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- 联迈生物
- LM0351P
- 中国/美国/欧洲
- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 保质期：
2年
- 供应商：
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件：
RT
- 规格：
瓶
| [产品编号] | LM0351P |
| [CAS号] | -- |
| [规格] | BR |
| [包装] | 250克 |
| [到货期] | 2-3天 |
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文献和实验感受态细胞的制备： 1， 把DH5菌种分别接种在含氨卞的LB平板和不含氨卞的LB平板上，培养16-18小时。结果在不含氨卞的LB平板上DH5菌长出单个菌落，而在含氨卞的LB平板上无可见菌落生成，证明DH5菌未被杂菌污染； 2， 挑取单个菌落接种于2ml不含氨卞的LB肉汤，37度，150rpm,，振荡培养过夜； 3， 取上述0.2ml菌液接种于30ml不含氨卞的LB肉汤，37度，150rpm,，振荡培养3小时，使其OD600=0.4; 4， 将上述培养物转入40ml离心管，冰浴10
Amp的选择性培养基上，倒置培养过夜，即可获得细菌菌落。 本实验是将人Bcl-2重组 质粒转化DH5α扩增菌，转化后在含Amp的培养基上进行筛选，生长的菌落即为含重组 质粒的工程菌。 含人Bcl-2重组质粒的DH5α菌用于质粒DNA的扩增，获得的质粒将作为限制性内切酶的酶切底物DNA。 【试剂与器材】 1.LB液体培养基 10g胰蛋白胨、5g酵母提取物、10gNaCl加水至1L，高压灭菌消毒。 2.LB固体
沉淀加入750μl预冷的（4℃）75mmol/L CaCL2 溶液，轻轻吹打菌悬液，放冰浴30min。 5．4℃3000rpm/min,离心5min，弃上清。 6．菌体沉淀加入200微升预冷的75mmol/LCaCL2溶液，冰浴4min以上。4℃保存备用。 （二）质粒转化 【材料】 1．pBR322 质粒DNA, 2．感受态菌75mmol CaCl2 3．LB肉汤培养基，无药LB琼脂平板，氨苄青霉素琼脂平板（50ug/ml） 4．
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