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- 技术资料
- 库存:
300
- 英文名:
Uracile Nicking Enzyme
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货尿嘧啶切刻酶优惠价,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货尿嘧啶切刻酶优惠价
规格:50U
编号:BTN130666
品牌:百奥莱博
本产品在尿嘧啶位置产生一个单核苷酸缺口,它是尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG)和DNA糖基化酶-裂解酶 Endo Ⅷ的混合物。UDG催化尿嘧啶碱基的切割,形成一个脱碱基(脱嘧啶)位点,但保持磷酸二酯骨架结构完整。Endo Ⅷ的裂解酶活力使脱碱基位点 3´和5´端的磷酸二酯键断裂,释放无碱基的脱氧核糖。其反应示意图如下:

产品特点:
1.PCR产物的克隆;
2.在DNA的尿嘧啶处产生缺口。
产品组成:
| 成份 | 规格 |
| 尿嘧啶切刻酶(1000U/mL) | 50μL |
| 10×Buffer | 1mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指在10μl反应体系中,37℃条件下,15分钟使10pmol的含有单一尿嘧啶碱基的34bp寡核苷酸双链产生切刻所需要的酶量。
北京现货尿嘧啶切刻酶优惠价极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·革兰氏阳性菌DNA提取试剂盒(百万碱基级)
编号:BTN130949
英文名称:Gram positive bacteria DNA extraction kit(millions of base)
规格:10次
·8M盐*(代"酸")胍溶液
编号:BTN100408
英文名称:Gram positive bacteria DNA extraction kit(millions of base)
规格:250mL
·海洋动物DNA提取试剂盒(柱式提取)
编号:BTN130401
英文名称:Marine animal DNA column extraction kit
规格:50次
本试剂盒是在柱式动物DNA提取试剂盒(BTN71206)试剂盒基础上优化改良而得,专门针对海洋动物的基因组DNA提取的试剂盒,可用于鱼类、虾类、贝类、蟹类等海洋动物和水产动物的荃因组DNA提取,可以有效去除海洋动物组织中的蛋白、脂肪及其他有机化合物等杂质。
产品特点:
1. 使用本试剂盒提取的基因组DNA可适用于各种常规分子生物学操作,如:酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等试验。
2. 操作简单安全,1小时内即可获得超纯的基因组DNA,纯化过程中不需要使用*酚*仿等有机试剂。
3. 应用广泛,适用于多种动物细胞和动物组织等。
4. 性价比高,质量和国外同类试剂盒相当,价格更低。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 蛋白酶K溶液(20mg/mL) | 1ml |
| 溶液B | 15ml |
| 溶液C | 13ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 15ml |
| 通用洗脱液 | 15ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存(蛋白酶K溶液需要低温运输,-20℃保存),有效期一年。
使用方法:
使用前请先在溶液C和通用洗柱液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。
1. 切取不多于30mg的组织材料,放入装有200μL溶液A的离心管中,涡旋振荡15秒。注意:根据提取的组织不同,起始量也稍有不同,腮的细胞量较大,一般建议提取量不超过20mg。如果需要去除RNA,可加入40μL RNase A(10mg/mL)溶液(客户自备,BTN3160),振荡15秒,室温放置5分钟。
2. 加入20μL蛋白酶 K溶液(20mg/mL),涡旋混匀,简短离心以去除管盖内壁的水珠。在56℃下放置,直至组织完全溶解,简短离心以去除管盖内壁的水珠,再进行下一步骤。注意:不同组织裂解时间不同,通常需0.5-2小时即可完成。扇贝组织0.5小时基本可裂解完全,虾和鱼类组织1小时。每小时振荡混合样品2-3次,每次振荡混匀15秒。
3. 加入200μl溶液B,充分颠倒混匀,70℃放置10分钟,溶液应变清亮,简短离心以去除管盖内壁的水珠。注意:加入溶液B时可能会产生白色沉淀,一般70℃放置时会消失,不会影响后续实验。如溶液未变清亮,说明细胞裂解不彻底,可能导致提取DNA 量少和提取出的DNA 不纯。
4. 加入200μl 无水乙醇,充分颠倒混匀,此时可能会出现絮状沉淀,简短离心以去除管盖内壁的水珠。
