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大量
- 英文名:
Bordet-Gengou Medium
- 保质期:
3年
- 供应商:
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件:
常温、避光、防潮保存
- 规格:
250g
| 名称 | 英文名称 | 编号 | 规格 | 价格 |
| 包姜氏培养基(不含琼脂) | Bordet-Gengou Medium | LM8483 | 250g | 110元 |
| 产品说明及用途:.用于百日咳杆菌的分离培养 | ||||
用途:用于百日咳杆菌的分离培养。
成分(g/L)
马铃薯浸粉 4.5g
蛋白胨 10.0g
氯化钠 5.5g
PH值 6.5-6.9
用 法
称取本品 20克,加入1000ml蒸馏水中,并吸取甘油10ml,混匀加热溶解, 分装,121℃高压灭菌15分钟,冷至45-50℃左右时,加入无菌脱纤维羊血200ml,混匀,倾入无菌平皿或制成试管斜面,备用。
简述培养基制备的要求使用脱水培养基和其他含有有害物质(胆盐或其它选择剂)的成分时,应遵守良好实验室规范和生产厂商提供的使用说明配制。如质量/体积、pH、制备条件、灭菌条件和操作步骤等,并做好记录。
水
配制培养基使用蒸馏水或相同质量的水,以排除测试条件下抑制或影响微生物生长的物制。如果蒸馏水的用氯消毒的水制备的,在蒸馏前应先对氯进行中和(见GB/T6682)。盛放蒸馏水的容器最好是由中性材料制成的(如中性玻璃、聚乙烯等)。在初次使用前要确认容器中不含任何抑制因子。
包姜氏培养基(不含琼脂)为保证蒸馏水的质量,电阻率应至少达到300000Ωcm。
警告:采用离子交换器(去离子)生产的去离子水,微生物含量较高,这种水在过滤灭菌后仍可能带有细菌生长的抑制因子。所以配置培养基时最好不要使用这种方法生产的去离子水而应使用蒸馏水。
称量和复水
称量所需的脱水培养基(注意缓慢操作,必要时佩带口罩或在通风柜中操作,以防吸入含有毒物质的培养基粉末),包姜氏培养基(不含琼脂)先加入少量的水,充分混合(注意避免培养基结块),然后再加入至所需的量。
溶解
脱水培养基加水后适当加热,并不停搅拌使其快速溶解,必要时,重新溶解。含琼脂的培养基在加热前应先浸泡几分钟。用各别成分制备的培养基应将不同成分分别加入适量的水中,并充分溶解,然后再加入到所需的量。
pH值的测定和调整
用pH计测pH,必要时进行调整。在实验室用各别成分制备培养基,除特殊说明外,培养基灭菌后冷却到25℃时,pH的变化不应超过0.2个单位。一般使用浓度约为40g/L(约1mol/L)的氢氧化钠溶液或浓度为36.5g/L(约1mol/L)的盐酸溶液调整培养基的pH。
包姜氏培养基(不含琼脂)注:商品化的培养基高压灭菌后pH值可能变化很大,但采用优质蒸馏水或去离子水配配制时,灭菌前无需调节pH值。
分装
将制配制好的培养基分装到适当的容器中,根据不同用途,容器的体积可为培养基的1倍、2倍或3倍。
灭菌
培养基和试剂应采用湿热灭菌或过滤灭菌。亮绿培养基等特定的培养基中含有对光和热敏感的物质,只能煮沸灭菌。煮沸后应迅速冷却,避光保存(参见相关标准或供应商使用说明)。
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文献和实验作用,不含这种质粒的细菌则不能在含抗生素的培养基上存活。 三.实验材料 : E.coli InvaF ' E.coli InvaF ' (pUC19) 四.实验 仪器 、器皿及试剂: 仪器 : 超净工作台 恒温培养箱 高压灭菌锅 恒温水浴锅 微波
周血单核细胞或者单个核细胞的单核树突状细胞的传代 ,P romoCell 建议使用树突状细胞生成培养基 DXF(C-28052)。详情如下: 1、使细胞附着(第 0 天) 新分离的细胞接种到适量的 PromoCell DC 生成培养基DXF中(不含细胞因子)。单核细胞的接种密度为200-300万/cm2,纯化的单核细胞则为50万/cm2。在37℃和5%的CO2 的培养箱中培养1小时。 2、清洗附着的细胞(第 0 天) 用力晃组织培养皿使未附着的细胞脱落并吸去。用温热
。 你是怎么检测阳性克隆的呢?如果是菌落PCR的话,假阳性的几率还蛮高的。 另外,需要检测一下抗生素是否失效。 zhujoker 注意摇菌时要给细菌一些新鲜的空气,因为生长时耗氧的。有的质粒提取确实会出现你这种情况! kwj860213 一个是看看抗生素是否过期,重新制作培养基,另外琼脂糖凝胶里是否加了EB brucewu1986 还没谢谢各位呢 这里补上
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