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734
- 英文名:
pGL6-TA Reporter gene plasmid
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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")pGL6-TA报告基因质粒价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:pGL6-TA报告基因质粒价格
产地:国产|进口
英文名:pGL6-TA Reporter gene plasmid
品牌:百奥莱博
编号:YT443
pGL6-TA报告基因质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
pGL6-TA主要用于在其多克隆位点插入特定的启动子、增强子等调控元件研究该调控序列的基因转录调控活性。pGL6-TA和pGL6相比在多克隆位点和luc基因之间加入了一段minimal TA promoter,使luc基因的基础转录水平提高。
pGL6-TA质粒的主要信息如下:
| Base pairs | 5629 |
| Multiple cloning region | 1-59 |
| Minimal TA promoter (pTA) | 66-88 |
| luc2 reporter gene | 120-1782 |
| SV40 late poly(A) signal | 1817-2038 |
| SV40 early enhancer/promoter | 2086-2504 |
| Synthetic neomycin phosphotransferase(Neor)coding region | 2529-3323 |
| Synthetic poly(A) signal | 3348-3396 |
| Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region | 3463-3482 |
| ColE1-derived plasmid replication origin | 3720 |
| Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region | 4511-5371 |
| Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site | 5476-5629 |
| Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region | 5578-5597 |
pGL6-TA质粒的图谱如下:
使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 用于插入调控序列:在多克隆位点选取适当的酶切位点,经酶切处理后连入适当的基因转录调控序列。pGL6-TA也可以用作报告基因检测时的阴性对照。
3. pGL6-TA质粒以及以此质粒为模板构建的质粒可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT271)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT273)。
储存条件:-20℃。
关于pGL6-TA报告基因质粒价格的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·红色核酸染料(DNA染料)(RNA染料)
编号:YT015
英文名称:Nucleic Acid Red(2000X)
规格:1ml|5ml
本品是一种优于*化乙锭(EB)的核酸染料,用于凝胶中DNA、RNA等核酸的染色,可替代升级SYBR Green。本核酸红染料具有安全(致突变性极低且检测不到显著的细胞毒性)、灵敏度高、稳定性好等优点,凝胶中的核酸在使用本产品染色后用适当紫外灯(300nm左右波长)检测呈现红色荧光,适用于原先使用EB为染料的凝胶成像系统。
本核酸红染料比EB和SYBR Green更安全。本核酸红染料在远高于其工作浓度范围时均没有细胞毒性及诱变性。艾姆斯氏试验(Ames test)结果表明,本核酸红染料的诱变性远小于EB。EB在多种致突变测试中呈现很强的诱变性,而本核酸红染料仅仅在浓度高达20微克/毫升时,并在S9代谢活化时有非常微弱的诱变性。通常本核酸红染料在凝胶中的工作浓度约为2微克/毫升,大大低于可导致诱变的浓度。本核酸红染料和百奥莱博的另外一种安全型核酸染料核酸绿色染料(YT016),由于它们特殊的化学结构使其难以进入细胞,从而大大降低甚至避免了染料的致突变性和细胞毒性。而SYBR Green染料可以穿透细胞膜,进入活细胞并染色DNA,并且有报道SYBR Green可以强烈增强紫外线诱导的基因突变。
