北京PCR法DNA探针标记试剂盒大量库存促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应北京PCR法DNA探针标记试剂盒大量库存促销，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：北京PCR法DNA探针标记试剂盒大量库存促销
规格：5次
编号：BTN90604A
产地：国产|进口
PCR标记的原理是用带标记的dNTP进行PCR，最后得到的PCR产物将带有标记，可以直接用于杂交试验。其原理示意图如下：


产品特点：
1.一站式，本试剂盒提供经过优化的试剂，不需要用户自己摸索。
2. 足够10次50μl体系的常规PCR(用于制备标记反应的模板和设置对照反应)和5次50μl体系的标记反应。
3.一次标记可以得到μg级的双链DNA探针或约700ng的单链DNA探针，足够多次杂交实验用。
4. 既可用于制备双链探针，也可以用于单链探针。
5. 90604A需自备含标记核苷酸的dNTP，90604B和90604C分别含生物素和地高*(代"辛")标记的底物。自备的标记包括fluorescein-dUTP、hydroxycoumarin-dUTP、resorufin-dUTP和aminoallyl-dUTP等。
6. 本产品得到的探针参入率一般为4-5%(每100个核苷酸中有4-5个将带有非同位素标记)，有效降低了空间阻碍，检测效果最佳。
7.可以用于Southern和Northern Blot、原位杂交、菌落和斑点印迹杂交等分析。

试剂盒组成：

 

成分	规格
2×标记专用PCR Mix	500μl
dNTP，2mM each	50μl
含Biotin-11-dUTP的dNTP	25μL(仅B有)
含DIG-11-dUTP的dNTP	25μL(仅C有)
超纯水	1ml
说明书	1份

注：标记专用PCR Mix不含dNTP。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一：准备工作
1. 按常规的方法设计PCR引物，使探针长度在400-800bp之间。过短则标记参入少，探针杂交信号强度减弱；过长则非特异杂交增加，背景变强。
2. 根据PCR引物优化PCR条件。
3. 由于标记的dNTP比较珍贵，所以本试剂盒不推荐以基因组DNA或其他复杂DNA为模板直接进行PCR标记，而是建议采取下述的两步法标记来提高成功率，即先制备非标记PCR产物，再以之为模板制备标记的PCR产物。
二：非标记PCR产物的制备
4. 设置50μL PCR的反应体系：

成份	用量
2×标记专用PCR Mix	25μl
dNTP，2mM each	5μl
自备的探针引物一(10pmol/μL)	1μL(10μM)
自备的探针引物二(10pmol/μL)	1μL(10μM)
自备的模板DNA	1μg基因组DNA或1ng质粒DNA
超纯水	补到50μL

5. 按已经优化的PCR参数进行PCR。
6.电泳检测和胶回收所需的PCR产物，并定量。用10 pmol引物一般能得到1μg左右的PCR产物(具体取决于PCR产物的长度)。注意：最好采取胶回收而不是PCR回收以避免残留引物干扰后续的标记PCR。
三：标记PCR反应(最好做一个不加标记的对照用于定量)
说明：在设置下面反应时，如果加一种引物，就得到单链标记的PCR产物；如果加两种引物，则得到双链标记的PCR产物。由于双链PCR探针在杂交前虽然要变性成单链后使用，但杂交时变性的双链彼此还会复性，这种复性会与探针-靶DNA杂交反应相竞争，降低杂交效率，因此强烈推荐使用单链标记的DNA探针。

成份	样品	对照
2×标记专用PCR Mix	25μl	25μl
含Biotin-11-dUTP的dNTP或 含DIG-11-dUTP的dNTP或 自备的含其他标记dUTP的dNTP	5μl	不加
dNTP，2mM	不加	5μl
双链标记：探针引物一和引物二 单链标记：探针引物一或引物二	每种50 pmol 一种50 pmol	每种50 pmol 一种50 pmol
上步胶纯化所得PCR产物 (单链标记可用100ng)	10 ng	10 ng
超纯水	补到50μL	补到50μL

 注意：本试剂盒提供的dNTP混合物中，标记底物与非标记底物的比例已经进过优化，如果自备标记dUTP，其与dTTP的最佳比例需要优化，标记不同，比例不同。对DIG-11-dUTP，最佳比例1：3；对BrdUTP，最佳比例为1：1。
7. 按第5步的PCR参数进行标记PCR，但需要进行下列修改：一是循环数增加到35-55个循环。由于模板为纯化后的PCR产物，探针对扩增长度完整性要求不高(长度不均的探针由于能形成网络结构，效果反而更好)，所以可以增加循环数；二是延伸时间增加15秒，因为标记dUTP参入到DNA的速度比常规的dTTP慢；三是降低复性温度5-7℃，因为标记核苷酸参入到DNA后，新模板的Tm值将降低。
8. 标记探针的定量：取标记反应和对照反应的产物1-5μl，在琼脂糖凝胶上跟浓度已知的DNA marker一起电泳，并判断探针的浓度。由于标记反应的PCR产物中额外带有非同位素的配体(生物素，地高*(代"辛")等)、因此其泳动速度将慢于非标记PCR产物(但同位素标记不能用此法)。
 注意：如果扩增的是单链DNA探针，其结合EB的能力远低于双链DNA(EB是嵌合到双链碱基对之间的，而单链DNA没有碱基对，只有一些局部区域折叠形成的有限双链区，因此能结合的EB很少)，因此EB染色的强弱不能准确反应DNA的浓度，可以采用银染定量(跟marker比较)。一般100ng模板按上述条件经过单链PCR扩增可得到700ng左右探针。
9. 剩余的PCR标记产物可以不经过纯化，直接加入(对单链PCR探针)杂或加热变性并急冷后加入(对双链PCR探针)到杂交液中使用。如果暂时不用请放-20℃长期保存。如果需要纯化，请使用乙酸铵/乙醇沉淀法。

