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- Merck
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- hz-292834
- 2025年07月07日
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- 详细信息
- 文献和实验
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- 保存条件：
常温，避光
- 保质期：
6个月
- 英文名：
T4 RNA Ligase
- 库存：
大量
- 供应商：
上海沪震
T4 RNA Ligase
BR
T4 RNA连接酶
产地 中国
所在目录 酶类
产品性质及属性
分子量 43.6kDa，单体
级别 BR
来源 含有T4噬菌体克隆基因63的大肠杆菌
浓度 10u/ul
活性定义 是指在37℃、30分钟内将1nmol 5'-[32P]-(A)12-18转化为磷酸酶抗性形式所需的酶量
酶活性分析混合物 50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 10uM 5'-[32P]-(A)12-18(10uM 5'-末端）
保存液组分 20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT，0.1mM EDTA，0.5mM ELUGENT变性剂和50%(v/v)甘油
10×反应缓冲液 500mM HEPES-NaOH(PH8.0，25℃), 100mM MgCL2, 100mM DTT
抑制剂 金属螯合剂、SH基团修饰试剂
失活 70℃加热10分钟
质量控制 测试表明无内切和外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染
备注 反应体系中ATP的浓度取决于连接反应的类型，推荐的BSA反应浓度是0.1mg/ml
T4 RNA连接酶性状 重组酶，催化ATP依赖的分子内和分子间磷酸二酯键连接（5'-磷酸基团和3'-羟基末端），底物分子为多聚核苷酸、寡核苷酸、ssRNA和ssDNA，分子之间的最小的连接底物是核苷3'，5'-二磷酸，而分子内连接的最小底物是8个碱基的寡核苷酸。配套提供反应缓冲液、ATP和BSA溶液。催化3'→5'磷酸二酯键的形成，使核苷酸的5'-磷酸末端和5'-羟基末端连接。作用底物包括单链RNA、DNA及二核苷焦磷酸。随酶提供10X 反应缓冲液
用途 生化研究。连接RNA和RNA ；RNA3'-末端标记胞嘧啶3'，5'-双[a-32P]磷酸； tRNA的特异性修饰；合成寡核苷酸的环化；寡聚脱氧核糖核苷酸与单链cDNA连接，用于5'RACE（快速扩增cDNA末端）分析
保存 -20°C
0247 无水肌酸/N-(氨基亚氨基甲基)-N-甲基甘氨酸/N-胺肉胺酸/α-甲胍乙酸/N-甲基胍基乙酸/Creatine BR，98%
A0251 N-乙酰-L-缬氨酸/L-2-乙酰氨基-3-甲基丁酸/N-乙酰基-L-穿心排草氨基酸/N-乙酰基-L-缬氨酸/N-Acetyl-L-Valine BR，98%
A0252 N-乙酰-DL-蛋氨酸/N-乙酰-DL-甲硫氨酸/N-乙酰基-DL-甲硫氨酸/N-乙酰蛋氨酸/N-乙酰-DL-甲硫氨基酸/乙酰-DL-甲硫氨基丁酸/N-Acetyl-DL-Methionine BR，99%
A0253 N-乙酰-DL-色氨酸/N-乙酰基-DL-色氨酸/DL-α-N-乙酰基-β-吲哚丙氨酸/N-Acetyl-DL-tryp tophane BR，98.5%
A0254 N-乙酰甘氨酸/N-乙酰氨基乙酸/N-乙酸基乙酰氨/N-Acetyl-glycine BR，99%
A0255 D-色氨酸甲酯盐酸盐/D-Tryptophan methyl ester hydrochloride BR，98%
A0258 L-半胱氨酸甲酯盐酸盐/L-盐酸半胱氨酸甲酯/L-半胱氨酸甲醇酯延酸盐/L-Cysteine methyl ester hydrochloride BR，99%
A0260 D-苯丙氨酸甲酯盐酸盐/D-Phenylalanine methyl ester hydrochloride BR，98%
A0261 L-丙氨酸甲酯盐酸盐/盐酸L-丙氨酸甲酯/丙氨酸甲脂盐酸盐/L-丙胺酸甲酯盐酸盐/L-Alanine methyl ester hydrochloride BR，98%
A0262 D-丙氨酸甲酯盐酸盐/盐酸D-丙氨酸甲酯/D-Alanine Methyl Ester Hydrochloride BR，98%
A0264 D-脯氨酸甲酯盐酸盐/右旋脯氨酸甲酯氢氯化物/D-脯氨酸甲酯氢氯化物/D-Proline methyl ester hydrochloride BR，98%
A0265 L-酪氨酸甲酯盐酸盐/盐酸L-酪氨酸甲酯/L-酪胺酸甲脂/L-Tyrosine methyl ester hydrochloride ACS，98%