本核酸红染料检测灵敏度高,对于小分子量核酸的染色效果好。本核酸红染料的检测灵敏度比EB高8-10倍,在检测低浓度、微量DNA或RNA方面比EB更佳,尤其对小分子量的DNA检测非常灵敏。在使用浸泡染色法时,本核酸红染料和SYBR Gold的灵敏度相近甚至更高;与SYBR Gold不同的是,本核酸红染料预先配制在凝胶中也有很高的灵敏度。EB对于小分子量核酸的染色效果差,而本核酸红染料对于小分子量核酸的染色效果很好,便于观察酶切或PCR获得的小分子量核酸片段。推荐使用的本核酸红染料浓度,其检测效果略优于EB。如果希望获得更高的染色灵敏度,可以适当提高本核酸红染料的工作浓度。
本核酸红染料的稳定性好,染色重复性高。含SYBR Green的凝胶核酸染色的重复性比较差,这通常是由于SYBR系列染料的稳定性差导致的。而本核酸红染料的稳定性很好,可以室温长时间保存及使用微波炉加热。本核酸红染料的光稳定性良好,可以在室内正常光线下操作而无需避光。由于其热稳定性和光稳定性,含本核酸红染料的凝胶在核酸染色时的重复性非常好。
本核酸红染料可以使用和EB相同的检测体系。本核酸红染料和EB的激发光和发射光都非常接近,可以直接用本核酸红染料替换EB,而不必更换已有的凝胶观察、拍照或成像系统(约300nm激发)。本核酸红染料的激发光谱和发射光谱请参考下图。
本品核酸红染料的激发光谱和发射光谱
本品可以按适当比例直接加入琼脂糖中配制成凝胶,也可以在电泳完毕后对凝胶进行染色。前者更加方便,而后者灵敏度要更高一些。但由于本品本身已经非常灵敏,通常采用把本品直接配制在凝胶中就可以了。对于一些特殊情况,如核酸样品量特别少的情况等,则可以考虑电泳后再对凝胶进行染色。
本品对于核酸的迁移率影响非常小,小于SYBR Green对于核酸迁移率的影响。通过凝胶回收试剂盒(YT010)或酚*仿抽提,可以有效去除与DNA或RNA结合的红色染料,从而确保不会影响后续的连接、酶切、PCR、测序等常规的分子生物学用途。
储存条件:室温,避光,有效期一年。
注意事项:
1.本产品兼容常用的电泳缓冲液,例如TAE和TBE。
2.本品和EB一样,作为荧光染料均需避光保存,但在使用过程中的常规室内光照不会影响其使用效果。
3.制备好的本品琼脂糖凝胶,在4℃避光条件下通常可以保存3-5天。
4.本品琼脂糖凝胶再次熔化使用时,为取得更好的观察效果,需要添加适量本品。
5.电泳之后的凝胶不建议重复使用。
6.电泳后再使用本品染色的凝胶一般不需要脱色。如果发现背景太高,可以使用不含核酸酶的水进行脱色处理。
7.本品和核酸绿色染料(YT016)除了可以染色双链DNA外,也可染色单链DNA和RNA。本品对单链核酸的染色灵敏度约为对双链DNA染色灵敏度的一半。本品对单链核酸的染色灵敏度约为YT016的5倍。
8.如果使用聚丙*(代"烯")酰胺凝胶,请使用浸泡染色法染胶,并延长染色时间至30分钟-1小时。
9.如果观察到条带弥散或者分离不理想,建议使用浸泡染色法染色以确认是否与染料有关。如果浸泡染色法染色后仍然出现类似的问题,说明与染料无关,请尝试以下方法:使用新鲜配制的电泳缓冲液、降低核酸的上样量、降低染料的浓度、降低琼脂糖浓度、选用更长的凝胶、降低电泳电压一倍以上并延长凝胶电泳时间以改善电泳效果、使用更薄的梳齿等。
pGL6-TA报告基因质粒价格关键词:pGL6-TA Reporter gene plasmid,YT443,pGL6-TA报告基因质粒
·哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒
编号:YT012
英文名称:Mammalian genomic DNA extraction kit
规格:50次
本试剂盒采用了经典的蛋白酶K处理法,可以抽提到100-150kb以上的基因组DNA。用本试剂盒抽提到的基因组DNA适用于Southern杂交、基因组DNA的PCR扩增及基因组DNA文库的构建等。
通常使用本试剂盒,从20毫克组织可以抽提到约40微克基因组DNA,从106-107Hela细胞可以抽提到约5-50微克基因组DNA。本试剂盒足够抽提50个常规量的样品。
产品组份:
样品裂解液————30ml
蛋白酶K————130μl
10M 醋酸铵————6ml
Nuclease Free Water————6ml
储存条件:-20℃,有效期一年。
注意事项:
1.需自备Tris平衡*酚、*仿和无水乙醇。
2.如果打算抽提到大片段的基因组DNA,则要尽量避免基因组DNA的物理性剪切。例如避免剧烈振荡含有基因组DNA的样品,可以用剪掉枪头尖的枪头吸取含有基因组DNA的样品。
