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395
- 英文名:
C-CFP plasmid(with CMV promoter)
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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")C端CFP标签融合蛋白质粒(青色荧光蛋白)打折促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:C端CFP标签融合蛋白质粒(青色荧光蛋白)打折促销
规格:1μg
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:YT464
英文名:C-CFP plasmid(with CMV promoter)
本质粒是哺乳动物细胞表达质粒,用于表达C端含CFP(Cyan FluorescentProtein, 青色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子,可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的后面有一个CFP的完整编码序列,因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达C端含有CFP标签的融合蛋白。利用CFP的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位,也可以利用CFP抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。CFP与GFP高度相似,可尝试用GFP抗体检测CFP。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
本质粒的主要信息如下:
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| Multiple cloning site | 651-740 |
| CFP | 741-1460 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 1510-1531 |
| SV40 polyA signal | 1543-1926 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 2064-2370 |
| bla promoter | 2395-2519 |
| SV40 promoter | 2539-2877 |
| Neomycin/kanamycin resistance ORF | 2912-3703 |
| HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3704-4162 |
| pUC origin | 4291-4958 |
本质粒(5010bp)的图谱如下:
使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
储存条件:-20℃。
想要了解更多关于C端CFP标签融合蛋白质粒(青色荧光蛋白)打折促销的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
·Myc抗体(兔单抗)
编号:YT825
英文名称:anti-Myc antibody(兔单抗)
规格:>20次
本抗体是用经过适当修饰的人工合成human c-Myc N端多肽作为抗原制备而成的抗Myc兔单克隆抗体。本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。
本Myc抗体(兔单抗)广泛地用于Myc tag(EQKLISEEDL)融合表达蛋白的检测。Myc tag相当于human c-Myc 410-419位肽段。本抗体可以检测位于融合蛋白N-terminal的Myc tag,也可以检测位于融合蛋白C-terminal的Myc tag。
DNA重组技术使给目标蛋白带上特定tag成为可能,这些常用的tag包括myc、HA、Flag、His、GST等。带上tag后,通常不会影响目标蛋白的生物活性和细胞内定位。但检测和tag融合表达的目标蛋白时,使用商业化的相应tag抗体就可以完成,大大方便了很多实验检测。
Myc抗体(兔单抗)可以用于检测和Myc tag融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测Myc tag融合表达蛋白等。
产品组份:
Myc抗体(兔单抗)————20μl
Western一抗稀释液————20ml
抗体参数:
免疫原物种:人
免疫原:人工合成人c-Myc N端多肽
克隆性:单克隆
宿主:兔
用途:WB,IP,IF,F
抗体识别位点:Myc tag
同种型:IgG1
推荐稀释比例:WB(1:1000),IP(1:200),IF(1:500),F(1:200)
注意事项:
1. 在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体,Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜,如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
储存条件:-20℃,有效期一年。
C端CFP标签融合蛋白质粒(青色荧光蛋白)打折促销关键词:YT464,C-CFP plasmid(with CMV promoter),青色荧光蛋白,C端CFP标签融合蛋白质粒(青色荧光蛋白)
·双萤光素酶报告基因检测试剂盒
编号:YT273
英文名称:Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit
规格:100次|1000次
本试剂盒是先以萤光素为底物来检测萤火虫萤光素酶,后以肠腔素为底物来检测海肾萤光素酶,并且在后续加入海肾萤光素酶底物时,同时加入抑制萤火虫荧光素酶催化luciferin发光的物质,使后续检测仅仅检测到海肾萤光素酶的活性,实现双萤光素酶报告基因检测。
试剂盒组分:
| 报告基因细胞裂解液 | 60ml |
| 萤火虫萤光素酶检测试剂 | 10ml |
| 海肾萤光素酶检测缓冲液 | 10ml |
| 海肾萤光素酶检测底物(100×) | 100μl |
