AP1凝胶迁移突变探针(10μM)厂家

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AP1凝胶迁移突变探针(10μM)厂家是高品质的凝胶迁移EMSA产品，由北京百奥莱博供应，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多AP1凝胶迁移突变探针(10μM)等凝胶迁移EMSA产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：AP1凝胶迁移突变探针(10μM)厂家
品牌：百奥莱博
编号：YT197
英文名：AP1 Mutation Probe For EMSA(10μM)
规格：30μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的AP1 consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针－AP1的阴性对照，用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。一个包装的突变探针，如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应，可以进行90-180个突变探针的冷竞争反应。如果用于生物素标记探针的冷竞争时，可以进行约30个冷竞争反应。

EMSA突变探针－AP1的序列如下：
5’-CGC TTG ATG ACT TGG CCG GAA-3’
3’-GCG AAC TAC TGA ACC GGC CTT-5’

EMSA突变探针－AP1中AP1的公认的结合位点发生了突变，从而使AP1无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中，正常的标记探针和AP1的结合的条带会被抑制；而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中，正常的标记探针和AP1的结合的条带不会被抑制。参考下图。


图1. 一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图

1,阴性对照反应(标记探针)；
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针)；
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记探针)；
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记突变探针)；
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋目的转录因子的特异抗体)。

注意事项：避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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·Cy3抗小鼠免疫荧光染色试剂盒
编号：YT115
英文名称：Immunol Fluorence Staining Kit with Cy3-Labeled Goat Anti-Mouse IgG
规格：>300次
本试剂盒含有Cy3标记的山羊抗小鼠IgG(H+L)抗体，可以用于检测小鼠来源的相应一抗，观察到的颜色为非常鲜艳的红色。Cy3是近年新开发的一种红色荧光探针。它比绝大部分其它的红色荧光探针更加明亮，更加不容易淬灭，而且背景更低。Cy3的吸收峰550nm、发射峰570nm。本试剂盒提供了含有荧光标记抗体稳定剂的免疫荧光染色二抗稀释液，可以确保荧光标记抗体稀释后在4℃可以保存长达6个月，并且在6个月内至少可以重复使用10次。本试剂盒含有抗荧光淬灭封片液，可以使荧光更加持久。本试剂盒对于六孔板内的细胞样品或常规切片，至少可以检测300个样品。

试剂盒组份：
抗小鼠Cy3————————————30μl
免疫荧光染色二抗稀释液—————50ml
抗荧光淬灭封片液————————15ml

注意事项：
1. 需荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。
2. 在使用抗荧光淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭，但仍宜尽量避光，特别是需要尽量缩短在荧光显微镜下的观察时间。
3. 荧光物质均易发生淬灭，染色后宜尽快进行荧光显微镜下的观察。如果不能及时观察可以4℃避光保存，但存放时间通常不宜超过一周，随着存放时间的延长可能会导致观察效果越来越差。
4. 免疫荧光染色效果的好坏和一抗的关系非常密切。建议选购有较多文献报道的并注明可以用于免疫荧光染色的一抗用于本实验。
5. 如果观察时发现荧光过弱，可以适当提高一抗的浓度；如果荧光还是比较弱，可以适当提高荧光标记抗体的浓度。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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·细胞活力检测试剂盒(化学发光法)
编号：YT897
英文名称：Luminescent Cell Viability Assay Kit
规格：100次|500次
本试剂盒是一种通过化学发光法测定细胞内ATP含量从而来定量检测活细胞数目的试剂盒。本试剂盒的性能和用途与Promega公司的同类产品基本相同，对于相同的细胞样品本试剂盒的发光效果更强一些。

本试剂盒比常见的MTT、alamarBlue、Calcein-AM、WST-1、CCK-8等其它细胞活力测定方法更加简单快捷。只需把试剂盒提供的检测试剂与培养细胞等体积混合，反应10分钟后即可进行化学发光检测。无需洗涤细胞，也无需更换或去除培养液。并且化学发光非常稳定，在反应开始后的10分钟内无显著变化，30分钟内的下降不超过10%。

本试剂盒不仅适合少量样品的检测，也非常适合大量样品的高通量筛选检测。

本试剂盒线性范围广，检测灵敏度高。用96孔板进行检测时，本试剂盒在0-50,000个细胞/孔的细胞密度范围内有良好的检测效果，并且在仅有几百个细胞时仍有良好的线性关系。当细胞数量仅为50个/孔时，发光强度可达空白孔的5倍左右。

ATP，作为最重要的能量分子，在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。ATP是细胞新陈代谢的一个重要指标，也是具有代谢活性细胞的重要标志性分子，并和活细胞数目成良好的线性关系。因此，ATP含量能很好地反应活细胞的数目，即本试剂盒可以通过测定ATP含量来进行细胞计数或检测细胞活力。

