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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
Blood DNALOCKER
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海雅吉生物科技有限公司
- 保存条件:
-20度保存
- 规格:
250 mL
非冻型血液DNA保存液本产品是上海雅吉基因独家推出的在室温条件下长期保存用于 DNA 提取的血液样品的保存液,它通过裂解细胞并高效抑制 DNase 的活性而达到长期保证 DNA 分子的完整性。
1. 保存时间长,可常温保存血液 DNA 长达六个月,尤其适合于野外血液样品采集。
2. DNA 完整性好,纯化后长度在 20-50 Kb 之间。
3. DNA 无化学修饰,提得的 DNA 可用于酶切、电泳、Southern 杂交和 PCR 等分子生物学实验。
4. 适用于各种动物血液(包括禽类血液)。
5. 安全可靠,本产品无毒无害。
6. 使用简单,直接把新鲜的血液样品与本产品混合即可。
非冻型血液DNA保存液规格及成分
成份 编号 100 mL 包装 250 mL 包装
本产品 60910 100 mL 250 mL
使用手册 60910sc 1 份 1 份
运输及保存 室温运输及保存,有效期两年。
自备试剂 无
非冻型血液DNA保存液使用方法 一: 哺乳动物血液(包括人血液)
1. 将抗凝血(1-10 mL)加入到适当容量的塑料离心管中。
2. 加入等体积的血液 DNALOCKER,充分振荡混合均匀。
3. 常温闭光保存直到使用。
4. 提取 DNA 时,可以取出部分液体,用自备的蛋白酶 K(终浓度为 0.1 mg/mL)37℃处理过夜,然后再用经典的酚/氯仿抽提+乙醇沉淀方法得到 DNA。
二: 禽类血液
1. 由于禽类血液有核细胞量远高于哺乳动物,血液的使用量很少,一般只有哺乳动物血液用量的 1/100 到 1/1000,所以需先用等体积的水将血液 DNALOCKER稀释,然后直接将禽类血液加入。其余操作同上。
使用效果
图注:1-4 分别表示用本产品在室温闭光保存了 1 月、2 月、3 月和4 个月的兔全血用天泽基因的血液
DNAOUT 提取的 DNA 的电泳图,DNA 溶解于 50 uL TE 中,其中10 uL 上样电泳。
疑难解答 Q:保存血液样品时温度越低越好吗?
A:不是。Tegelstrom 曾比较了分别在-70℃, -20℃, 4℃保存了 6 个月的蛙血,发现保存温度越低,血液 DNA 的断裂越严重(详见 Tegelstrom, 1989. Cold
room Storage of blood may be better than storage at -70℃. FingerprintNews, 4:5-6)。
导致核酸降解的常见非酶因素
原因 机制
非冻型血液DNA保存液溶液中残留重金属离子 磷酸二脂键的断裂长期存放/光照产生的自由基 磷酸二脂键的断裂UV 形成嘧叮二聚体DEPC 使 RNA 中没配对的腺嘌呤羧甲基化,但对双链核酸危害小高温和低 pH 脱嘌啉反应(depurination)EB 导致可见光对 DNA 的光氧化(photooxidation)酚 其氧化产物使磷酸二脂键断裂甲酰胺溶液 酸化后(pH 5)引起 RNA 降解醚 残留过氧化物使磷酸二脂键的断裂醇 残留重金属离子使磷酸二脂键的断裂4℃ 短期保存的最佳温度-20℃ 如果溶液中有盐,将使核酸产生大量断裂-70℃ 长期保存的最佳温度,但冷凝状态下自由
基的破坏更活跃
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文献和实验做了好多DNA提取保存,吃了很多亏给大家点建议吧:(有疑问可以回帖,有时间我会回答如果我知道)。 血液保存: EDTA抗凝最好,肝素也可以不过经常会影响后续试验,一般可以保存在-20和-80保存3-5年没有问题——保存时间越长似乎dna提取越少,再长时间我也没有试过,注意解冻一次大概损失20%左右(提取感觉估计得到的可能不准),放的时间长也会降解一些。4°做好不要太长3天我是试过没有问题再长不知道了。血凝块就算了吧太难了结果不稳定。如果要分离血浆请在把血冻起来之前,其实越早越好
【心得】关于全血的保存-DNA提取-pcr个人经验(经常在线回复)(血中rna提取在后边ps:5)(组织中提DNA ps6)
做了好多DNA提取保存,吃了很多亏给大家点建议吧:(有疑问可以回帖,有时间我会回答如果我知道) 血液保存:EDTA抗凝最好,肝素也可以不过经常会影响后续试验,一般可以保存在-20和-80保存3-5年没有问题——保存时间越长似乎dna提取越少,再长时间我也没有试过,注意解冻一次大概损失20%左右(提取感觉估计得到的可能不准),放的时间长也会降解一些。4°做好不要太长3天我是试过没有问题再长不知道了血凝块就算了吧太难了结果不稳定呵呵如果要分离血浆请在把血冻起来之前,其实越早越好否则有时候会溶血
眼球取血,如果血样有限在试验方案允许的前提下可以取多只小鼠血样混合)。 三、样本编号 样本标号: 组别及样本标号,要在管壁上标注清晰,特别注意6,9的区分,可以使用英文标注。切记提供我司样本清单。 WB、Q-PCR取样及运输注意事项 一、细胞收集及保存 1、贴壁细胞胰酶消化后900转5min离心至管底(非贴壁细胞直接离心),弃上清,将细胞冻存与-80度长期保存,-20度,暂时保存。若用于Q-PCR尽量使用灭菌无RNA酶离心管,trizon或RNA样本保存液中-80度
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