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- 2025年12月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
长期
- 英文名：
T4 RNA连接酶2
- 库存：
9999
- 供应商：
上海圻明生物
- 规格：
科研试剂
组分
组分名称 数量
T4 RNA Ligase2, truncated K227Q (200 U/μl) 20 μl/100 μl
10×T4 RNA Ligase Buffer 500 μl
50% PEG 8000 500 μl
应用
将预腺苷化的DNA或RNA序列连接到任何RNA的3’末端
将单链腺苷化引物连接至小RNA上，用于cDNA文库构建
将单链腺苷化引物连接至RNA上，用于链特异性cDNA文库构建
活性定义
200单位指在标准反应体系，25℃反应条件下，1h能将80%的31-merRNA连接到预腺苷化的17-merDNA末端所需的酶量。
储存
-20℃可保存3年。
使用注意事项
1. 1× T4 RNA Ligase Buffer：50mM Tris-HCl pH 7.5，10mM MgCl2，1mM DTT。该酶反应时不需要ATP。
2. 最jia反应温度37℃，65℃ 10min可使该酶失活。
3. 该酶的连接接头需要5’-预腺苷化，不能连接磷酸化底物。
4. 该酶不能连接双链DNA或RNA。
5. 加入终浓度5~10% PEG 8000可提高连接效率。
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文献和实验相关专题 重组DNA技术工具酶 T4 DNA Ligase即T4 DNA连接 酶，可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合，该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。
【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
因为看到园子中使用NEB T4 DNA连接酶的老师和同学比较多，也经常就一些连接的问题进行讨论和沟通。今天发一个关于NEB T4 DNA连接酶的一个专题，就使用过程中一些常见问题跟大家讨论一下。也希望各位老师同学能够踊跃参与，如果大家有什么疑问或者好的建议欢迎。 一、关于NEB M0202 T4 DNA 连接酶的使用方法和常见问题及解答 1、产品特性和使用方法 产品说明：该酶催化契合的双链DNA或RNA的5'-磷酸末端和3'-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平滑
使RNA的 3′－ OH末端与 5′ - 磷酸末端以磷酸二酯键而连结的酶。 EC 6． 5． 1． 3．是 J． Hurwitz等（ 1972）从感染 T4 噬菌体的大肠杆菌中提取的，与促进该噬菌体尾部纤维结合的基因 63的蛋白质为同一物质。作为其反应机理，首先是酶与 ATP形成酶 - AMP复合体，复合体的 AMP与 RNA的 5′ - 磷酸末端形成焦磷酸键，它与 RNA的 3′－ OH末端形成磷酸二酯键将 AMP游离出。一个 RNA链的 5′与 3′末端结合则生成一个环状分子。对基质
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