更多有关北京PCR法DNA探针标记试剂盒大量库存促销的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·还原剂兼容型BCA蛋白定量试剂盒
编号：BTN131069
英文名称：Reductant-Comp*(代"a")tible BCA Kit
规格：250次
本产品是用于含有还原剂的蛋白溶液定量的专用产品。

产品特点：
1．与5mM DTT，35mM巯基乙醇或10mM TCEP兼容。
2．无需蛋白沉淀。
3．线性工作范围：125-2000微克/毫升。
4．样品体积：25微升。
5．与多数离子型或非离子型去污剂兼容。
6．比基于考马斯(Bradford)测定方法的蛋白间差异更少。
7．比色法，在562纳米除读数。
8．使用方便。

试剂盒组成：

成份	规格
BCA试剂A	250mL
BCA试剂B	25mL
兼容试剂	10×20mg
重溶缓冲液	15mL
白蛋白标准品(2mg/ml)	10×1mL安瓿
用于BCA-RAC分析的96孔板	5块
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存、有效期两年(但BSA标准需要-20℃保存)。


北京PCR法DNA探针标记试剂盒大量库存促销关键词：PCR法DNA探针标记试剂盒,PCR DNA Labeling Kit,BTN90604A

λ DNA/HindIII+EcoRI（564-21226bp） 100次
ARB11851 人凝胶原蛋白(gelson)ELISA代测服务 Human gelson ELISA KIT
硫*(代"酸")亚锡 Pepstatin A 7488-55-3
间硝基酚 H-Phe-OEt.HCl 554-84-*(代"7")
BL0953 胶体金标记羊抗小鼠IgG抗体
葡聚糖凝胶G-50 Sulfo-NHS 9048-71-9
棕榈油酸 EDOT 373-49-9
ARB12299 大鼠抗肌内膜抗体IgA(EMA IgA)elisa测定使用说明书 Rat anti-endomysial antibody iga,ema iga ELISA KIT
鸟苷 5-Fluorouracil 118-00-3
PY02-207  改良V-P培养基  250克  
BTN71201 柱式动物RNAOUT Column Animal RNAOUT
ARB10888 人抗流行性腮腺炎病毒(EP-Ab)尿液中含量检测 Human anti-epidemic parotitis antibody,ep-ab ELISA KIT
N-硝基-L-精*酸甲酯 Gallocyanine 51298-62-5
ARB10036 人I型前胶原羧基端肽(PICP)含量分析 Human procollagen Ⅲ n-terminal Peptide,pⅢnt ELISA KIT
ARB10585 人伤寒抗原(St-Ag)含量检测 Human salmonella typhi antigen,st-ag ELISA KIT
北京PCR法DNA探针标记试剂盒大量库存促销关键词：PCR法DNA探针标记试剂盒,PCR DNA Labeling Kit,BTN90604A

BL0837 羊抗人IgG纯化抗体
ARB13138 小鼠前列腺特异性抗原(PSA)ELISA代测服务 Mouse prostate specific antigen,psa ELISA KIT
ARB13890 猪地塞米松(Dex)检测服务 Porcine dexamethasone,dex ELISA KIT
BTN90508 包涵体微量纯化试剂盒 Inclusion Body Miniprep Kit
CYB168006 绵羊血清 500ml/瓶
23491-52-3 Bis Benzlimide Hoechst NO33342 荧光染料
BTN130616 Bsu DNA聚合酶,大片段 Bsu DNA Polymerase,Large Fragment
SSPE缓冲液(20×,pH7.4)   500ml
SJ0289 FAD Na2  核黄素腺嘌呤二核苷酸二*盐
ARB13597 兔子免疫球蛋白E(IgE)酶免分析 Rabbit immunoglobulin e,IgE ELISA KIT
PY02-052  MH(B)培养基  250克  
HC0131 PH试纸 广泛试纸PH范围(1-14)
Fmoc-L-天冬酰胺 ONPG 71989-16-7
四水磷酸肌酸二*盐 Oleic acid 71519-72-7
BTN3080 植物RNAOUT Plant RNAOUT
ARB13240 小鼠维生素D3(VD3)酶联免疫定量检测 Mouse vitamin d3,vd3 ELISA KIT

我公司强烈推荐探针标记及检测系列产品，热情期待您的咨询选购北京PCR法DNA探针标记试剂盒大量库存促销。