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- NobleRyder
- P0817
- 北京
- 2025年12月17日
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北京诺博莱德科技有限公司
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| SDS-PAGE凝胶快速配制试剂盒 |
聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE)，其原理在于聚丙烯酰胺凝胶为网状结构，具有分子筛效应。它有两种形式：非变性聚丙烯酰胺凝胶及 SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)；非变性聚丙烯酰胺凝胶蛋白质能够保持完整状态，并依据蛋白质的分子量大小、蛋白质的形状及其所附带的电荷量而逐渐呈梯度分开，主要用于分离蛋白质和寡核苷酸。
NobleRyder SDS-PAGE 凝胶快速配制试剂盒把所需的缓冲液、SDS 等预混于下层胶缓冲液(4×)(用于配制分离胶)和上层胶缓冲液(4×)(用于配制浓缩胶)，分别含有Tris-HCl(pH8.8)、SDS 和Tris-HCl(pH6.8)、 SDS，30T一般可以配制30～40块，具体配制的量应根据器具大小决定。
产品组成：
| 编号 名称 |
P0817 30T |
Storage |
| 试剂(A): 30% Acr-Bis(29:1) | 100ml | 4℃避光 |
| 试剂(B): 下层胶缓冲液(4×) | 100ml | RT |
| 试剂(C): 上层胶缓冲液(4×) | 30ml | RT |
| 试剂(D): Ammonium Persulfate | 0.5g | RT |
| 试剂(E): TEMED | 1.5ml | 4℃避光 |
| 使用说明书 | 1份 | |
SDS-PAGE凝胶快速配制试剂盒操作步骤(仅供参考)：
1、 配制 10%过硫酸铵：直接在 0.5g Ammonium Persulfate 中加入 5ml 蒸馏水，充分溶解，分装成小份储存于-20℃或4℃。
2、 根据目的蛋白分子量大小选择合适的凝胶浓度，按照下面的表格配制 SDS-PAGE 的分离胶(下层胶)：
不同浓度的 SDS-PAGE 分离胶的最佳分离范围：
| SDS-PAGE 分离胶浓度 | 最佳分离范围 |
| 6%胶 | 50-150kD |
| 8%胶 | 30-90kD |
| 10%胶 | 20-80kD |
| 12%胶 | 12-60kD |
| 15%胶 | 10-40kD |
| 成分 | 配制不同体积 SDS-PAGE 分离胶所需各成分的体积(ml) | |||||||
| 6%胶 | 5 | 10 | 15 | 20 | 25 | 30 | 40 | 50 |
| 蒸馏水 | 2.6 | 5.3 | 7.9 | 10.6 | 13.2 | 15.9 | 21.2 | 26.5 |
| 30%Acr-Bis(29:1) | 1.0 | 2.0 | 3.0 | 4.0 | 5.0 | 6.0 | 8.0 | 10.0 |
| 下层胶缓冲液(4×) | 1.3 | 2.5 | 3.8 | 5.0 | 6.3 | 7.5 | 10 | 12.5 |
| 10%过硫酸铵 | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 | 0.25 | 0.3 | 0.4 | 0.5 |
| TEMED | 0.004 | 0.008 | 0.012 | 0.016 | 0.02 | 0.024 | 0.032 | 0.04 |
| 成分 | 配制不同体积 SDS-PAGE 分离胶所需各成分的体积(ml) | |||||||
| 8%胶 | 5 | 10 | 15 | 20 | 25 | 30 | 40 | 50 |
| 蒸馏水 | 2.3 | 4.6 | 6.9 | 9.3 | 11.5 | 13.9 | 18.5 | 23.2 |
| 30%Acr-Bis(29:1) | 1.3 | 2.7 | 4.0 | 5.3 | 6.7 | 8.0 | 10.7 | 13.3 |
| 下层胶缓冲液(4×) | 1.3 | 2.5 | 3.8 | 5.0 | 6.3 | 7.5 | 10 | 12.5 |
| 10%过硫酸铵 | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 | 0.25 | 0.3 | 0.4 | 0.5 |
| TEMED | 0.003 | 0.006 | 0.009 | 0.012 | 0.015 | 0.018 | 0.024 | 0.03 |
| 成分 | 配制不同体积 SDS-PAGE 分离胶所需各成分的体积(ml) | |||||||