5. 将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个离心吸附柱中(吸附柱放入收集管中),12000rpm(~13,400×g)离心30秒,倒掉废液,将吸附柱放回收集管中。
6. 向离心吸附柱中加入500μl溶液C(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm(~13,400×g)离心30秒,倒掉废液,将吸附柱放入收集管中。
7. 向吸附柱中加入600μl 通用洗柱液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm(~13,400×g)离心30秒,倒掉废液,将吸附柱放入收集管中。
8. 重复操作步骤7。
9. 将吸附柱放回收集管中,12000rpm(~13,400×g)离心2分钟,倒掉废液。将吸附柱置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。
10. 将吸附柱转入一个干净的离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200μl 通用洗脱液,室温放置2-5分钟,12000rpm(~13,400×g)离心2分钟,将溶液收集到离心管中。注意:通用洗脱液的体积不应少于50μl,体积过小影响回收效率。为增加基因组DNA的得率,可将离心得到的溶液再加入吸附柱中,室温放置2分钟,12000rpm(~13,400×g)离心2分钟。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用超纯水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5 范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率;且DNA产物应保存在-20℃,以防DNA 降解。
北京现货尿嘧啶切刻酶优惠价关键词:尿嘧啶切刻酶,BTN130666,Uracile Nicking Enzyme
·8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶(OGG1)
编号:BTN130645
英文名称:8-Oxoguanine DNA Glycosylase
规格:80U
OGG1(α异构体)是一种8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶,该酶具有两种活性,N-糖基化酶活性和脱嘌呤/脱嘧啶AP裂解酶活性。N-糖基化酶活性能从双链DNA上去除受损嘌呤碱基产生脱嘌呤(AP)位点,而AP裂解酶活性则能从AP位点的3´处进行切割产生一个5´磷酸和一个3´磷酸-α,β-不饱和醛。hOGG1还能识别、切割其它异常碱基对如:与胞嘧啶配对的7,8-二羟基-8-氧代鸟嘌呤(8-氧代鸟嘌呤),与胞嘧啶配对的8-羟基腺嘌呤,以及foramidopyrimidine(fapy)-鸟嘌呤和甲基-fapy-鸟嘌呤。
产品特点:
1.单细胞凝胶电泳(彗星试验),彗星试验的推荐稀释倍数1:10²~10³;
2.碱洗脱;
3.碱解旋。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·T4 RNA连接酶2(截短型K227Q)
编号:BTN130857
英文名称:T4 RNA Ligase 2(truncated K227Q)
规格:2000U
T4 RNA连接酶2(截短型K227Q),又称T4 Rnl2tr K227Q,可特异地将5´末端预腺苷化的DNA或RNA连接到RNA 3´OH末端。该酶连接时不需要ATP,但需要预腺苷化的接头。T4 Rnl2tr K227Q是T4 RNA连接酶2截短型的点突变体,K227的突变减少了酶、赖*酰及腺苷复合物的形成,也降低了非特异性的连接产物(多连体和环状体),后者可能是通过降低该酶从接头向RNA5´磷酸基转运腺苷基团的微量活性而实现的。该酶在连接反应中,无需ATP,利用预腺苷化的接头和降低的酶-赖*酰腺苷化活性能将连接背景降为最低。此酶已被用于microRNA克隆中接头的优化连接。
产品用途:
1.将预腺苷化的DNA或RNA序列标签连接到任何RNA 3´末端;
2.将单链腺苷化引物连接至小RNA上,用于cDNA克隆文库构建;
3.将单链腺苷化引物连接至RNA上,用于链特异 cDNA文库构建;
4.无单链和双链DNA核酸外切酶、核酸内切酶、RNase以及磷酸酶的污染。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
北京现货尿嘧啶切刻酶优惠价关键词:尿嘧啶切刻酶,BTN130666,Uracile Nicking Enzyme
·重组蛋白L
编号:BTN131082
英文名称:Peptostreptococci protein L
规格:1mg
本品为重组蛋白L,纯度大于90%,带6×HIS标签,分子量为40kD。
储存条件:-20℃保存,有效期1年。
·TB培养基
编号:BTN100824
英文名称:Terrific Broth Medium,Powder
