酪蛋白溶液(TBS)说明书

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")酪蛋白溶液(TBS)说明书，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：酪蛋白溶液(TBS)说明书
英文名：Casein Blocking Solution(TBS)
规格：250mL
品牌：百奥莱博
编号：BTN131105A
即用型酪蛋白(1%)用于封闭非特异性位点。
A型：溶于TBS的Hammarsten级酪蛋白，Kathon防腐剂，pH7.4。
B型：溶于PBS的Hammarsten级酪蛋白，Kathon防腐剂，pH7.4。可用于在使用牛奶封闭背景高时作为替代品使用。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

我公司的酪蛋白溶液(TBS)说明书，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：

·微量RNA助沉剂
编号：BTN3120
英文名称：RNApp RNA precipitation aid
规格：0.5mL
本品是一种经去RNase处理的，能有效地促进微量RNA沉淀回收的大分子聚合物，适用于提取样品中的微量RNA。

产品特点：
1．促进微量RNA的沉淀，其沉淀条件跟常规乙醇或异丙醇RNA沉淀相同，故可直接加入到样品中促进微量RNA的沉淀和回收。
2．使用多样，可以在核酸提取的任何步骤中加入，既可以加到提取液中，也可以加到稀释的RNA样品中。
3．化学惰性，不影响核酸的A260/280光吸收，不影响后续的反应过程(如cDNA 合成RT-PCR和体外转录等)。
4．不含RNase，产品溶解在液相RNase Scavenger中，检测不到残留的RNase。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一：用于提取微量组织样品中的RNA(推荐用法)
加入裂解液中使用:按10-20μL RNApp/mL 裂解液的比例将RNApp加入常用RNA提取液(如TRIzol，动物RNA提取试剂盒)中，然后按相应的操作规程直接提取RNA。如果裂解液中含有CTAB，则需要在最后醇沉淀时加入，后续处理不变。

二：用于沉淀回收反应体系中的微量RNA
直接将5-10μL RNApp 加入待沉淀的RNA溶液中，然后按盐/乙醇或盐/异丙醇沉淀RNA的经典操作规程沉淀RNA。

疑难解答：
Q：本产品与DNApp 有何区别？
A：两者化学成分完全相同，只是本产品经过去RNase处理。


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·蓝色DNA上样液，6×
编号：BTN3690B
英文名称：DNA Loading Buffer(Blue)
规格：10mL
DNAload可以作DNA上样液用,含甘油和红色染料(BTN3690A)或蓝色染料(BTN3690B),便于直接上样和观察电泳进程。含红色染料的3690A还可以直接加到PCR反应体系中，不会干扰PCR反应，PCR结束后可以直接电泳，其红色染料泳动速度与50bp DNA片段相当，对绝大多数PCR片段的观察不会造成干扰，尤其适用于长度在2 Kb以下的DNA片段的电泳。含蓝色染料的BTN3690B其染料为*酚兰和二甲*蓝，适合于基因组合DNA和其他大片段DNA的电泳。本产品与TAE、TBE和百奥莱博的超快电泳缓冲液SuperBuffer-2 兼容。

试剂盒组成：

 

成分	10mL(A)	10mL(B)
RNAep	10ml(红色)	10ml(蓝色)
说明书	1份	1份

储存条件：常温运输，4℃(短期)或-20℃(长期)保存有效期一年。

使用方法：

DNA电泳(对BTN3690A和BTN3690B)
DNAload 为6×浓缩液，按5:1的比例将DNA样品与本产品混合(如10μl DNA样品+2μl 本产品)，直接上琼脂糖凝胶电泳(以TAE或TBE 为电泳缓冲液)，根据胶的大小选择合适的电压进行电泳，电泳完毕后可直接将凝胶放在紫外灯下观察结果。

加入PCR中使用(仅对BTN3690A)
DNAload 为6×浓缩液，如果加入到PCR 体系中，需要使其终浓度为1×，具体用量需要根据PCR 体积决定，PCR结束后直接上样电泳。注意：不能将3690B 加到PCR 体系中，因为其染料抑制Taq DNA聚合酶活性。


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·长效期SDS-PAGE还原剂
编号：BTN100910
英文名称：SDS-PAGE Reducing Agent
规格：10mL
在蛋白质PAGE电泳中，还原剂的作用是打断二硫键，可以使蛋白质变性。但是在常规的SDS-PAGE中只有上样液中含有还原剂，PAGE胶中并没有还原剂，蛋白质会在电泳过程中重新形成二硫键，因此电泳条带不清晰。本产品可以克服蛋白电泳此缺点。将本品加入到电泳液中，使蛋白在电泳过程中无法重新形成二硫键。