3.不可过分干燥基因组DNA沉淀,否则会极难溶解。
·AMCA标记山羊抗兔IgG(H+L)
编号:YT855
英文名称:AMCA-labeled Goat Anti-Rabbit IgG (H+L)
规格:0.2ml
本AMCA标记山羊抗兔IgG用于免疫荧光染色。
AMCA(7-Amino-4-methylcoumarin-3-acetic acid-NHS ester)是一种常用的非常明亮的蓝色荧光探针。AMCA的荧光光谱与DAPI和Hoechst比较接近。AMCA的吸收(激发)和发射峰如下。
Absorption Peak:350nm
Emission Peak:450nm
本抗体为用纯化的兔IgG免疫山羊,然后用亲和纯化柱对获得的抗血清进行纯化,并经过人IgG、小鼠IgG和大鼠IgG吸附纯化的优质二抗。对人IgG、小鼠IgG和大鼠IgG几乎没有结合能力。特别适合于对于二抗种属特异性要求比较高的荧光染色实验。
本AMCA标记山羊抗兔IgG(H+L)用于免疫荧光染色时的推荐稀释比例为1:250。实际实验操作过程中需根据抗原和抗体的具体情况适当调节荧光标记二抗的稀释比例,推荐的调节范围为1:50-500。
本抗体如果用于常规的免疫染色,以每次检测需1毫升1:250稀释的荧光标记二抗计,至少可以检测50次。如果适当重复使用已经使用过的荧光标记二抗,至少可以多检测150-250次。
储存条件:-20℃,有效期一年。
pGL6-TA报告基因质粒价格关键词:pGL6-TA Reporter gene plasmid,YT443,pGL6-TA报告基因质粒
ARB13406 芜菁花叶病毒(TuMV)血清中含量检测
乙酰胆碱酯酶染色液(铅铜硫胆碱法) 3×20ml|3×50ml
ARB12860 小鼠心肌肌*蛋白I(cTn-I)含量分析 Mouse cardiac troponin i,ctn-i ELISA KIT
9054-89-1 SOD 超氧化物岐化酶(来源牛红细胞)
淀粉酶(AMS)检测试剂盒(碘-淀粉微板法) 200T|500T
PP0801 超敏可逆蛋白印迹膜染色试剂盒I
ARB14217 大鼠胃泌素(GAs)Elisa方法检测
PY08-068 改良马丁培养基 225ml 20瓶/箱,用于生物制品霉菌检验
SJ0676 Marker Ⅱ
4-[(2,4-二羟基*基)偶氮]*磺酸* H-Glu(OMe)-OMe.HCl 547-57-9
中性蛋白酶 TAPSO 9068-59-1
ARB12798 小鼠β连环蛋白/联蛋白(β-CAt)免费代测 Mouse β-catenin,β-cat ELISA KIT
多聚赖*酸溶液(10×PLL) 1mg/ml 10ml|50ml
BL1157 革兰氏阳性菌质粒大量提取试剂盒
ARB10817 人抗肌动蛋白抗体(AAA)检测服务 Human anti-actin antibody,aaa ELISA KIT
BTN90502 AMV逆转录酶 AMV Reverse Transcriptase
BFD030 链霉素快速检测试剂盒
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文献和实验我不明白为什么不用柱纯化,经济有快。 问一下,你的pcr引物保护碱基设了几个? guangxidaxue 多做点16度连接后,跑个胶看下能不能连的上 zitong1983 我猜楼主应该是在做hBrf1这个基因的启动子报告基因了,用PCR扩增不同长度的启动子片段,然后克隆到PGL3 basic载体上,继续进行下游的双荧光酶报告基因实验了。想当年我的第一次克隆也是构建这样的截断性载体,前后花了好几个月,被老板批了N次,最后
继续求助中。。。 longgyin8341 继续求助中。。。 xiongran 我也在做这样一条信号通路,NFkB信号通路有商品化的报告基因,promega有,便宜一点的话,国内的碧云天也有,买来直接用就可以了!也可以在下游再找一个具体的基因,克隆启动子,装到pGL3-basic中测,作为补充数据。 longgyin8341 xiongran wrote:
【求助】关于构建目的基因启动子序列的虫荧光素酶报告基因重组质粒的问题请教
位点之后大约200bp的序列,然后设计针对PGL系列载体的引物,扩增然后进行常规分子克隆就可以了。 3、因为目的即是要检测启动子活性,因此构建的就是包含了核因子启动子序列的萤虫素酶报告基因载体。当然,在进行这个检测时还需要海肾素报告基因载体作为内参照,Encher作为阳性对照。具体的,看看化学发光和PGL系列载体说明书就知道了。 希望我说的对你能有所帮助! 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴
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