萤火虫萤光素酶是一种分子量约为61kD的蛋白,在ATP、*离子和氧气存在的条件下,可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的过程中,会发出生物萤光。海肾萤光素酶是一种分子量约为36kD的蛋白,在氧气存在的条件下,可以催化coelenterazine氧化成coelenteramide,在coelenterazine氧化的过程中也会发出生物萤光。生物萤光可以通过化学发光仪或液闪测定仪进行测定。本试剂盒的检测原理参考下图。
双萤光素酶的检测原理图。
通过萤光素酶和其底物这一生物发光体系,可以非常灵敏、高效地检测基因的表达。通常把感兴趣
基因的转录调控元件或5’启动子区克隆在luciferase的上游,或把3’-UTR区克隆在luciferase的下游等,构建成报告基因(reporter gene)质粒。然后转染细胞,用适当药物等处理细胞后裂解细胞,测定萤光素酶活性。通过萤光素酶活性的高低来判断药物处理等对目的基因的转录调控作用。Renilla luciferase相对更多地被用作转染效率的内参,以消除细胞数量和转染效率的差异。萤火虫萤光素酶催化luciferin发光的最强发光波长为560nm。海肾萤光素酶催化coelenterazine发光的最强发光波长为465nm。
注意事项:
1. 加入海肾萤光素酶检测工作液后对于上一步骤中的萤火虫萤光素酶的抑制可以达到99%以上。但总会残留微量活性,因此,宜在转染时把海肾萤光素酶的表达量控制在其RLU读数高于萤火虫萤光素酶RLU读数的10%。海肾萤光素酶的读数高于萤火虫萤光素酶的读数是完全可以的,通常不会有明显的负面影响。
2. 为取得最佳测定效果,在用单管的化学发光仪测定时,样品和测定试剂混合后到测定前的时间应尽量控制在相同的时间内,例如30秒内;使用具有化学发光测定功能的多功能荧光酶标仪时,宜先把样品全部加好,然后统一加入萤火虫萤光素酶检测试剂。
3. 由于温度对酶反应有影响,所以测定时样品和试剂均需达到室温后再进行测定。
4. 为保证萤光素酶检测试剂的稳定性,可以采取适当分装后避光保存的方法,以避免反复冻融和长时
间暴露于室温。经测试,反复冻融三次,对测定结果无明显影响。
5. 样品和测定试剂混合后,必须等待1-2秒,再进行测定。测定时间通常为10秒,根据情况也可以测定更长或更短时间,但是同一批样品宜使用相同的测定时间。
6. 海肾萤光素酶检测底物(100×) 配制在无水乙醇中。由于无水乙醇容易挥发,有时会在初次使用时发现体积明显小于100μl的情况,此时用无水乙醇把体积补足至100μl,并混匀后即可使用。
7. 海肾萤光素酶检测工作液宜配制后立即使用。如不能立即使用,-20℃可以保存一周。随着保存时间的延长检测效果会不断下降,因此不可配制成工作液后长期保存。
储存条件:-20℃,有效期一年。
C端CFP标签融合蛋白质粒(青色荧光蛋白)打折促销关键词:YT464,C-CFP plasmid(with CMV promoter),青色荧光蛋白,C端CFP标签融合蛋白质粒(青色荧光蛋白)
L-异亮*酸甲酯盐*(代"酸")盐 CBZ-D-Valine 18598-74-8
L-山梨糖 Rnase&Dnase away 87-79-6
乙二*(代"胺")四乙酸铁*盐 BOC-L-Threonine 15708-41-5
ARB11554 人烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)酶联免疫定量检测
六*和*化钴 3,5-Dimethyl-3-hexanol 10534-89-1
BTN130621 Taq DNA连接酶 Taq DNA Ligase
NF-249 冻干羊抗人C5血清
F030240 HRP标记兔抗驴IgG抗体 HRP*Polyclonal Rabbit Anti-Donkey IgG
改良Krebs-Henseleit溶液 500ml
ARB13260 小鼠鼠痘病毒(MPV)免费代测 Mouse poxvirus ELISA KIT
BTN131047 脱氧胆酸* Sodium Deoxycholate
ARB13103 小鼠骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)Elisa方法检测 Mouse bone morphogenetic protein receptor Ⅱ,bmpr-Ⅱ ELISA KIT
PY08-024 牛津琼脂(OXA)平板 9CM 10皿/盒,用于李斯特氏菌的选择性分离培养
L-肌肽 DL-2-Aminobutyric acid 305-84-0
SDS裂解液 50ml|100ml
75-78-*(代"5") 二甲基二*硅烷
BL0810 HRP标记羊抗人白蛋白抗体
植物蛋白快速提取试剂盒(离心柱法) 50T|100 T
PY01-075 无水葡萄糖 500克
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文献和实验时效率最高 [2,3] 。在设计钙变色子时,用 GFP 突变体作为两个伙伴荧光团:蓝绿色荧光蛋白作为给体,而黄色荧光蛋白作为受体(见图4.1 ; 参考文献 [4])。如果两个荧光团融合于不同的作用伙伴,分子间 FRET 可以用来探测蛋白质-蛋白质相互作用,而如果两个荧光团都融合到同一个蛋白质,分子内 FRET 可用来探测蛋白质剪切和构象变化 [3] 。 4.1.2 钙变色子的一般设计 使用分子内 FRET 的概念,钙变色子由夹在 CFP 和 YFP 之间的,前后融合的 CaM 的 N
就行了。 如果荧光蛋白是在目的蛋白的C端,目的基因不能有终止密码子。 zhangyuxianggx 谢谢!但是我不明白我的目的基因在pGEM-gene这个质粒上,为什么还要给我pcDNA3-mCherry这个载体 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号:shixiongcoming
. coli/mammals pECFP-C1 pECFPN1 表达 青色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白,目的基因位于N端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals pEYFP-C1 pEYFPC1 表达 黄色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白,目的基因位于C端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals 4)、哺乳动物/真核荧光素酶载体(研究启动子专用)来自荧火虫的化学发光剂,加入底物后发光,不适合追踪单个细胞。 PGL3-basic PGL
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