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354
- 英文名:
AP1-luc Reporter gene plasmid
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
AP1荧光素酶报告基因质粒(国产,进口)的品牌:百奥莱博,是优质的克隆与表达产品,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多AP1荧光素酶报告基因质粒等克隆与表达产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:AP1荧光素酶报告基因质粒(国产,进口)
英文名:AP1-luc Reporter gene plasmid
规格:1μg
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
AP1荧光素酶报告基因质粒是用于检测AP1转录活性水平的报告基因质粒。本质粒是以pGL6质粒为模板,在其多克隆位点插入了多个AP1结合位点,可以高灵敏度地检测AP1的激活水平。
pGL6质粒模板是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
AP1荧光素酶报告基因质粒的主要信息如下:
| Base pairs | 6097bp |
| Feature Nucleotide | Position |
| PGK promoter | 20-538 |
| luc2 reporter gene | 549-2202 |
| Multiple cloning region | 2208-2261 |
| SV40 late poly(A) sinal | 2268-2512 |
| SV40 early enhancer/promoter | 2554-2972 |
| Synthetic neomycin phosphotransferase(Neor)coding region | 2998-3792 |
| Synthetic poly(A) signal | 3817-3865 |
| Synthetic Beta-lactamase(Ampr) coding region | 4980-5840 |
| Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site | 5945-6097 |
AP1荧光素酶报告基因质粒的图谱如下:
使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT271)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT273)。
3. TNF-α、PMA等常见的可以激活AP1的试剂,可以用作本质粒报告基因检测时的阳性对照。
储存条件:-20℃。
AP1荧光素酶报告基因质粒(国产,进口)极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒
编号:YT157
英文名称:CFDA SE Cell Proliferation Assay and Tracking Kit
规格:2000次
本试剂盒是基于一种新型荧光探针CFDA SE的用于细胞增殖检测和细胞荧光示踪的检测试剂盒。CFDA SE目前被广泛用于替代MTT法或[3H]-thymidine掺入等其它细胞增殖检测方法。基于CFDA SE荧光标记的细胞增殖检测和[3H]-thymidine掺入、BrdU标记获得的检测结果完全一致,但同时可以提供更多的细胞增殖信息。使用CFDA SE检测可以提供整个细胞群中有多少比例的细胞分裂了1次、2次或更多次数,同时如果和其它荧光探针联用,可以获取不同分裂次数细胞的其它相关信息。
CFDA-SE的全称为Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester,分子式为C29H19NO11,分子量为557.47,CAS number为150347-59-4。CFDA SE可以通透细胞膜,进入细胞后可以被细胞内的酯酶(esterase)催化分解成CFSE,CFSE可以偶发性地(spontaneously)并不可逆地和细胞内蛋白的Lysine残基或其它*基发生结合反应,并标记这些蛋白。在加入荧光探针CFDA SE后大约24小时,即可充分标记细胞。被CFDA SE标记的非分裂细胞的荧光非常稳定,稳定标记的时间可达数个月。CFDA SE标记细胞的荧光非常均一,比以前使用的其它细胞示踪荧光探针例如PKH26的荧光更加均一,并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均匀。