| 10%胶 | 5 | 10 | 15 | 20 | 25 | 30 | 40 | 50 |
| 蒸馏水 | 1.9 | 4.0 | 5.9 | 7.9 | 9.9 | 11.9 | 15.9 | 19.8 |
| 30%Acr-Bis(29:1) | 1.7 | 3.3 | 5.0 | 6.7 | 8.3 | 10 | 13.3 | 16.7 |
| 下层胶缓冲液(4×) | 1.3 | 2.5 | 3.8 | 5.0 | 6.3 | 7.5 | 10 | 12.5 |
| 10%过硫酸铵 | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 | 0.25 | 0.3 | 0.4 | 0.5 |
| TEMED | 0.002 | 0.004 | 0.006 | 0.008 | 0.01 | 0.012 | 0.016 | 0.02 |
| 成分 | 配制不同体积 SDS-PAGE 分离胶所需各成分的体积(ml) | |||||||
| 12%胶 | 5 | 10 | 15 | 20 | 25 | 30 | 40 | 50 |
| 蒸馏水 | 1.7 | 3.3 | 4.9 | 6.6 | 8.2 | 9.9 | 13.2 | 16.5 |
| 30%Acr-Bis(29:1) | 2.0 | 4.0 | 6.0 | 8.0 | 10.0 | 12.0 | 16.0 | 20.0 |
| 下层胶缓冲液(4×) | 1.3 | 2.5 | 3.8 | 5.0 | 6.3 | 7.5 | 10 | 12.5 |
| 10%过硫酸铵 | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 | 0.25 | 0.3 | 0.4 | 0.5 |
| TEMED | 0.002 | 0.004 | 0.006 | 0.008 | 0.01 | 0.012 | 0.016 | 0.02 |
| 成分 | 配制不同体积 SDS-PAGE 分离胶所需各成分的体积(ml) | |||||||
| 15%胶 | 5 | 10 | 15 | 20 | 25 | 30 | 40 | 50 |
| 蒸馏水 | 1.1 | 2.3 | 3.4 | 4.6 | 5.7 | 6.9 | 9.2 | 11.5 |
| 30%Acr-Bis(29:1) | 2.5 | 5 | 7.5 | 10 | 12.5 | 15.0 | 20.0 | 25.0 |
| 下层胶缓冲液(4×) | 1.3 | 2.5 | 3.8 | 5.0 | 6.3 | 7.5 | 10 | 12.5 |
| 10%过硫酸铵 | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 | 0.25 | 0.3 | 0.4 | 0.5 |
| TEMED | 0.002 | 0.004 | 0.006 | 0.008 | 0.01 | 0.012 | 0.016 | 0.02 |
| 成分 | 配制不同体积 SDS-PAGE 浓缩胶所需各成分的体积(ml) | |||||
| 5%胶 | 2 | 3 | 4 | 6 | 8 | 10 |
| 蒸馏水 | 1.17 | 1.75 | 2.33 | 3.5 | 4.7 | 5.8 |
| 30%Acr -Bis(29:1) | 0.33 | 0.5 | 0.67 | 1.0 | 1.3 | 1.7 |
| 上层胶缓冲液(4×) | 0.5 | 0.75 | 1.0 | 1.5 | 2.0 | 2.5 |
| 10%过硫酸铵 | 0.02 | 0.03 | 0.04 | 0.06 | 0.08 | 0.1 |
| TEMED | 0.002 | 0.003 | 0.004 | 0.006 | 0.008 | 0.01 |
注意事项：
1、 过硫酸铵配制成 10%溶液后应当-20℃保存。应尽量减少室温存放时间以防失效。有效避免失效的方法是分成小份， -20℃保存，用 2~3 次，剩余的弃用，亦可 4℃保存几天。
2、 TEMED 易挥发，使用后请盖紧瓶盖。另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切，可通过适当调节 TEMED 的用量，控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度。
3、 配制聚丙烯凝胶的过程中，如果室温较低，可以置于 37℃放置，加速凝固。
4、 30%Acr-Bis(29:1)有轻微神经毒性，请小心操作。
5、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
SDS-PAGE凝胶快速配制试剂盒有效期：6个月有效。
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