2×ligation solution MasterMix怎

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北京百奥莱博专业生产供应2×ligation solution MasterMix怎么卖，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：2×ligation solution MasterMix怎么卖
产地：国产|进口
规格：150μl
品牌：百奥莱博
编号：RFT108
2×ligation solution MasterMix是含有T4 DNA Ligase，ligation buffer的2×MasterMix，实验时，只需加入片段和载体即可进行连接反应。适用于DNA片段和载体DNA的连接以及DNA片段和Linker或Adaptor DNA的连接。按照10μl连接体系计算，每次使用5μl，可以使用30次。

注意事项
1、2×ligation solution MasterMix由于含有T4 DNA ligase，使用前冰浴中彻底融化，混匀后使用。
2、为了提高转化效率，转化时建议所加入连接产物的量不要超过感受态细胞体积的10%。

使用方法：
一、DNA片段和载体DNA的连接
(1)粘性末端的连接
1．反应体系：

 

	10μl体系	终浓度
线性载体DNA	xμl	10-50 ng
插入DNA片段	yμl	插入片段：载体=1:1-5:1*
2×ligation solution MasterMix	5μl	1×
ddH2O	up to 10μl

注意：载体与插入片段的摩尔数比需要优化：一般vector:insert在1:1～1:5之间均可得到较好的结果。用以下公式计算片段摩尔数：pmol数= DNA量(ng)/(660×片段bp数)×1000。例如：插入片段2000bp，线性载体为3000bp，如果载体使用量为50ng(0.025pmol)，10μl连接体系中vector:insert的摩尔比是1:3，则需要2000bp pmol数为0.075pmol，插入片段2000bp的使用量为100ng。
2、彻底轻柔混匀后，瞬间离心，将管壁上的溶液收集到管底。
3、反应条件：16℃孵育30分钟。
4、可取5μl连接产物热击转化50μl感受态细胞或取1-2μl连接产物电击转化50μl感受态细胞。
注意：
a.若要提高电转实验效率，推荐65℃孵育10分钟或70℃孵育5分钟以灭活T4 DNA Ligase后，用DNA产物纯化试剂盒或*仿抽提对连接后的DNA片段进行纯化后进行电击转化。
b.若要提高转化子数目，可将连接时间延长至1小时。
(2)平末端的连接
1、反应体系：

	10μl体系	终浓度
线性平末端载体DNA*	xμl	10-50 ng
插入DNA片段	yμl	插入片段：载体=1:1-5:1**
2×ligation solution MasterMix	5μl	1×
ddH2O	up to 10μl

注意：
a.平滑末端的载体与 DNA 片段进行连接时，应首先将载体进行去磷酸化处理，以防止其自身环化。
b.载体与插入片段的摩尔数比需要优化：一般vector:insert在1:1~1:5之间均可得到较好的结果。用以下公式计算片段摩尔数：pmol数= DNA量(ng)/(660×片段bp数)×1000。例如：插入片段2000bp，线性载体为3000bp，如果载体使用量为50ng(0.025pmol)，10μl连接体系中vector:insert的摩尔比是1:3，则需要2000bp pmol数为0.075pmol，插入片段2000bp的使用量为100ng。
2、彻底轻柔混匀后，瞬间离心，将管壁上的溶液收集到管底。
3、反应条件：16℃孵育30分钟。
4、可取5μl连接产物热击转化50μl感受态细胞或取1-2μl连接产物电击转化50μl感受态细胞。
注意：
a.若要提高电转实验效率，推荐65℃孵育10分钟或70℃孵育5分钟以灭活T4 DNA Ligase后，用DNA产物纯化试剂盒或*仿抽提对连接后的DNA片段进行纯化后才能进行电击转化。
b.若要提高转化子数目，可将连接时间延长至1小时。

二、线性DNA的自身环化
1、反应体系：

	10μl体系	终浓度
线性载体DNA	xμl	10-50 ng
2×ligation solution MasterMix	5μl	1×
ddH2O	up to 10μl

2、彻底轻柔混匀后，瞬间离心，将管壁上的溶液收集到管底。
3、反应条件：16℃孵育30分钟。
4、可取5μl连接产物热击转化50μl感受态细胞或取1-2μl连接产物电击转化50μl感受态细胞。
注意：若要提高电转实验效率，推荐65℃孵育10分钟或70℃孵育5分钟灭活T4 DNA Ligase后，用DNA产物纯化试剂盒或*仿抽提对连接后的DNA片段进行纯化后才能进行电击转化。

三、接头连接
1、反应体系：

	10μl体系	终浓度
线性DNA	xμl	100-300 ng
磷酸化接头	yμl	0.5-1 μg
2×ligation solution MasterMix	5μl	1×
ddH2O	up to 10μl

2、彻底轻柔混匀后，瞬间离心，将管壁上的溶液收集到管底。
3、反应条件：16℃孵育30分钟。
4、65℃孵育10分钟或70℃孵育5分钟灭活T4 DNA Ligase。连接产物可以直接进行限制性内切酶酶切反应。

