相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
706
- 英文名:
Protease inhibitor cocktail for mammalian cell and tissue extracts
- 保质期:
12个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
阴凉干燥
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括蛋白酶抑制剂混合物(哺乳动物蛋白提取用) 北京现货促销在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:蛋白酶抑制剂混合物(哺乳动物蛋白提取用) 北京现货促销
规格:1ml|5×1ml
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
编号:RFT195
英文名:Protease inhibitor cocktail for mammalian cell and tissue extracts
蛋白酶抑制剂混合物(哺乳动物样品抽提用)是一种用于哺乳动物细胞或组织蛋白提取的蛋白酶抑制剂混合物(100mM AEBSF, 80μM Aprotinin,5mM Bestatin,1.5mM E64,2mM Leupeptin and1mM Pepstatin A in DMSO),并提供独立包装的0.5MEDTA。一个包装的本产品通常足够用于100ml裂解液的配制。
哺乳动物细胞或组织提取物中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶等,容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰,从而影响后续的蛋白检测。因此在提取物中添加适当的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂是防止蛋白降解和去修饰的有效方法。
本产品为经优化和测试的用于哺乳动物细胞或组织蛋白提取的蛋白酶抑制剂混合物,包含了广谱的丝*酸、半胱*酸和酸性蛋白酶抑制剂、以及*基肽酶抑制剂。
本产品使用便捷,通常以1:100的比例分别把蛋白酶抑制剂混合物和0.5MEDTA加入裂解液中,如用于检测金属蛋白酶活性,则不宜添加EDTA。
本产品可以有效抑制哺乳动物细胞或组织提取物中的各种蛋白酶活性,如丝*酸蛋白酶、*基肽酶、半胱*酸蛋白酶、苏*酸和天冬*酸蛋白酶、金属蛋白酶等。其中AEBSF是一种水溶性的丝*酸蛋白酶不可逆抑制剂,其抑制常数与PMSF和DFP的抑制常数相似,可以有效抑制胰蛋白酶(trypsin)、糜蛋白酶(chymotrypsin)、纤溶酶(plasmin)、激肽释放酶(kallikrein)和凝血酶(thrombin)等蛋白酶,作为PMSF和DFP的替代物,AEBSF的毒性更低、水溶性和水溶液稳定性更好。Aprotinin是丝*酸蛋白酶的竞争性可逆抑制剂;Bestatin是*基肽酶可逆抑制剂;E64是半胱*酸蛋白酶不可逆抑制剂;Leupeptin是丝*酸和半胱*酸蛋白酶可逆抑制剂;Pepstatin A是天冬*酸蛋白酶可逆抑制剂;EDTA作为螯合剂是金属蛋白酶的可逆抑制剂。
使用方法:
1、本蛋白酶抑制剂混合物为100×的储存液,使用时按照1:100的比例加入到裂解液中(例如,1ml裂解液中加入10μl蛋白酶抑制剂混合物),混匀后即可使用。根据需要,0.5M的EDTA也按照1:100的比例加入到裂解液中(如用于检测金属蛋白酶活性,则不宜添加EDTA)。含有蛋白酶抑制剂混合物的裂解液宜现用现配,不宜配制后冻存待后续使用。
2、待所需的抑制剂添加完毕混匀后,就可以开始进行哺乳动物组织的裂解和蛋白提取。
注意事项:
1、蛋白酶抑制剂混合物尽量避免反复冻融,第一次使用后,可按照每次使用量分装冻存。
2、待所需的抑制剂添加完毕混匀后,就可以开始进行常规细胞或组织的裂解和蛋白提取。
储存条件:-20℃,有效期12个月。
蛋白酶抑制剂混合物(哺乳动物蛋白提取用) 北京现货促销极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·利福平溶液(50mg/ml)
编号:RFT182
英文名称:Rifampicin Solution
规格:5×1ml
利福平对革兰氏阳性菌具有高抗性,如葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌等,单对于革兰氏阴性菌的抗性不强。
CAS号:13292-46-1
