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- 技术资料
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99
- 保质期:
3个月
- 供应商:
北京诺博莱德科技有限公司
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已收到实际货物为准
SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×)
产品简介:
本试剂为配制SDS-PAGE浓缩胶缓冲液,可用于配制各种浓度的变性及非变性PAGE凝胶,方便、快捷。产品中已加入10%SDS,使用时不用另外加入。
产品组成:
自备材料:
1、 凝胶模具
2、 Acr-Bis(30%,29:1)
3、 10%APS(过硫酸铵)
4、 TEMED
5、 蒸馏水
SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×)
操作步骤(仅供参考):
根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度,最佳胶浓度请参考附表1。
(一)灌制分离胶(各试剂使用量请参考附表2)
1、参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。(注:加入上层筛板有助于加样时保持填料与样品均匀接触,是否加入上层筛板可根据实际情况选择。)
2、将不同体积的Acr-Bis(30%,29:1)、分离胶缓冲液和蒸馏水在小烧杯或试管中混合。
3、加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
4、在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel,凝胶液加至约距前玻璃板顶端
1.5 cm或距梳齿约0.5cm即可),然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1~2cm的水层,
使凝胶表面保持平整。
6、 静置30~60min,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,表面凝胶已聚合。
(二)灌制浓缩胶(各试剂使用量请参考附表3)
1、小心倾倒出覆盖在分离胶上的水层。
2、将不同体积的Acr-Bis(30%,29:1)、浓缩胶缓冲液和蒸馏水在一个小烧杯或试管中混
合。
3、加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
4、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
5、将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
6、静置10~20min,等待浓缩胶聚合。
7、待凝胶聚合后,小心地拔出梳子,以免破坏加样孔。
8、进行常规电泳操作。
注意事项:
1、 过硫酸铵配制成10%溶液后应当-20℃保存。应尽量减少室温存放时间以防失效。有效避免失效的方法是分成小份,-20℃保存,用2~3次,剩余的弃用,亦可4℃保存几天。
2、 TEMED易挥发,使用后请盖紧瓶盖。另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切,可通过适当调节TEMED的用量,控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度。
3、 配制聚丙烯凝胶的过程中,如果室温较低,可以置于37℃放置,加速凝固。
4、 Acr-Bis(30%,29:1)有轻微神经毒性,请小心操作。
5、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×)
有效期: 3个月有效。
附表:
附表1.不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围
产品简介:
本试剂为配制SDS-PAGE浓缩胶缓冲液,可用于配制各种浓度的变性及非变性PAGE凝胶,方便、快捷。产品中已加入10%SDS,使用时不用另外加入。
产品组成:
| 编号 名称 |
P0896 | P0896 | Storage |
| SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×) | 100ml | 500ml | 4℃ |
| 使用说明书 | 1份 | ||
自备材料:
1、 凝胶模具
2、 Acr-Bis(30%,29:1)
3、 10%APS(过硫酸铵)
4、 TEMED
5、 蒸馏水
SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×)
操作步骤(仅供参考):
根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度,最佳胶浓度请参考附表1。
(一)灌制分离胶(各试剂使用量请参考附表2)
1、参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。(注:加入上层筛板有助于加样时保持填料与样品均匀接触,是否加入上层筛板可根据实际情况选择。)
2、将不同体积的Acr-Bis(30%,29:1)、分离胶缓冲液和蒸馏水在小烧杯或试管中混合。
3、加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
4、在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel,凝胶液加至约距前玻璃板顶端
1.5 cm或距梳齿约0.5cm即可),然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1~2cm的水层,
使凝胶表面保持平整。
6、 静置30~60min,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,表面凝胶已聚合。
(二)灌制浓缩胶(各试剂使用量请参考附表3)
1、小心倾倒出覆盖在分离胶上的水层。
2、将不同体积的Acr-Bis(30%,29:1)、浓缩胶缓冲液和蒸馏水在一个小烧杯或试管中混
合。
3、加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
4、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
5、将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
6、静置10~20min,等待浓缩胶聚合。
7、待凝胶聚合后,小心地拔出梳子,以免破坏加样孔。
8、进行常规电泳操作。
注意事项:
1、 过硫酸铵配制成10%溶液后应当-20℃保存。应尽量减少室温存放时间以防失效。有效避免失效的方法是分成小份,-20℃保存,用2~3次,剩余的弃用,亦可4℃保存几天。
2、 TEMED易挥发,使用后请盖紧瓶盖。另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切,可通过适当调节TEMED的用量,控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度。
3、 配制聚丙烯凝胶的过程中,如果室温较低,可以置于37℃放置,加速凝固。
4、 Acr-Bis(30%,29:1)有轻微神经毒性,请小心操作。
5、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×)
有效期: 3个月有效。
附表:
附表1.不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围
| SDS-PAGE分离胶浓度 | 最佳分离范围 |
| 6%胶 | 50-150kD |
| 8%胶 | 30-90kD |
| 10%胶 | 20-80kD |
| 12%胶 | 12-60kD |
| 15%胶 | 10-40kD |
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