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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
24个月
- 英文名：
EZ-press Cell to cDNA Kit PLUS
- 库存：
300
- 供应商：
EZBioscience
- 规格：
20ul × 100 Rxns
一、试剂盒简介
EZ-press 细胞到cDNA一步法升级版试剂盒是简单快速从细胞到cDNA的一步法试剂盒，无需复杂的RNA提取步骤，试剂盒中含有gDNA Remover可有效去除基因组DNA，极大降低了基因组DNA的污染。具体过程是：根据细胞数，按照80 µl /10万细胞的量加Cell Lysis Buffer，吹吸10次，充分裂解细胞；立即吸出4 - 8 µl细胞裂解产物，加入0.8 µl gDNA Remover，室温反应5 min，即可去除基因组DNA。然后加入逆转录试剂，充分混匀后，只需42℃、15 min即可得到cDNA。
EZ-press 细胞到cDNA一步法升级版试剂盒提供了一种简单快速的方法，无需RNA分离即可从培养细胞中获得cDNA。本产品得到的cDNA可在-80°C储存长达3个月且Ct值无明显变化，可很好的替代TRIzol法进行基因表达定量分析。与TRIzol法相比，本产品具有简单快速、稳定性高和灵敏度强等特点，从培养细胞到cDNA最快仅需25 min，最低检测下限为1000个细胞。
二、产品组分
| Components | B0003(100 Rxns) |
| Cell Lysis Buffer | 22 ml |
| gDNA Remover | 100 µl |
| 4× RT Master Mix | 550 µl |
| ddH2O | 2 ml |
三、保存条件
本产品的所有组分建议置于-20°C保存。过期日期详见产品标签中有效期信息。
四、试剂盒特点
1. 简单快速：只有2步（细胞裂解、逆转录），仅需25分钟左右即可得到cDNA。
2. 基因组残留少：试剂盒中配有1管gDNA Remover试剂，室温处理5分钟，即可有效去除95%以上的残留基因组DNA。
3. 所需样品少：最低可提取5000个细胞的RNA（对于更少的细胞数建议用B0011这个试剂盒），一般细胞数是5000 ~ 50万个细胞。
4. 节约成本：试剂盒所需的细胞数较少，所以大大节省血清和药物等试剂。
5. 安全无毒：不使用氯仿、异丙醇、DEPC水等对身体有害的物质。
五、操作流程图示
代表性实验结果
由上图可见，EZ-press Cell to cDNA Kit PLUS II得到的cDNA的qPCR结果与TRIzol方法高度一致（线性相关系数R2=0.9973)。
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