分子式:C43H58N4O12
分子量:822.94
储存条件:-20℃,有效期12个月
·5kb plus DNA ladder(100~5000bp)
编号:RFT016
英文名称:Rifampicin Solution
规格:100T(2×250μl)
本产品是由9条带状双链DNA条带组成的DNA Ladder,适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。含有1×loading buffer,可根据实验需要,直接取2-5μl电泳,使用方便,电泳图像清晰。8条带大小包括100,250,500,750,1000,1500,2000,3000,5000bp。其中750bp条带为100ng/5μl,显示加亮带,其余条带浓度为50ng/5μl。
使用方法:
1. 取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中就行电泳。
注:根据梳子的厚度和宽度进行上样。
每1mm×1mm(厚度×宽度)加样孔上样1μl;
窄齿梳子(一般为1mm×2mm)上样2μl;
宽齿梳子(一般为1mm×5mm)上样5μl;
如果使用厚齿梳子或宽于5mm的梳子,可以适当调整上样量。
2. 建议电泳条件:凝胶浓度为1.0-2.0%,凝胶长度5-7cm,电泳电压4-10v/cm,电泳时间25-30分钟。
3. 通过EB染色后紫外灯下观察条带。
注意事项:
1. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响,电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2. 请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳,以保证Marker良好的分离效果。
储存条件:-20℃,有效期1年。
蛋白酶抑制剂混合物(哺乳动物蛋白提取用) 北京现货促销关键词:RFT195,蛋白酶抑制剂混合物(哺乳动物蛋白提取用) ,Protease inhibitor cocktail for mammalian cell an
N-乙酰-L-异亮*酸 DL-5-HTP 3077-46-1
ARB11078 人非神经元性烯醇化酶(NNE)Elisa定量检测 Human non-neuronal enolase,nne ELISA KIT
硼*(代"酸")铵 6-MP 12007-58-8
BTN91204 动植物膜蛋白微量制备试剂盒 Animal-Plant Membrane Protein Miniprep Kit
ARB12076 大鼠内皮型一氧化*(代"氮")合成酶(eNOS)尿液中含量检测 Rat endothelial nitric oxide synthase,enos ELISA KIT
26177-56-6 D-Fructose 6-phosphate D-果糖-6-磷酸二*
Bouin"s脱*液 500ml
BTN90801 一站式TA克隆试剂盒 One-Stop AT Cloning Kit
辅酶Q10 Disodiu*(代"m") beta-glycerol phosphate pentahydrate 303-98-0
9001-75-6 Pepsin 1:3000 胃蛋白酶 1:3000
酸性磷酸酶(ACP)检测试剂盒(磷酸*二*比色法) 50T
ARB11591 人黄体生成素释放激素(LHRH)elisa检测操作说明书 Human luteinizing hormone-releasing hormone,lhrh ELISA KIT
蛋白酶抑制剂混合物(哺乳动物蛋白提取用) 北京现货促销关键词:RFT195,蛋白酶抑制剂混合物(哺乳动物蛋白提取用) ,Protease inhibitor cocktail for mammalian cell an
·Timentin溶液(100mg/ml)
编号:RFT186
英文名称:Timentin Solution
规格:5×1ml
·彩色预染超低分子量蛋白Marker(1.2~45kD)
编号:RFT043
英文名称:Rainbow pre dyeing ultra low molecular weight protein
规格:10T(50μl)
本蛋白Marker可以直接观察蛋白电泳及清晰判断Western Blotting的转膜效果。本产品包含3种多肽和3种低分子量蛋白质组成,分子量范围为1.2kD-45kD,分子量大小为 1.2kD,4.6kD,10kD,16kD,27kD,45kD (注:蛋白大小已在18%Tricine-SDS-PAGE中用非预染蛋白Marker标定过。
