末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT酶)优惠价

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北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT酶)优惠价，产品信息：

类别：工具酶

英文名：Terminal Deoxynucleotidyl Transferase

产品名	产品编号	包装规格
末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT酶)	YT512	500U

规格：500U

编号：YT512

品牌：百奥莱博

英文名：Terminal Deoxynucleotidyl Transferase

本酶是一种模板依赖的DNA聚合酶，可以催化在寡核苷酸、单链或双链DNA的3"羟基端加上dNTP。可以催化的寡核苷酸的最短长度为3个核苷酸。

 

用途：寡核苷酸或DNA 3"羟基末端标记；DNA末端加尾(DNA tailing)；5"-RACE；合成同一种脱氧核苷酸的寡聚链等。

来源：由大肠杆菌表达，表达基因的来源为小牛胸腺。

活性定义：37℃60分钟内，催化1nmol dNTP加入到多聚核苷酸3"羟基末端中所需的酶量定义为1个活性单位。

酶活性检测条件：200mM potassiu*(代"m") cacodylate(pH7.2),1mM CoCl2,0.1mM DTT,0.01%(v/v)Triton X-100,10μM oligo(dT)10,1mM dTTP and 0.4MBq/ml[3H]-dTTP。

纯度：不含DNA内切酶和外切酶，不含RNase。

酶储存溶液：100mM KAc(pH6.8),2mM 2-mercaptoethanol,0.01%(v/v)Triton X-100 and 50%(v/v)glycerol 。

Reaction Buffer(5X)：0.125M Tris(pH7.2 at 25℃),1M potassiu*(代"m") cacodylate,0.05%(v/v)Triton X-100,5mM CoCl2。

失活或抑制：70℃加热10分钟或加入适量EDTA均可导致Terminal Deoxynucleotidyl Transferase失活。金属离子螯合剂，较高浓度的铵根离子、*离子、碘离子和磷酸根均对Terminal Deoxynucleotidyl Transferase有抑制作用。

储存条件：-20℃。

 

使用说明：

 

1. DNA 3’末端标记：

a. 参考如下表格设置反应体系：

待标记DNA————————————————————10 pmol of 3"-termini

Reaction Buffer (5X) ——————————————10µl

[α-32P]-ddATP, ~10TBq/mmol (3000Ci/mmol)————1.85 MBq (50µCi)

TdT (20U/µl) ——————————————————2µl

补充无核酸酶的去离子水 —————————————至50µl

b. 按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。

c. 37℃孵育15分钟。

d. 70℃孵育15分钟或加入5µl 0.5M EDTA终止反应。

说明：标记的效率和3’羟基末端的类型有关，3’突出末端的标记效率要显著高于3’缩进末端或平末端的标记效率。

 

2. DNA末端加尾(DNA Tailing)：

a. 参考下表格设置反应体系：

DNA片段 ————————————————————1 pmol of 3"-termini

Reaction Buffer (5X)——————————————4µl

dATP or dTTP——————————————————130pmol

或 dGTP or dCTP (四种中通常只需加入一种)————60pmol

TdT (20U/µl)——————————————————1.5µl

补充无核酸酶的去离子水—————————————至20µl

b. 按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。

c. 37℃孵育15分钟。

d. 70℃孵育15分钟或加入5µl 0.5M EDTA终止反应。

说明：在上述反应条件下，每个3’羟基末端可以加上100-130个dA或dT，或20-30个dC或dG。

 

3. 其他用途可以参考上述用途或适当的文献资料进行。

末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT酶)优惠价专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

关键词：YT512,TdT酶,末端脱氧核糖核酸转移酶,末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT酶),Terminal Deoxynucleotidyl Transferase

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编号	类别	名称
YT266	凝胶迁移EMSA	YY1凝胶迁移突变探针(1.75μM)
YT714	一抗	小鼠抗FGFR2/CD332 抗体
YT185	凝胶迁移EMSA	凝胶迁移试剂盒(EMSA试剂盒)
YT649	一抗	Bcl-xL抗体
YT281	其他细胞生物学试剂	一氧化*(代"氮")合成前体(L-Arginine)
YT608	酶和辅酶	CTP合成酶
YT656	一抗	β-Catenin抗体
YT815	一抗	JNK抗体(SAPK抗体)
YT716	一抗	小鼠抗GFAP抗体
YT918	抑制剂激活剂	BRD4抑制剂(JQ1)
YT453	克隆与表达	p53荧光素酶报告基因质粒(p53抑癌基因质粒)
YT923	抑制剂激活剂	EGFR抑制剂(AEE788)
YT797	一抗	Histone H2A抗体
YT790	一抗	HDAC1抗体
YT214	凝胶迁移EMSA	β-Catenin/TCF凝胶迁移探针(10μM)
YT927	抑制剂激活剂	mTOR抑制剂(AZD8055)
YT932	抑制剂激活剂	CENP-E抑制剂(GSK923295)
YT400	核酸扩增(PCR)	核酸酶清除剂(核酸酶喷雾清除剂)
YT181	其他细胞生物学试剂	DEAE-Dextran细胞转染试剂盒
YT442	克隆与表达	pGL6报告基因质粒
YT052	蛋白质研究	SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(6X)
YT635	一抗	AIF抗体(凋亡诱导因子抗体)
YT480	克隆与表达	N端HA标签融合蛋白质粒
YT401	核酸扩增(PCR)	核酸酶/DNA清除剂(喷雾清除剂)
YT652	一抗	Calpain 1 Large Subunit抗体
YT769	一抗	兔抗VEGFR-1抗体
YT692	一抗	兔抗Catalase抗体(过氧化*酶抗体)

 

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