A0266 D-酪氨酸甲酯盐酸盐/盐酸D-酪氨酸甲酯/D-Tyrosine Methyl ester hydrochloride ACS，98%
A0268 D-亮氨酸甲酯盐酸盐/D-Leucine methyl ester hydrochloride BR，99%
A0271 D-丝氨酸甲酯盐酸盐/D-Serine methyl ester hydrochloride BR，98%
A0273 D-缬氨酸甲酯盐酸盐/D-Valine methyl ester hydrochloride BR，98%
A0274 β-丙氨酸甲酯盐酸盐/3-氨基丙酸甲酯盐酸盐/β-Alanine methyl ester hydrochloride BR，98%
A0277 L-天冬氨酸二甲酯盐酸盐/L-天门冬氨酸二甲酯盐酸盐/L-Aspartic acid dimethyl ester hydrochloride BR，98%
A0278 D-天冬氨酸二甲酯盐酸盐/D-天门冬氨酸二甲酯盐酸盐/D-Aspartic acid dimethyl ester hydrochloride BR，98%
A0279 L-天冬氨酸-β-甲酯盐酸盐/β-甲酯-L-天冬氨酸盐酸盐/L-天门冬氨酸-β-甲酯盐酸盐/L-Aspartic acid β-methyl ester hydrochloride BR，98%
A0280 L-组氨酸甲酯/L-组氨酸甲酯二氫氯化物/L-Histidine methyl ester dihydrochloride BR，98%
A0281 DL-丙氨酸甲酯盐酸盐/DL-Alanine methyl ester hydrochloride BR，98%
A0282 DL-丝氨酸甲酯盐酸盐/DL-Serine methyl ester hydrochloride BR，98%
A0283 L-半胱氨酸乙酯盐酸盐/L-盐酸半胱氨酸乙酯/L-巯基丙氨酸乙酯盐酸盐/L-Cysteine ethyl ester hydrochloride BR，98%
A0286 L-酪氨酸乙酯/L-Tyrosine ethyl ester BR，98%
A0290 DL-丙氨酸乙酯盐酸盐/盐酸丙氨酸乙酯/DL-Alanine ethyl ester hydrochloride 特纯，99%
A0291 D-苯甘氨酸乙酯盐酸盐/(R)-α-氨基乙酯氢氯化物/D-(-)-α-苯甘氨酸乙酯盐酸盐/(R)-氨基乙酯盐酸盐/D-phenylglycine ethyl ester?HCl BR，98%
A0292 L-精氨酸甲酯/L-精氨酸甲酯盐酸盐/L-Arginine methyl ester dihydrochloride 特纯，98%
A0293 L-酪氨酸叔丁酯/L-Tyrosine tert-butyl ester 特纯，98%
A0296 N-乙酰-L-色氨酸/L-α-N-乙酰氨基-β-吲哚丙酸/L-α-N-乙酰胺基-β-吲哚丙酸/N-Acetyl-L-tryptophan BR，98%
A0298 N-乙酰-L-异亮氨酸/N-乙酰-L-异白氨酸/N-Acetyl-L-isoleucine BR，98%
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文献和实验相关专题 重组DNA技术工具酶 T4 DNA Ligase即T4 DNA连接 酶，可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合，该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。
【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
因为看到园子中使用NEB T4 DNA连接酶的老师和同学比较多，也经常就一些连接的问题进行讨论和沟通。今天发一个关于NEB T4 DNA连接酶的一个专题，就使用过程中一些常见问题跟大家讨论一下。也希望各位老师同学能够踊跃参与，如果大家有什么疑问或者好的建议欢迎。 一、关于NEB M0202 T4 DNA 连接酶的使用方法和常见问题及解答 1、产品特性和使用方法 产品说明：该酶催化契合的双链DNA或RNA的5'-磷酸末端和3'-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平滑
使RNA的 3′－ OH末端与 5′ - 磷酸末端以磷酸二酯键而连结的酶。 EC 6． 5． 1． 3．是 J． Hurwitz等（ 1972）从感染 T4 噬菌体的大肠杆菌中提取的，与促进该噬菌体尾部纤维结合的基因 63的蛋白质为同一物质。作为其反应机理，首先是酶与 ATP形成酶 - AMP复合体，复合体的 AMP与 RNA的 5′ - 磷酸末端形成焦磷酸键，它与 RNA的 3′－ OH末端形成磷酸二酯键将 AMP游离出。一个 RNA链的 5′与 3′末端结合则生成一个环状分子。对基质
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