BCIP/NBT即用型显色液

特别提示：包括BCIP/NBT即用型显色液在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：BCIP/NBT即用型显色液
英文名称：BCIP/NBT Solution，Premixed
产品货号：RFT082
产品规格：100ml

本染色液为即用型工作液，可以直接使用，不用稀释。BCIP＋NBT是碱性磷酸酶(AP)zuì佳的底物组合之一。在碱性磷酸酶的催化下，BCIP会被水解而产生强反应性的产物，该产物与NBT发生反应，形成不溶性的深蓝色至蓝紫色化合物。该试剂盒可用于AP系统的IHC 和Western Blot 实验的酶促显色。在AP催化下，在组织切片或印迹膜上结合了AP偶联物的地方产生深蓝色沉淀，可根据颜色反应来确定目的蛋白的位置及表达情况。

使用方法：
1. 印迹膜显色：
将本产品滴加在待检测的印迹膜上(或将印迹膜浸入到 BCIP/NBT 显色液中)，室温避光孵育 10-20 分钟。显色完毕后，将膜浸入水中，终止反应。
注：印迹膜显色前要用1×TBST漂洗3次，每次10分钟。不要用1×PBST漂洗，因为无机磷是AP的强烈抑制剂。

2. 组织切片或细胞爬片显色：
滴加适量的BCIP/NBT显色液于需要显色的组织切片或细胞爬片上，室温避光孵育10-20分钟。显微镜下观察控制显色时间，当达到zuì佳显色效果后，自来水冲洗终止显色。显色后的切片经复染、脱水透明，封片后可长期保存。

储存条件：2～8℃，有效期一年。

除了BCIP/NBT即用型显色液,，我公司还供应以下相关产品：



名称：液体样品蛋白纯化回收试剂盒
货号：BTN121208
规格：50次
本产品专门用于对液体样品进行蛋白提取浓缩、脱盐、脱去垢剂、脱还原剂等。

产品特点：
1.适用于各种液体样品，包括蛋白溶液、胞浆提取液、胞核提取液、细胞或微生物培养基上清液、血液、尿液、脑脊液等。也适于原代或传代细胞悬液。
2. 灵敏，对一般蛋白样品，zuì低浓度可达1μg/mL；对含SDS的样品，zuì低浓度为5μg/mL。
3.蛋白回收率95-100%，远高于经典的丙*或三*醋酸沉淀法，且可有效去除样品中的脂质，不影响后续SDS-PAGE和Western Blot等生物实验
4. 得到的蛋白质可用于后续的SDS-PAGE、免疫沉淀和质谱分析等实验。但蛋白已经变性，没有活性。
5. 能有效去除液体样品中的盐(1M)、还原剂(1%巯基乙醇或DTT)、去垢剂(5%SDS、1% Triton X-100、1% NP-40)和油脂等。
6. 操作方便迅速，只需要混匀后离心，不需要其他仪器。
7.产品稳定，可室温长期放置。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	0.5ml
溶液B	1ml
溶液C	50ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：

使用方法一(用于不含SDS的液体样品，但样品蛋白浓度不能低于1μg/mL)
1．将100μL需要液体蛋白样品转移到一个自备的1.5mL塑料离心管中。
2．加入10μL溶液A，涡旋激烈震荡10-30秒混匀。
3．冰上放置15分钟。
4．加入10μL溶液B，轻轻混匀。
5．冰上放置60分钟。
6．4℃12000～15000×g离心10分钟。
7．小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
8．加入1mL 冰浴的溶液C，震荡混匀后4℃12000～15000×g离心15分钟。
9．小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
10．短暂离心，小心移弃残留上清液后，将有蛋白沉淀的离心管敞开放置在冰上，空气晾干。一般需要10分钟左右。
11．样品放4℃保存或立即电泳检测。可直接用1×SDS-PAGE上样液或其他电泳缓冲液溶解蛋白沉淀，取适量上样。如果蓝色的溴酚蓝染料变黄，则说明有残留酸性物质污染，必须加少量自备的1M Tris-HCl(pH8.8)缓冲液，直到颜色变成蓝色为止，否则将影响电泳结果。

使用方法二(用于含SDS的液体蛋白样品，但样品蛋白浓度不能低于5μg/mL)
1．将200μl液体蛋白样品转移到一个自备的1.5mL塑料离心管中。
2．加入8μl溶液B，涡旋激烈震荡10-30秒混匀。
3．冰上放置30分钟或-20℃放置15分钟(过夜放置更好)。
4．4℃ 12000～15000×g离心15分钟。
5．小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
6．加入1mL 冰浴的溶液C，震荡混匀后4℃ 12000～15000×g离心15分钟。
7．小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
8．短暂离心，小心移弃残留上清液后，将有蛋白沉淀的离心管敞开放置在冰上，空气晾干。一般需要10分钟左右。
9．样品放4℃保存或立即电泳检测。可直接用1×SDS-PAGE上样液或其他电泳缓冲液溶解蛋白沉淀，取适量上样。如果蓝色的溴酚蓝染料变黄，则说明有残留酸性物质污染，必须加少量自备的1M Tris-HCl(pH8.8)缓冲液，直到颜色变成蓝色为止，否则将影响电泳结果。