储存条件:-20℃。
·高纯度质粒提取试剂盒
编号:RFT028
英文名称:High purity Plasmid Extraction Kit
规格:100次|200次
本试剂盒采用经典的碱裂解法裂解细菌,再通过离心吸附柱在高盐状态下特异性地结合DNA的特性,可以从1–5ml大肠杆菌LB培养液中快速提取3–20μg纯净的高拷贝质粒DNA。提取的质粒可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接和转化等实验。然而,对质粒纯度要求更高的转染实验(要求无内毒素),此试剂盒不能达到要求。另外,尽管该试剂盒可以抽提较大的质粒(>10kb),但我们不推荐使用。如果一定要使用,请参考以下方法:加大菌体使用量(使用5–10 ml过夜培养物),同时按照比例增加P1、P2、P3的用量;洗脱缓冲液应在70℃预热,在吸附和洗脱时可以适当的延长时间,以增加提取效率,其它步骤相同。
本试剂盒使用了有颜裂解液,菌体裂解是否完全一目了然。由于判断菌体裂解和中和是否彻底更主要取决于操作者的经验,所以我们增加了有颜裂解液(一种能使裂解/中和体系变换颜色的试剂)来帮助观察裂解/中和的程度。加入P1后,有颜裂解液使菌液变为浑浊的红色;加入P2后,有颜裂解液立即使溶液变为澄清的红色,裂解是否完全只要观察红色溶液是否澄清,如果红色非常均一,表明裂解充分;在完全裂解的体系中加入P3混匀后,体系立即变为黄色,任何红色的残留表明没有完全混匀或者中和不彻底。
本试剂盒增加了去蛋白液PD,能更加彻底地去除蛋白污染,得到纯度更高的质粒。
试剂盒组份:
| 试剂盒组成 | 100次 | 200次 | 贮存方式 |
| RNase A | 300μl | 600μl | -20℃ |
| 有颜裂解液 | 600μl | 2×600μl | 室温 |
| 溶液P1 | 30 ml | 60 ml | 室温(加入RNase A后2-8℃保存) |
| 溶液P2 | 30 ml | 60 ml | 室温 |
| 溶液P3 | 40 ml | 80 ml | 室温 |
| 去蛋白液PD | 60 ml | 120 ml | 室温 |
| 漂洗液PW | 25 ml | 2×25 ml | 室温 |
| 洗脱缓冲液EB | 15 ml | 15 ml | 室温 |
| 质粒吸附柱CP | 100个 | 2×100个 | 室温 |
| 收集管(2 ml) | 100个 | 2×100个 | 室温 |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
储存条件:室温,有效期12个月。
我公司生产供应销*(代"售")的蛋白质研究产品正全系列现货促销,满分期待您的垂询选购蛋白酶抑制剂混合物(哺乳动物蛋白提取用) 北京现货促销。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验核蛋白提取 实验准备: 1 4℃离心机 2 根据标本数计算所需I,II,III,IV总体积,取出液体,并加入蛋白酶抑制剂,(III由加蛋白酶抑制剂I与加蛋白酶抑制剂II混合物) 实验操作: 1 收集细胞。10ml 对照细胞(1-2*105/ml )培养48h后,15ml 离心管收集,300g(1370 rpm)* 5min。弃上清,加1ml 1*PBS轻轻涡旋混匀后转移至1.5ml EP管。 2 4℃,300g * 5min,弃上清。 3 重悬
lxx071217 目前在提取蛋白时出现了些问题,希望能得到大家的帮助。 我用的是ripa裂解液,加了蛋白酶抑制剂,将贴壁细胞刮下来,冰上继续裂解,期间vortex几次,最后12,000gx10min ;此时分别取上清和沉淀加入loading buffer煮沸5min,上样做WB。发现上清和沉淀中均有目的条带。现想咨询:离心后的沉淀是什么成分?(细胞核?碎片?还是不溶性蛋白);如果是不溶性的蛋白加了loading buffer煮沸就可以电泳做WB了吗
2004-02-23 19:35 yxiangmind在资料区提到: 分离细胞膜蛋白的方法: 1 冰上刮下细胞后将细胞溶于有蛋白酶抑制剂的缓冲液A中,于室温与液氮罐中反复冻融2次。 2 5000转4度离心,驱除核及未裂解的细胞。 3 取上清12000转4度离心10分钟取沉淀溶于有蛋白酶抑制剂的缓冲液B中。 4 12000转4度离心10分钟取沉淀溶于有蛋白酶抑制剂的缓冲液C中提取后测蛋白浓度,SDS-PAGE电泳,分装后-20度保存备用。 buffer A : 1mMkcl
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









