DNA Polymerase(2.5U/μl)-————————40μl
10×pfu PCR buffer(含Mg2+)—————————1ml
活性定义:1单位(U) pfu DNA Polymerase活力定义为在74℃、30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
贮存液:50 mM Tris-HCl (pH 8.0); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 50 mM KCl ; Stabilizers; 50% glycerol
使用方法:
1、按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系:
| 成分 | 20μl反应体系 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| Template | 0.04-0.2 μg | 0.1-0.5 μg | as you wish |
| Primer 1(10μM) | 0.4μl | 1μl | 0.2μM |
| Primer 2(10μM) | 0.4μl | 1μl | 0.2μM |
| 10×pfu PCR buffer(含Mg2+) | 2μl | 5μl | 1× |
| dNTP Mixture(10 mM) | 0.4μl | 1μl | 200μM each |
| pfu (2.5 U/μl) | 0.4μl | 1μl | 0.05U/μl |
| ddH2O | up to 20μl | up to 50μl | - |
注1:如果需要改变Mg2+浓度,根据下表调节
| PCR反应体系中Mg2+终浓度 | 2 mM | 2.5 mM | 3 mM | 4 mM |
| 20μl反应体系中25 mM MgSO4加入量 | 0μl | 0.4μl | 0.8μl | 1.6μl |
| 50μl反应体系中25 mM MgSO4加入量 | 0μl | 1μl | 2μl | 4μl |
注2:配制反应液时,请最后加入pfu,因为本酶有很强的3’-5’外切酶活性,有可能降解引物。
2、混匀后,离心快甩将反应液收集到管底。
3、PCR仪如果没有热盖加热的话,补加25μl矿物油。
4、PCR仪上执行以下程序:
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 初始变性 | 94℃ | 3-5 min | 1 |
| 变性 | 94℃ | 30 sec | 25-40* |
| 退火 | 50-60℃* | 30 sec | |
| 延伸 | 72℃ | 0.5kb/min* | |
| 最后延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
注:PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。
注意事项:
1、pfu 酶具有 3’-5’的外切酶活性,所以 pfu 酶扩增时延伸速度远比 Taq 酶低,应根据扩增产物的长度设置相应的延伸时间,一般情况下 pfu 酶的延伸速度为每分钟 0.5kb;同时 pfu 酶的 3’-5’的外切酶活性可能降解引物,所以应最后把pfu 酶到反应体系中,并立即进行 PCR 反应。
2、pfu 酶的热稳定性比 Taq 酶好,对于 GC 含量很高的模板,变性温度可以提高到98℃,对 pfu 酶的活性无影响。
储存条件:-20℃,有效期一年。
BCIP/NBT即用型显色液厂家关键词:RFT082,BCIP/NBT即用型显色液,BCIP/NBT Solution,Premixed
1405-10-3 Neomyein Sulfate 硫*(代"酸")新霉素
F030419 胶体金标记兔抗鸡IgY抗体 Rabbit Anti-Chicken IgY*GOLD
ARB10115 人Klotho蛋白检测服务 Human klotho ELISA KIT
酚酞 Thiamphenicol 77-09-8
SJ0400 L-瓜*酸
芴甲氧羰基-N-三*甲基-L-组*酸 4,4"-Bipyridine 109425-51-6
J0313 兔抗人IgM(H+L)抗血清
ARB11053 人表面膜免疫球蛋白M(mIgM)Elisa定量检测 Human membrane igm,migM ELISA KIT
曲酸 Fmoc-Hyp-OH 501-30-4
L-色*酸甲酯盐*(代"酸")盐 PHA 7524-52-9
去核酸酶试剂 Trityl chloride resin
过硫*(代"酸")铵溶液(AP,10%) 5×1ml|10ml
BTN130642 核酸内切酶VIII Endonuclease VIII
5-羟甲基糠醛 Nalidixic acid 67-47-0
ARB12544 大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)检测服务 Rat insulin-like growth factor binding protein 2,igfbp-2 ELISA KIT
BL0901 FITC标记羊抗小鼠IgG抗体
ARB12406 大鼠组织型纤维溶酶激活物(t-PA)酶标法分析 Rat tissue-type plasiminogen actilyse ELISA KIT
BTN131158 荧光素488标记山羊抗兔IgG Goat Anti-Rabbit IgG ,IF488 Conjugate
51811-82-6 姬姆色素染料 Giemsa stain
ARB11743 人睫状神经营养因子(CNTF)酶免分析 Human ciliary neurotrophic factor,cntf ELISA KIT
BTN100879 过硫*(代"酸")铵 Ammonium Persulfate
PY04-028 多粘菌素(I) 1.2mg/支×10支 每支添加于100ml亚硫*(代"酸")盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂基础(SPS)培养基中,用于产气荚膜梭菌的平板计数
BCIP/NBT即用型显色液厂家关键词:RFT082,BCIP/NBT即用型显色液,BCIP/NBT Solution,Premixed
DP339 血清/血浆游离DNA提取试剂盒
尿紫胆原(PBG)定性检测试剂盒(Watson-Schwartz法) 60T
F030418 胶体金标记兔抗猪IgG抗体 Rabbit Anti-Pig IgG*GOLD
BTN101113 柱式软体动物RNAOUT Column Mollusk RNAOUT
BFD061 猪瘟抗体检测卡
DEAE-Dextran细胞转染试剂盒 200T
F030111 HRP标记羊抗乙肝核心抗原抗体 HRP*Polyclonal Goat Anti-HBcAg
ARB11250 人胃抑素(GIP)酶标法分析 Human gastric inhibitory polyPeptide,gip ELISA KIT
59865-13-3 CYCLOSPORIN A 环孢霉素A
71010-52-1 Phytagel plantcell 植物凝胶
PY02-118 葡萄糖肉浸液肉汤 250克
ARB11696 人硫*(代"酸")肝素糖蛋白(HSPG)血清中含量检测 Human heparin sulphate protoglycans,hspg ELISA KIT
L-缬*酸甲酯盐*(代"酸")盐 MEGA-10 6306-52-1
Acr-Bis(40%,19:1) 500ml
北京百莱博科技有限公司是蛋白质研究产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购BCIP/NBT即用型显色液厂家。
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文献和实验检测方法 对于探针和靶序列杂交之后的检测,我们通常使用碱性磷酸酶(AP)耦联的抗体,采用显色法或化学发光法检测。在碱性磷酸酶的底物中,我们使用CDP-Star或CSPD用于化学发光法检测,NBT/BCIP用于显色法检测。同时,对于膜杂交中的化学发光信号的检测,建议使用Lumi-Film以获得最理想的信号。 检测底物 即用型CDP
剂:EDTA或者Triton X-100; 9、1%~10%牛血清清蛋白(BSA)封闭液; 10、H2 O2 ,灭活内源性过氧化物酶; 11、显色液:根据你做的酶来选择,如果是HRP就用DAB,如果是AKP,就用NBT/BCIP,免疫荧光则不需要; 12、50%缓冲甘油封片液。
剂:EDTA或者Triton X-100; 9、1%~10%牛血清清蛋白(BSA)封闭液; 10、H2 O2 ,灭活内源性过氧化物酶; 11、显色液:根据你做的酶来选择,如果是HRP就用DAB,如果是AKP,就用NBT/BCIP,免疫荧光则不需要; 12、50%缓冲甘油封片液。
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