由于CFDA SE标记细胞的荧光非常均匀和稳定,每分裂一次子代细胞的荧光会减弱一半,这样通过流式细胞仪检测就可以检测出没有分裂的细胞,分裂一次的细胞(1/2的荧光强度),分离两次的细胞(1/4的荧光强度),分裂三次的细胞(1/8的荧光强度)以及类似的其它分裂次数的细胞。采用CFDA SE通过流式细胞仪检测获得的检测结果参考右图。每一个峰代表一种分裂次数的细胞,从右至左的峰通常依次为分裂0次、1次、2次、3次等次数的细胞。分裂次数较多后,分裂0次或1次等没有分裂或分裂次数较少的细胞会逐渐减少直至检测不到。
使用CFDA SE可以检测分裂多达8次或更多次数的细胞增殖。目前CFDA SE标记细胞后通常用流式细胞仪进行细胞增殖检测。最常用于淋巴细胞的增殖检测,也可以用于成纤维细胞、NK细胞等其它细胞的增殖检测,甚至还可以用于细菌增殖的检测。
CFDA SE标记细胞呈绿色荧光,检测时的激发波长可以选择488nm,此时的发射波长为518nm,使用流式细胞仪检测时可以采用FL1 detection channel。CFDA SE标记的细胞也可以用荧光显微镜进行观察。CFDA SE标记的细胞无论在体外还是体内都不会使邻近细胞染色。即CFDA SE荧光探针完成标记后不会从一个细胞转移到邻近细胞。CFDA SE标记细胞仅需5-15分钟即可完成。对于不同细胞,最佳标记时间需自行摸索。
本试剂盒提供了配制CFDA SE所需的溶液以及CFDA SE进行细胞标记时所需的配套试剂。如果每个检测样品的荧光探针标记体积为1ml,本试剂盒共可以检测2000个样品。
试剂盒组份:
CFDA SE——————————————1管
CFDA SE溶剂————————————1ml/管,共两管
CFDA SE细胞标记液(10X) ——————100ml/瓶,共两瓶
注意事项:
1. CFDA SE配制成储存液后宜在一个月内使用完毕,最长不宜超过2个月。CFDA SE易被水解,在水溶液中会很快变质。请在使用过程中避免接触水。在标记细胞的过程中和水接触是在许可的范围内的。
2. CFDA SE溶剂在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
3. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
储存条件:-20℃,有效期6个月。
AP1荧光素酶报告基因质粒(国产,进口)关键词:AP1荧光素酶报告基因质粒,YT445,AP1-luc Reporter gene plasmid
BTN70104 核酸印迹膜染液 Nucleic Acid Membrane Stain
十二烯基丁二酸酐 D-a-Aminoadipic acid 25377-73-5
ARB13661 兔心肌肌*蛋白I(cTn-I)免费代测 Rabbit cardiac troponin i,ctn-iELISA KIT
ARB12673 大鼠雌激素(E)检测服务 Rat estrogen,e ELISA KIT
ARB10764 人抗IgE受体抗体ELISA代测服务 Human anti-ige receptor antibody ELISA KIT
ARB11816 人膜联蛋白V Elisa分析 Human annexin-Ⅴ ELISA KIT
ARB11750 人嗜酸性白血球相关之RNA水解酵素家族成员3(EAR3)尿液中含量检测 Human eosinophIL-associated ribonuclease a family member 3,ear3 ELISA KIT
SSPE缓冲粉剂(20×) 1L
乙*(代"烯")利 C12E8 16672-87-0
27025-41-8 L-谷胱甘肽(氧化型)/氧化型谷胱甘肽
60-18-4 L-Tyrosine L-酪*酸
CYB161068 人血清IgM(液体)70~80%纯度,4mg/ml浓度
AP1荧光素酶报告基因质粒(国产,进口)关键词:AP1荧光素酶报告基因质粒,YT445,AP1-luc Reporter gene plasmid
·酵母质粒小量抽提试剂盒
编号:YT004
英文名称:Yeast Plasmid Mini Preparation Kit
规格:50次
本试剂盒是一种使用破壁酶消化去除酵母细胞壁,然后采用一种新型的酵母质粒纯化柱实现从酵母细胞中进行小量质粒快速抽提的试剂盒。无需酚*仿抽提,无需酒精沉淀,12个样品只需约1-1.5小时即可完成。
本试剂盒提供了破壁酶,酵母收集后,加入Lyticase消化去除细胞壁,接着采用传统碱裂法裂解细胞,然后将获得的上清液转移至结合柱结合DNA,经过离心快速洗涤,最后用洗脱液洗脱出酵母质粒DNA。由于采用了高浓度的破壁酶,无需再使用玻璃珠,可以避免因为玻璃珠的机械作用带来的酵母基因组DNA污染。