本试剂盒通过ATP检测细胞活力的原理参考下图。借助ATP依赖的萤光素酶催化的萤光素发光反应，ATP可以通过测定化学发光来进行定量。由于ATP含量能很好地反映活细胞的数目，而ATP含量和发光强度成正比，这样就可以简单地通过化学发光强度来计算出细胞活力或细胞数目。



对于96孔板，我们推荐使用100μl细胞培养液和100μl的检测试剂，总体积为200μl，此时本试剂盒可以进行100次检测。对于384孔板，我们推荐使用25μl细胞培养液和25μl的检测试剂，总体积为50μl，此时本试剂盒可以进行400次检测。也可以用其它体积的试剂进行检测，但细胞培养液和检测试剂体积的比例必须为1:1。

注意事项：
1. 本试剂盒的检测试剂中含有萤光素酶，反复冻融会导致其逐渐失活。尽管经测试本试剂反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，为取得良好的使用效果，第一次解冻后可适当分装保存。反复冻融过程中，可能会导致检测试剂中出现少量沉淀，此时宜平衡至室温，并尽量溶解。如仍有残留的不溶物，可以离心去除后使用，经测试不会影响后续的检测效果。
2. 检测时需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板，相邻孔之间会产生相互干扰。
3. 使用说明中提供了检测ATP标准品的方法，实际检测细胞活力时通常并不需要检测ATP标准品。

储存条件：室温，有效期2年。


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·Histone H2A抗体
编号：YT797
英文名称：anti-Histone H2A antibody
规格：>20次
本抗体是用人工合成的人histone H2A羧基端(carboxy-terminal)的一段多肽进行适当修饰后免疫rabbit，然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。本抗体如果用于常规的Western检测，至少可以检测20次。

本Histone H2A抗体识别的是总Histone H2A(total Histone H2A)，可以检测内源性的histone H2A，和histone H2AZ有交叉反应，未发现和其它组蛋白有交叉反应。

组蛋白histone H2A，H2B，H3和H4各两个分子组成的八聚体和与该八聚体相结合的DNA构成了染色质的基本结构核小体(necliosome)。组蛋白的存在确保了基因组DNA可以被相对致密而有序地堆放在细胞核中。人一个细胞的基因组DNA完全拉成线性的总长度约为1.4米，但染色质的总长度仅为9厘米，而有丝分裂时染色体的总长度仅为0.12毫米。除了核心组蛋白(core histone)histone H2A，H2B，H3和H4外，还有一类linker histone H1和H5。Histone H1可以结合核小体和DNA在核小体中进出的位点，从而使DNA的位置被锁定，有利于在核小体基础上形成更高级的空间结构(参考下图)。组蛋白结合区域的DNA长度为147bp，核小体间的DNA长度大约为50bp。染色质空间结构的松散还是致密很大程度上决定了该区域基因转录水平的高低(参考下图)。



组蛋白是真核生物中呈强碱性的蛋白。组蛋白可以被乙酰化、磷酸化、甲基化和泛素化修饰。这些修饰会改变染色质的空间结构，从而在基因转录调控、染色体装配等过程中起重要作用。通常，histone H2B的Lys5，Lys12和Lys15会发生乙酰化修饰。Histone H3的Lys9，Lys14，Lys18和Lys23会发生乙酰化修饰。Histone H3的Ser10，Ser28和Thr11都会发生磷酸化修饰。Histone H3的这些磷酸化和有丝分裂或减数分裂过程中的染色质浓缩密切相关。Histone H3 Thr3的磷酸化在很多物种中都非常保守，可以被激酶haspin所催化。Histone H3的Thr3磷酸化发生在有丝分裂早期(prophase)，在有丝分裂的晚期(anaphase)则被去磷酸化。Histone H3和H4是甲基化修饰的主要组蛋白，哺乳动物细胞中histone H3和H4是高度甲基化的。组蛋白可以被单、双或三甲基化(mono-, di-, and tri-methylated)，和基因转录调控和染色体装配密切相关。

Histone H2A在其*基端有一个较长的N terminal tail，在核小体的装配过程中起关键作用。Histone H2A指一类非常相似，只有数个*基酸不同的组蛋白，包括H2A.1、H2A.2、H2A.X和H2A.Z。人的hitone H2A由多个基因编码，包括H2AFB1、H2AFB2、H2AFB3、H2AFJ、H2AFV、H2AFX、H2AFY、H2AFY2和H2AFZ。

产品组份：
Histone H2A抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml

抗体参数：

免疫原物种：人
免疫原：人工合成的人histone H2A羧基端(carboxy-terminal)的一段多肽
宿主：兔
用途：WB,IP,IHC-P
交叉反应性：人，小鼠，大鼠，猴
抗体识别位点：Histone H2A C-terminal
Histone H2A分子量：～14kD
推荐稀释比例：WB(1:1000),IP(1:50),IHC-P(1:200)

注意事项：
1. 在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体，Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜，如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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