UTP溶液(100mM)促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")UTP溶液(100mM)促销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：UTP溶液(100mM)促销
产地：国产|进口
英文名：UTP Solution，100mM
规格：0.25mL
品牌：百奥莱博
本产品纯度在98%以上(HPLC检测)，不含DNA内切酶、DNA外切酶、RNA酶和磷酸酶的污染，可以直接用于体外RNA转录合成。

UTP分子式为C9H12N2O15P3Na3，分子量是550.1，消光系数为10.0×103 M-1×cm-1(pH7.0)，λmax为262nm。

储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。

关于UTP溶液(100mM)促销的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·超快非醇核酸沉淀剂
编号：BTN60402
英文名称：Magic Solution DNArc
规格：30次
本产品是我司独创的一管式非醇DNA/RNA沉淀剂，其主要特点超快速度,是只需要离心2分钟即可快速沉淀回收溶液中的单双链DNA或RNA(包括探针)，可广泛用于DNA/RNA的去盐，去蛋白,反应纯化，浓缩等。

产品特点：
1. 明显提高DNA或RNA沉淀的得率和DNA或RNA提取的产率。
2. 本产品无核酸污染也无DNA酶和RNA酶活性。
3. 痕量DNA和RNA(20pg)回收率达95～98%。
4. 不影响酶切、连接、转录、PCR、转化、转染等实验。
5. 不影响电泳和DNA-蛋白相互作用。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。溶液A呈红色，如果颜色发生变化，则表示pH已经改变，请弃之不用。溶液B为无色液体，会在瓶底产生少量晶体状产生沉淀，用前无需溶化，直接取上清液使用)。

使用方法：
1.将1/10体积的溶液A加入到DNA溶液中(包括PCR，酶切反应液等)，振荡混匀。如果回收20 Kb以上的DNA片段，混匀时需要温和；对20Kb以下的DNA片段，可以剧烈震荡。
2.室温静置至少2分钟。此步十分关键，不能省略而直接离心。
3.13000 g室温离心5分钟后，小心吸弃上清。
4.加入0.8mL溶液B，充分震荡混匀。
5.13000 g室温离心2分钟，小心吸弃上清。
6.再用0.2mL溶液Ｂ重复第4-5步一次。
7.小心吸弃上清后即得纯化的DNA沉淀，加入少量TE或水，充分吹打溶解。如果最后还会有少量白色不溶沉淀，属于正常现象。

疑难解答：
Q：电泳为何不能检测到回收的DNA？
A：最可能原因是各步加入溶液后没有充分震荡混匀，其次是沉淀在各步吸弃上清时候不小心吸走而丢失，三是溶液A的pH发生改变,四是DNA溶液的盐离子浓度或pH值太高。
Q：电泳时为何有残留荧光物在加样孔中？
A：可能是琼脂糖凝胶中的杂质吸附的DNA，吸取 DNA样品时最好先短暂离心，只取上清液。这些不溶杂质一般不影响后续反应。使用高纯度的琼脂糖可以减少杂杂质的污染。百奥莱博一般使用 OXOID的琼脂糖，得到的DNA可以用于常见的分子生物学后续反应。
Q：本产品与贵公司的Magic Gel DNArc是否相同。
A： Magic Gel DNArc 有离心管和特殊的融胶液，专门用于从胶中回收DNA；本产品用于从反应液中纯化回收DNA，不需要另外提供离心管和融胶液。Magic Gel DNArc的溶液B和溶液C 分别与本产品的溶液A和溶液B类似但浓度不完全相同，建议不要互用。


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·柱式鼠尾DNA提取试剂盒
编号：BTN121102
英文名称：Rat tail DNA column extraction kit
规格：50次
大鼠和小鼠是重要的生命科学实验材料，鼠尾则是小鼠最佳活体样品，常用于基因型的快速检测。本试剂盒采用独特的酶和缓冲体系，可以快速得高质量、高纯度的基因组DNA。