每个质粒纯化柱可以结合的质粒量的上限约为20微克。质粒DNA的产量依赖于酵母携带质粒的拷贝数,酵母菌株以及生长条件。通常酵母质粒的拷贝数较低,1.5-5ml培养过夜的酵母抽提获得的质粒DNA量约为1-3微克左右。高拷贝酵母质粒抽提时的得率会大大提高。抽提所得质粒的量与酵母培养浓度、质粒拷贝数、酵母品系等因素有关。
使用本试剂盒抽提得到的酵母质粒DNA可用于各种常规分子生物学实验,如转化、PCR、基于PCR的突变、体外转录、酶切、测序、文库筛选等。
产品组份:
酶解缓冲液——————————————10ml
溶液Ⅰ(悬浮液)————————————15ml
溶液Ⅱ(裂解液)————————————15ml
溶液Ⅲ (结合液)————————————20ml
溶液Ⅳ (洗涤液)————————————18ml (第一次使用前每瓶加入27ml无水乙醇)
溶液Ⅴ (洗脱液)————————————3ml
RNase A (100mg/ml)——————————15μl
Lyticase———————————————1管
Lyticase配制液————————————1.2ml
小抽质粒纯化柱及废液收集管——————50套
注意事项:
1)第一次使用前把试剂盒提供的RNase A全部加到溶液Ⅰ(悬浮液)中,混匀,并在瓶上做好标记。加入RNase A后4℃存放。
2)第一次使用前在每瓶溶液Ⅳ(洗涤液)中加入27ml无水乙醇,混匀,并在瓶上做好标记。
3)第一次使用前吸取1ml Lyticase配制液到Lyticase粉末中,完全溶解后即为Lyticas溶液。配制好的Lyticase溶液4℃可以保存1个月,-20℃可以保存6个月。如需-20℃保存,最好能适当分装。Lyticase溶液配制后或冻存后再溶解可能会出现轻微混浊,属正常现象,请混匀后使用。
4)温度较低时,溶液Ⅱ和溶液Ⅲ可能会有沉淀产生。使用前必须检查一遍。如有沉淀,37℃水浴加热溶解,混匀后使用。溶液Ⅱ请勿过分剧烈混匀,否则会产生大量气泡。
5)溶液Ⅱ使用完后,一定要盖紧瓶盖,防止被空气中二氧化碳酸化。
6)溶液II有强碱性,溶液Ⅱ、溶液Ⅲ和Lyticase对人体都有刺激性,操作时请小心,并注意适当防护。
7)本试剂盒所有操作均在室温进行,操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。
8)废液收集管在一次抽提中需多次使用,切勿中途丢弃。
9)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:室温,有效期一年。(其中,Lyticase需-20℃保存)
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购AP1荧光素酶报告基因质粒(国产,进口)。
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文献和实验【求助】用于检测双荧光素酶报告基因的细胞究竟是应该同时转染两种质粒呢还是只需一个质粒上面同时含两种荧光素酶报告基因?谢谢
lsdcfhyj 向大家请教关于双荧光素酶报告基因检测系统与单荧光素酶报告基因检测系统的问题,两者的区别我基本清楚了,只是我没弄清楚用于检测的细胞究竟是应该同时转染两种质粒(分别含虫荧光素酶报告基因和海肾荧光素酶报告基因)呢还是只需一个质粒上面同时含两种荧光素酶报告基因?还有一个问题是如果是要转染两种质粒的话,是只需在含虫荧光素酶基因质粒中插入所要检测的调控元件基因,还是两种质粒中的荧光素酶基因前都要插入调控元件?谢谢 msniu
xiongran 急求ISRE报告基因质粒,干扰素信号通路的报告基因,愿拿其它质粒作为交换! shuyangsy1986 大哥,现在你弄到ISRE的报告基因的质粒没有啊,还有β-干扰素的啊,我也需要啊,先谢了啊 xiongran 几百年前的事情了,没有求到,我都不做这个了 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴
longgyin8341 我想研究细胞在氧化应激损伤过程中核受体NFkB对于下游一些目的基因(如ICAM-1等)转录调控的影响,是不是需要把NFkB在基因组上的特异性结合元件克隆出来,与虫荧光素酶报告基因质粒构建重组质粒,然后转染细胞? 若是如此:NFkb由于可以调控多种下游基因的表达,它在基因组上每个调控基因的结合序列都是特异的吗?或者说这段序列是固定的吗?如何在网上找呢?谢谢 longgyin8341
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