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1.高效,回收效率高达90%。
2.最大载量为5 μg,相当于最多只能能处理50 μL的PCR体系。
3.快速,整个过程只需要十余分钟,可同时处理多个样品,节省时间。
4.纯度高,本试剂盒回收的DNA可直接用于酶切、连接、PCR等多种分子生物学实验。
5.用途广,本试剂盒能回收单链、双链及环状DNA。
6.处理量大,每个离心吸附住最多可吸附的DNA量为5 μg。
7.价格便宜,比国内绝大多数同种产品的价格便宜。
8.储存方便,试剂盒可以在室温放置数月,不影响其质量。
使用及效果
在含DN**段的PCR反应产物中,加入3倍体积的专用上柱液,60℃水溶5分钟,转移溶液到离心吸附柱中,离心半分钟,加入700 μL通用洗柱液,离心半分钟。重复前一步操作一次。离心半分钟甩干剩余液体。将离心柱置于新的离心管中,加30-50 μL DNA洗脱液,离心半分钟,即得样品于离心管中。
图注:使用本试剂盒,纯化经PCR 反应扩增0.7 Kb的DNA片段。M 1为100-600 bp 的 100 bp DNA Ladder; M2为DL2000;Before和After分别表示纯化前和纯化后的0.7 Kb PCR扩增片段。电泳缓冲液为SuperBuffer-2, 电压为300 V,电泳时间为15分钟(实验编号:107173)。
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文献和实验; 2)出汁率:300~400 mL/kg; 3)推荐榨汁机:手摇式碾磨榨汁机; 4)果实质量参考:70 g 左右果实(不包括果皮),榨汁处理后得到 20~30 mL 原汁,按推荐试剂盒进行前处理后,浓缩 50 倍,最终可获得 400 μL 左右的植物囊泡。 5)处理: ① 薄皮果实洗净后,将果实切小块直接榨汁; ② 厚皮果实(如柠檬)的果皮出汁量较低且含有大量杂质,需要去皮后切小块再榨汁。 6)提取试剂盒推荐:宇玫博 UR5220 植物囊泡提取纯化试剂盒(多汁植物)。 2. 花/叶:如玫瑰、芦荟
说明都显示单片段插克隆效率> 95%——片段越多效率会下降的)。市售产品中,是否包含感受态细胞,是否包含质粒纯化试剂或者 PCR 纯化试剂,都会影响产品单价。 后继的筛选验证工作同经典方法一样——抗性筛选,挑克隆扩增纯化,电泳+酶切或者 PCR 验证,最后挑几个最有可能的克隆去测序验证。如今分子克隆中的 PCR 一般都会选择高保真酶——出错率比 Taq 低得多、扩增长片段效果更好,要是几十 kb 还得是 EX 加长版高保真酶——相比后继测序验证的费用,这钱万万省不得的。 总而言之,基于同源序列的无缝
糖凝胶上检测分析。如图一所示 图一:2.2 超声破碎后,8000g,30秒,4°C,离心。将上清移入新的管子中。开始准备进行染色质免疫共沉淀(IP)。2.3 每份超声样品取50ul,这时的样品标记为INPUT,用于定量DNA浓度和作为PCR的空白对照。超声后的染色质应立刻冻入液氮中或者储存于-70°C可储存2个月。避免多次反复冻融。3检测DNA浓度1INPUT样品用于为后来的IP样品计算DNA浓度。DNA可采用PCR纯化试剂盒(加入70ul洗脱液,接着进入3.2a)或者采用酚/氯仿抽提(加入350ul
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