规格:250g
TB培养基是由美国科学家Tartof和Hobbs在1987年开发,它不比LB培养基多20%的peptone和380%的yeast extract。含磷酸缓冲液,0.4%glycerol。同样培养条件下能得到更多菌体,常用于质粒制备和蛋白质表达。本产品加水灭菌后即得液体培养基,即可使用。配制一升液体培养基需要25g本产品。
储存条件:常温运输及保存,有效期两年。
·人基因组DNA(女性)
编号:BTN131032
英文名称:Human Genomic DNA(Female)
规格:100μg
本产品为人基因组DNA,来源于多位匿名的捐献者,其中BTN131031为男性基因组DNA;BTN131032为女性基因组DNA。利用脉冲电场凝胶电泳测量,90%以上的DNA的大小大于50kb。该DNA适用于Southern blot杂交,基因组分析(包括PCR)及基因组文库构建等实验。。
储存条件:低温运输、4℃保存、有效期一年。
·柱式病毒DNA提取试剂盒
编号:BTN70701
英文名称:Virus DNA column extraction kit
规格:50次
本试剂盒是在一管式病毒DNA提取试剂盒的基础上开发的、专门用于从血清(血浆)等液体样品及拭子(咽拭子、鼻拭子、口腔拭子、阴道拭子等)中提取微量病毒DNA的产品。
试剂盒特点:
1. 操作简单,整个过程只需要20分钟左右,不需要额外在洗柱液中补加乙醇。
2. 灵敏度高,通过PCR 检测到的最终灵敏度可以达到30-50拷贝/mL。
3. 安全无毒,不需要使用*酚和*仿等有机溶液。
4. 如果加上病毒离心富集步骤,最多可以处理1.5mL液体病毒样品。
5.与PCR和荧光PCR 兼容。
6. 价廉物美,性价比远高于国外同类产品。
7.适用于各种材料,包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等无细胞材料。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 30ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脱液3.0 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
使用方法:
1. 对于液体病毒样品:在1.5mL离心管中加入0.1-0.2mL液体病毒样品。如果病毒需要富集,可以将1.5mL液体在4℃ 24,000 g 冷冻离心60分钟,移弃1.3mL后剩下的0.2mL 用于第2 步处理。对于拭子样品:将一个拭子放入离心管中,加入1mL自备的生理盐水,振荡器上充分振荡半分钟,然后转移0.2mL 到1.5mL塑料离心管中,用于第2 步处理。
2. 加入0.6mL溶液A到第一步得到的0.2mL样品中,振荡30秒混匀后室温放置10分钟。注意:溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀,使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 短暂离心后将500μl溶液转移到离心吸附柱中,室温放置2分钟。
4. 12000rpm室温离心1分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。
5. 将剩余溶液短暂离心后全部转移到步骤3的离心吸附柱中,室温放置2分钟。
6. 12000rpm室温离心1分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。
7. 加入0.7mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12000 rmp室温离心1分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。
8. 12000rpm室温离心1分钟(干甩),弃含穿透液的离心管。
9. 将干甩后的离心吸附柱套入到一个自备的RNase-free的1.5mL离心管中,在离心吸附柱的滤膜的中部加入30-100μl DNA 洗脱液3.0,然后室温放置2分钟。
10. 12000rpm室温离心1分钟,离心管中的溶液即为病毒DNA溶液。
11. DNA样品可以直接用于PCR,也可放-20℃长期保存。
疑难解答:
Q:提取液体样品/病毒核酸(RNA或DNA)为何很难?
A:原因一是量少。病毒颗粒中的RNA或DNA是作为遗传物质保存,每个病毒最多只携带几个拷贝(而一个细胞中有上万种RNA分子,每种RNA 有很多拷贝),同时其长度也十分有限(一般不到细胞基因组的万分之一),样品中病毒数往往又不是很多,使得样品中病毒核酸的绝对量往往比一个细胞中核酸的绝对量还少,所以操作中十分容易丢失。另外,由于得到的核酸绝对量很少,不能使用电泳和测OD检测,只能通过PCR或RT-PCR 检测,而PCR或RT-PCR的条件又需要优化,所以要确定提取是否成功十分不容易。
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