储存条件：-20℃

除2×ligation solution MasterMix怎么卖外，我公司正在打折促销以下产品：

·36KD蛋白Marker
编号：RFT040
规格：10mg
本产品包含一种已知分子量的标准蛋白质，分子量大小为36kD，可以用来判断 SDS-PAGE未知蛋白的分子量。本Marker以干粉状态提供。

使用方法：
1、配制10mg/ml 36kD蛋白Marker母液：取10mg 粉末溶于1ml超纯水中。此溶液-20℃贮存。
2、按照下表配制Marker溶液

配制量	浓度	36KD母液(10mg/ml)	超纯水	5×DualColor蛋白上样缓冲液
10μl	0.2 μg/μl	0.2μl	7.8μl	2μl
50μl	0.2 μg/μl	1μl	39μl	10μl
100μl	0.2 μg/μl	2μl	78μl	20μl

3、取配制好的溶液彻底混匀后，95℃处理5分钟立即上样电泳，每次上样10μl。
4、电泳结束后，染色，观察结果。

储存条件：-20℃。


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·DNA Marker II(100～1200bp)
编号：RFT019
规格：100T(2×250μl)
本产品是由6条带状双链DNA条带组成的DNA Marker，适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。含有1×loading buffer，可根据实验需要，直接取2-5μl电泳，使用方便，电泳图像清晰。6条带的大小和含量分别为100bp(50ng/5μl)，300bp(50ng/μl)，500bp(50ng/μl)，700bp(100ng/μl)，900bp(50ng/μl)，1200bp(50ng/μl)。该Marker适用于DNA片段大小的确定和对DNA含量的精确定量。



使用方法：
1. 取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中就行电泳。
注：根据电泳梳子的厚度和宽度确定上样量。每1mm×1mm(厚度×宽度)加样孔上样1μl；窄齿梳子(一般为1mm×2mm)上样2μl；宽齿梳子(一般为1mm×5mm)上样5μl。如果使用厚齿梳子或宽于5mm的梳子，可以适当调整上样量。
2. 建议电泳条件：凝胶浓度为1.5-2.0％，凝胶长度5-7cm，电泳电压4-10v/cm，电泳时间20-25分钟。
3. 通过EB染色后紫外灯下观察条带。

注意事项：
1. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响，电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2. 请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳，以保证Marker良好的分离效果。

储存条件：-20℃，有效期1年。

·通用型PCR试剂盒(含模版和引物)
编号：RFT164
规格：20次
本试剂盒包含完成PCR反应所需全部试剂，可进行PCR实验的教学和科研。其中模板为质粒DNA；引物为根据质粒DNA序列设计的上、下游引物；2×Taq PCR MasterMix包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应的增强剂和优化剂以及稳定剂。使用时，只需补加实验所需的引物和模板后即可进行PCR反应，可最大限度的减少人为误差，具有快速简便、稳定性好等优点。使用本试剂盒进行PCR反应后，PCR产物大小应为2000bp。

试剂盒组成：

组成	浓度	体积
模板	10 ng/μl	30μl
上游引物(2000 FW)	10μM	30μl
下游引物(2000 RV)	10μM	30μl
2×Taq PCR MasterMix(含染料)	-	2×500μl
去离子水	-	1 ml

操作步骤：
1、冰浴中彻底融化模板，引物和2×Taq PCR MasterMix，混匀后快甩离心将溶液收集到管底。
2、按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系：

	50μl反应体系
上游引物(2000FW) 10μM	1μl
下游引物(2000RV) 10μM	1μl
模板	1μl
2×Taq PCR MasterMix	25μl
水	22μl

3、快甩离心将反应液收集到管底。
4、PCR仪如果没有热盖加热的话，补加25μl矿物油。
5、PCR仪上执行以下程序：

步骤	温度	时间	循环数
初始变性	94℃	5 min	1
变性	94℃	30 sec	30
退火	54℃	30 sec
延伸	72℃	2 min
最后延伸	72℃	5 min	1

6、反应完成后，取5ml反应液，1％琼脂糖凝胶电泳，观察条带情况。

储存条件：-20℃，有效期一年。


2×ligation solution MasterMix怎么卖关键词：2×ligation solution MasterMix,百奥莱博,RFT108

9012-54-8 Cellulase  纤维素酶
核糖核酸(酵母) Menthol 63231-63-0
ARB12702 大鼠糖原合成酶激酶(GSK)含量检测 Rat glycogen synthase kinase,gsk ELISA KIT
ARB11492 人胱天蛋白酶激活的脱氧核糖核酸酶(CAD)酶免分析 Human caspase activated deoxyribonuclease,cad ELISA KIT
BL1188 0.5M EDTA(PH8.0)
PY02-406  DRBC培养基  250克  
草酸铵结晶紫染色液   100ml
ARB11825 人缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素(MIS/AMH)尿液中含量检测 Human mullerian inhibiting substance/anti-mullerian hormone,mis/amh ELISA KIT
Walpole乙酸缓冲液(0.2mol/L,pH2.696-6.518)   500ml
RN3301 PLANTpure 通用植物总RNA快速提取试剂盒
ARB13320 山羊促卵泡生成素(FSH)含量测试 
YPD/YEPD培养基粉剂   1L
碘海醇 N-Acetyl-DL-Alanine 66108-95-0
BTN111107 DNA电泳分子量标准(2) DNAMETER(2)

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