储存条件：常温运输、4℃保存，有效期一年。

·SuperTOPO-Amp平末端克隆试剂盒
编号：BTN160684-25A
英文名称：SuperTOPO Blunt Cloning Kit
规格：25次
本试剂盒是基于Topoisomerase能够在几秒钟之内高速连接DNA片段的原理开发的无背景克隆试剂盒，它使用了本公司通过定点突变改良的TOPO酶，连接效率比野生型更高。

产品特点：
1.高效快速，连接反应几乎在几秒钟内完成，连接率几乎达到100%。
2.适用于pfu、KOD等高保真聚合酶扩增的平末端片段的克隆。
3. 无杂带或引物二聚体的PCR扩增产物可以不经过纯化直接用于连接反应。
4. 零背景，无需IPTG-X-Gal蓝白斑筛选，故不需要IPTG-X-Gal培养基。
5. 本试剂盒按10μL标准反应体系，有25次和50次两种规格包装供选择。
6. 提供含Amp和Kan两种抗性的载体供选择(BTN160684-25A是含Amp抗性TOPO载体，BTN160684-25K是含Kan抗性TOPO载体)。

试剂盒组成：

成分	规格
SuperTOPO-Amp Blunt载体	25μl(BTN160684-25A)
SuperTOPO-Kan Blunt载体	25μl(BTN160684-25K)
连接缓冲液	25μl
M13F引物	50μl
M13R引物	50μl
超纯水	1ml
说明书	1份

注意：BTN160684-25A提供SuperTOPO-Amp Blunt载体，BTN160684-25K提供SuperTOPO-Kan Blunt载体。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

1. 如果是PCR 制备插入片段，所用引物不能磷酸化，使用pfu、KOD等产生平末端片段的高保真DNA聚合酶。为保证扩增产物的完整性，PCR循环结束后，再延伸5-10分钟，确保片段延伸完全。
2.电泳检测并相对定量PCR片段(跟DNA marker 比较)。根据插入片段长度和下表确定每次连接反应需要的最佳用量：

插入片段长度	最佳用量
100-1000bp	20-50 ng
1000-2000bp	50-100 ng
2000-5000bp	100-200 ng

3.在一个干净的塑料离心管中，室温下(不要放在冰上)设置如下连接反应体系：

成分	用量
纯化后的PCR产物	不超过8μl(详见注意事项)
SuperTOPO-Amp Blunt载体或 SuperTOPO-Kan Blunt载体	1μl
连接缓冲液	1μl
超纯水	补到10μL

注意：如果使用未经纯化的PCR产物，则需要加入量不能超过1μL，否则PCR 体系会干扰连接体系。
4. 轻柔吹打混匀后，短暂离心，常温(20-30℃)放置0-5分钟。如果在冬天室温低于20℃，建议使用25℃水浴或金属浴。注意：连接时间超过5分钟的话连接效率会降低。
5. 如果当天不转化，可以将离心管放-20℃保存。如果转化，则取5μL连接液加到50-100μL 刚刚融化的感受态细胞中，轻柔混匀。注意：本产品要求感受态细胞的转化效率不得低于5×10E7cfu/ug。
6. 如果片段长度小于2Kb，则不需要冰浴和热激，直接在离心管中加入500μL 不含抗菌素的SOC或LB培养基，然后取200μL涂盘。也可以先3000g离心2分钟后，弃掉大部分上清，只留约100μl左右，然后重悬细菌后全部涂盘在含Amp(对SuperTOPO-Amp)或Kan(对SuperTOPO-Kan)的培养皿上，37℃过夜培养。
7. 如果片段长度长于2Kb，则按常规转化方式，先冰浴2-30分钟，然后42℃热激30秒，冰上防放置2分钟，再在离心管中加入500μl 不含抗菌素的SOC或LB培养基，37℃ 250rpm培养60分钟，然后取200μL 涂盘。也可以先3000g离心2分钟后，弃掉大部分上清，只留约100μL左右，然后重悬细菌后全部涂盘在含Amp(对SuperTOPO-AmpBlunt载体)或Kan(对SuperTOPO-Kan Blunt载体)的培养皿上，37℃过夜培养。
8. 用M13F/M13R通用引物进行菌落PCR或直接测序来鉴定重组子。

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