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- 2025年11月21日
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文献和实验运用Cell Based Elisa检测信号通路蛋白和磷酸化蛋白
研究信号通路时，特别是对于高通量样本检测，通过传统的WB方法来检测蛋白是一项非常费时费力的工作。为了解决这个问题，科学家开始尝试一种新的方法，希望更加高效，简单，没有任何辐射的来检测这些蛋白，尤其是信号传导研究中的磷酸化蛋白。Cell Based Elisa 提供了这样一种理想的，高效的，直接的检测大量样本的细胞信号通路蛋白的方法。我们通过了解Cell Based Elisa 的实验步骤来解析怎样检测高通量的样本中的蛋白，尤其是信号通路相关的蛋白。原理图1.在Cell Based Elisa中
对照孔)。 3. 加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小时，洗涤。 4. 加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。 5. 终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。 6. 结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测O・D值：在ELISA检测仪上，于450
【求助】ELISA检测中的问题参与者：zhou3303请教各位大虾，小弟用LPS刺激中性粒细胞（2.5×106/ml）表达细胞因子IL-1，TNF-a，IL-6的实验中，ELISA检测上清后，空白孔（只有培养液和细胞）的值也较高，有50pg/ml，甚至有的有300pg/ml，而LPS刺激组的值也只有空白组的2倍多，不知是什么原因，望不佞赐教。参与者：用心聆听我在做跟你类似的实验，我测的是TNF-a，IL-6，IL-8，我查过相关文献，排除操作误差问题的话，要看你的作用时间是多久，因为细胞在不受
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