产品特点：
1. 即开即用，不需要自己准备各种溶液。
2. 简单快速，最快可在60分钟内从0.5 鼠尾中提取到10μg DNA。
3. 柱式法回收，所得DNA 纯度高(OD260/280一般在1.7-1.9)。片段大(一般在20 kb以上)、纯度高。
4. 安全环保：无需有机试剂抽提。
5.可用于后续的酶切、PCR、Southern杂交、文库构建等实验。
6. 除鼠尾外，还可用于其他动物组织(心，肝、肾、脾和肌肉等)。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	50ml
蛋白酶K溶液(10mg/mL)	1ml
溶液B	15ml
溶液C	50ml
离心吸附柱(15层膜)	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液2.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存(蛋白酶K溶液需要低温运输，-20℃保存)，有效期一年。

使用方法：
1. 剪取0.5-1cm鼠尾(约15-30mg)，尽量剪短成的1mm左右小段，放入干净的1.5mL塑料离心管中。若不需要立即使用，可以在液氮中或-80℃长期放置，或-80℃放置数天。如果是动物心，肝、肾、脾和肌肉等组织，则取30mg左右并充分剪碎。
2. 加入1mL溶液A和20μl蛋白酶K溶液(10mg/mL)，37℃保温10小时(一般过夜保温就可以)。也可以放置于65℃金属浴或水浴中保温2小时，其间每间隔10分钟涡旋混匀一次(或用手指用力弹击离心管底部数次)以帮助鼠尾酶解。对于老年小鼠鼠尾，可以适当增加酶解时间到3-4小时。如果有温控混合器使反应体系始终处于摇晃状态，则效果更佳。
3. 加入0.3mL的溶液B和0.2mL的自备*仿，振荡器上振荡30秒充分混匀。
4. 12000rpm室温离心3分钟，小心将上清转移到新的1.5mL塑料离心管中。
5.在上清液中加入等体积的溶液C，上下颠倒30秒充分混匀。
6. 将混合液分两次转移到离心吸附柱中。每次是先将0.7-0.8mL混合液转移到离心吸附柱中，室温放置2分钟，12000rpm室温1分钟，弃穿透液。再把剩余的一半上柱，重复此操作。
7. 将0.7mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中，12000rpm室温离心半分钟，弃穿透液。
8. 将0.3mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中，12000rpm离心半分钟(此步为第二次洗涤，一般可以省略)。
9. 空甩离心吸附柱半分钟去除残留液体。
10. 将离心吸附柱放置在一新的1.5mL塑料离心管中，加入30-50μl DNA 洗脱液2.0。
11. 12000rpm离心1分钟，管底即为DNA溶液，可立即用于PCR，也可长期保存在－20℃。


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·T3体外转录试剂盒
编号：BTN91108
英文名称：T3 in vitro Transcription Kit
规格：50次
本试剂盒是基于沙门氏噬菌体T3 RNA聚合酶的RNA体外转录试剂盒，它利用含有T3启动子的模版DNA，以NTP为底物，从T3启动子下游开始合成与模板DNA中一条链互补的RNA，简单快速获得大量的RNA分子。

产品特点：
1. 即开即用，用户只需提供含T3启动子的DNA模板即可以进行体外转录实验，不需耍单独准备每一个成份。
2. 单溶液预配液，减少加样次数，避免了操作误差，增加了可重复性。
3. 模板DNA可以是线性化的质粒DNA，也可以是PCR扩增产物。
4.可以合成的RNA的最佳长度在20nt到5000nt之问。
5.产品配方经过精心优化，每μg DNA模板可以合成2-6μg RNA。
6. 得到的RNA可以用于RNA结构研究、核解生物化学、体外翻译、RNA-蛋白质相互作用、反义技术、SELEX技术和RNA干扰(RNAi)等实验。

