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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
248
- 英文名:
Super Multiplex PCR Mix
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
高效多重PCR Mix价格由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多高效多重PCR Mix等核酸扩增(PCR)产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:高效多重PCR Mix价格
产地:国产|进口
英文名:Super Multiplex PCR Mix
编号:WE0124
品牌:百奥莱博
规格:1ml|5ml
本品是由SuperStar DNA Polymerase、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂等组成的预混体系,专用于多重PCR扩增。本品所含的 SuperStar DNA Polymerase是全新高效热启动酶,在常温下没有聚合酶活性,可有效减少PCR反应初期因引物错配而产生的非特异性扩增。独特的缓冲体系与热启动酶的组合,显著提高了PCR的扩增效率,扩增范围更广泛。本产品适用于各种类型的多重PCR反应,比如微卫星分析、基因分型和SNP检测等。
产品组成:
| 组份 | 1ml | 5ml |
| 2×Super Multiplex PCR Mix | 1ml | 5×1ml |
| ddH2O | 1ml | 5×1ml |
注意事项:
1、使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。
2、避免反复冻融,反复冻融可能使产品性能下降。如果在短期内需要频繁使用,可在2~8℃保存。
使用方法:
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 50μl反应体系 |
| 2×Super Multiplex PCR Mix | 25μl |
| Primer Pool | 0.1-0.3μM |
| DNA or cfDNA | 5ng-100ng |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:引物浓度请以终浓度0.1-0.3μM作为设定范围的参考。
2、PCR反应条件
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 2 min | |
| 变性 | 98℃ | 20 s | 30-40个循环 |
| 退火延伸 | 65℃ | 90 s | |
| 终延伸 | 72℃ | 5 min |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
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高效多重PCR Mix价格关键词:高效多重PCR Mix,WE0124,Super Multiplex PCR Mix
·一步法Real-Time RT-qPCR试剂盒(荧光探针)
编号:WE0147
英文名称:Super TaqMan OneStep RT-qPCR Kit
规格:100次
本试剂盒是采用探针法(TaqMan,Molecular Beacon等)进行一步法Real-Time RT-qPCR的专用试剂盒。使用本产品进行Real Time RT-qPCR反应时,逆转录和定量PCR在同一反应体系中进行,反应过程中无需添加试剂,无需打开管盖,避免了污染的同时提高了实验效率。本产品的检测灵敏度高,荧光信号强,信噪比高,非常适合于RNA病毒等微量RNA的检测。其所包含的特殊缓冲系统能使逆转录酶与DNA聚合酶同时发挥最大功效,提高反应效率。使用本产品可以得到更宽广的线性范围,对目的基因定量更准确,重复性好,可信度高。
试剂盒组成:
| 组份 | 100次 |
| 2×Super TaqMan OneStep Buffer | 1.4ml |
| Super OneStep Enzyme | 100μl |
| RNase-Free Wat er | 1ml |
注意事项:
1、本试剂盒中试剂使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。
2、本产品以RNA为模板进行一步法RT-PCR实验,在操作过程中应避免RNase污染,建议在专门的区域进行RNA操作,使用专门的仪器和耗材,操作人员带口罩和一次性手套并经常更换手套,实验相关耗材应用0.1%DEPC(焦碳酸二乙酯)水溶液在37℃处理12小时,并高压灭菌30分钟后使用。
3、本试剂盒中的各试剂应尽量避免反复冻融,反复冻融可能使产品性能下降。
4、本试剂盒必须使用特异性引物,引物的选择可根据具体实验来选择,引物设计的好坏直接影响到RT-qPCR反应的结果,设计引物时需考虑GC含量,引物长度,引物位置,PCR产物的二级结构等因素,建议采用专业的引物设计软件进行设计。
5、本试剂盒推荐使用特异性探针,建议采用专业的设计软件进行设计。
使用方法:
以下举例为常规的反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小的不同进行相应的改进和优化。(反应液的配置请在冰上进行)
1、将RNA模板、引物、2×Super TaqMan OneStep Buffer、Super OneStep Enzyme和RNase-Free Water溶解并置于冰上备用。
2、PCR反应体系:
| 试剂 | 25μl反应体系 | 终浓度 |
| 2×Super TaqMan OneStep Buffer | 12.5μl | 1× |
| Forward Primer,10μM | 0.5μl | 0.2μM |
| Reverse Primer,10μM | 0.5μl | 0.2μM |
| Probe,10μM | 0.5μl | 0.2μM |
| Super OneStep Enzyme | 1.0μl | |
| RNA Template | Xμl | 10 pg~100ng |
| RNase-Free Water | up to 25μl |
注意:
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果,可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。
2)使用的探针浓度,与使用的荧光定量PCR仪、探针种类、荧光标记物质种类有关,实际使用时请参照仪器说明书,或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。
3)通常RNA模板的量以10 pg-100ng为参照,因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,以确定最佳的模板使用量。
3、混匀,短暂离心,将溶液收集到管底。
4、RT-PCR反应条件:
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 逆转录 | 45℃ | 20 min | |
| PCR预变性 | 95℃ | 2-5 min | |
| 变性 | 95℃ | 15 s | 30-40个循环 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 30-45 s |
注意:
1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、2-5 min条件下实现酶的活化。
2)建议采用两步法PCR反应程序,若因使用Tm值较低的引物等原因,得不到良好的实验结果时,可尝试进行三步法PCR扩增,退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。
储存条件:-20℃,避免反复冻融
高效多重PCR Mix价格关键词:高效多重PCR Mix,WE0124,Super Multiplex PCR Mix
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高效多重PCR Mix价格
¥150 - 2010