试剂盒组成：

成分	规格
转录预配液(2×)	0.5mL
阳性对照DNA(1.3 Kb片段)	20μL(10ng/μL)
T3 RNA聚合酶混合液	50μL
RNase-free水	1mL
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一、制备DNA模板
PCR片段和质粒DNA都可以用作体外转录的模板，但是必须注意以下几点：
1)必须使用线性化的DNA。如果是质粒DNA，则必须先用适当的限制性内切酶切成线状。
2)是需要转录的DNA序列的上游必须有T3启动子。如果模板是PCR产物，则可以在设计引物时将T3启动子序列(5´AATTAACCCTCACTAAAGG 3´)加上。如果是将DNA片段克隆到载体上，则需要选择有T3启动子的载体，并且克隆位点必须位于T3启动子下游。
3)是需要转录的DNA序列的下游端最好不要是3´突出。如果是3´突出(如选择了Pst I来线性化质粒)，则最好用T4 DNA聚合酶修平。
4)是必须保证DNA模板中没有RNase。由于提取质粒DNA的过程中一般要使用大量的RNase A，因此质粒DNA一般都有严重的RNase A污染，所以在用作模板前，最好采取胶回收得方法回收质粒DNA。并且加入少量总RNA一起保温，然后电泳检测RNA是否被降解，以此判断纯化的DNA模板是否有残留RNase A。

二、体外转录反应
1.在一个RNase-free的塑料离心管中，在室温下(不是在4℃下)按次序加入下列成分：

成分	加入量	备注
DNA模板	xμl	总量在50 ng-1μg(如果模板是PCR片段，建议用50ng左右；如果模板是质粒DNA，建议用1μg左右；如果用本产品提供的阳性对照，建议用4μL)
转录预配液，2×	10μl	需室温时使用
T3 RNA聚合酶混合液	1μl	本成分还含其他促进剂，所以是混合物
RNase-free水	补水到20μL

注：此为20μL反应体系的用量，对其他体积的反应体系，各成分的用量可以按比例增减。如果需要标记RNA探针，则需要定做NTP分开而不是NTP预先混合的试剂盒。如果需要得到加帽RNA，则需要加入自备的加帽修饰核苷酸(本公司有各种加帽修饰核苷酸)。
2. 37℃保温1-2小时。注意：延长保温时间并不能提高产量。
3. 70℃加热10分钟灭活T3 RNA聚合酶。
4. 取1-3μL电泳检测转录效果。一般1μg DNA可以合成 5-10μg的RNA。
5. 得到的RNA可以放-80℃保存。

若需进一步去除DNA模板，可参考下列操作步骤，但所用试剂需另行购买，本试剂盒不提供。
1.在体外转录结束后，在反应体系中加入3-5U自备的RNase-free DNase(BTN90903；3-5U/μL)。
2. 37℃保温15-30分钟。
3. 补水到100μL，
4. 用自备的等体积(100μL)的Tris饱和酚-*仿抽提一次去除残留的DNase和RNA聚合酶。
5.在上清中加200μL自备的微量核酸沉淀剂(BTN50903；用前需要摇晃混匀)，振荡后15000rpm离心3～5分钟，弃上清。
6. 加入1mL 75%乙醇，震荡10秒后15000rpm离心3～5分钟，弃上清。
7. 短暂离心数秒，用枪头吸弃上清。
8. 晾干半分钟，所得沉淀即去除DNA模板后的RNA。可溶于RNase-free水中后立即使用或放-80℃长期保存。

疑难解答：
1、没有RNA产物。最常见原因是DNA模板有RNase污染，测试方法是用纯化的RNA跟模板DNA一起保温，再检测RNA是否降解。本试剂盒缓冲液和酶混合液中有RNase inhibitor，如果模板RNase污染严重，可能需要用户补加RNase inhibitor。
2、RNA产量低。最常见的原因是DNA模板序列。在转录序列的第一个和第二个碱基最好都是G，在前14个碱基内避免有U存在。
3、RNA长度比预期的短。可能是模板序列中有T3 RNA聚合酶的终止序列。可以改用SP6或T7体外转录试剂盒(启动子也必须改成SP6或T7启动子)。
4、RNA长度比预计的长。T3 RNA聚合酶跟Taq DNA聚合酶一样，有不依赖于模板的加尾功能，最多有一半的RNA可以带一个或两个碱基的尾巴。如果RNA长度比预计的长很多，使用的模板又是质粒DNA，则可能是质粒DNA线性化不彻底。
5、5´单磷酸还是三磷酸。如果使用GTP，则得到的RNA是三磷酸，体外转录时如果保温时间太长(如12小时)，则有50%的三磷酸会变成单磷酸。如果在转录体系中加入GMP，则T3 RNA聚合酶将优先使用GMP，所得RNA产物中5´端是单磷酸的比例将大大增加。

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