大肠杆菌Rosetta(DE3)plysS感受态细胞 克隆与

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

大肠杆菌Rosetta(DE3)plysS感受态细胞 克隆与表达由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于生化科研试验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多大肠杆菌Rosetta(DE3)plysS感受态细胞等克隆与表达产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：大肠杆菌Rosetta(DE3)plysS感受态细胞 克隆与表达
规格：0.1mL*10
英文名：E.coli Rosetta(DE3)plysS Rosetta Competent Cell
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
编号：BTN130558
 Rosetta(DE3)pLysS是Rosetta(DE3)的衍生菌株，为高度严紧表达宿主菌，一般用于毒性含真核蛋白靶蛋白表达，lac透性酶突变，可以控制表达水平，提供稀有密码子tRNAs。抗性为*霉素(34μg/ml)。

基因型：F-ompT hsdSB(rB- mB-)gal dcm lacY1(DE3)plysS pRARE(CmR)。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

我公司的大肠杆菌Rosetta(DE3)plysS感受态细胞 克隆与表达，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：

·Baker甲醛*中性固定液
编号：BTN131276
英文名称：Baker Fixative Solution
规格：250mL
本产品主要成分为中性甲醛水溶液和10%*化*。本固定液为组织和细胞化学技术中最常用的固定液之一，适合各种染色方法。本产品固定时间2～4小时，温度0～4℃。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

·细胞计数液(Vi-CELL)
编号：BTN131200
英文名称：Cell Counting Reagent(Vi-CELL)
规格：100次
本产品主要成分为中性甲醛水溶液和10%*化*。本固定液为组织和细胞化学技术中最常用的固定液之一，适合各种染色方法。本产品固定时间2～4小时，温度0～4℃。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

·HRP标记亲和素
编号：BTN131086
英文名称：HRP-Avidin
规格：2mg
本产品为辣根过氧化物酶标记的亲和素干粉，每摩尔亲和素含有1-2mol辣根过氧化物酶，结合能力为5-10μg生物素/mg蛋白≥80过氧化物酶单位/mg蛋白。本品常用在内源磷酸酶会对实验造成影响的免疫组化中使用以及免疫印记。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·抑*肽酶溶液(5mg/mL)
编号：BTN130536
英文名称：Bestatin Solution
规格：5mL
本产品为5mg/mL抑*酶的甲醇溶液，工作浓度为40μg/mL(130μM)。抑*肽酶(Bestatin)，又称*肽酶抑制剂、乌*美司(ubenimex)，分子量是308.4，是一种竞争性的蛋白酶抑制剂，可抑制*肽酶B、白*酸*基肽酶、三肽*肽酶和哺乳动物细胞表面的*基肽酶等蛋白酶的活性，不能抑制羧肽酶。

储存条件：低温 运输，-20℃保存，有效期一年。


大肠杆菌Rosetta(DE3)plysS感受态细胞 克隆与表达关键词：大肠杆菌Rosetta(DE3)plysS感受态细胞,BTN130558,E.coli Rosetta(DE3)plysS Rosetta Competent Cell


·超快核酸银染试剂盒
编号：BTN81104
英文名称：Rapid Silver Stain for Nucleic Acid
规格：1000mL
核酸银染的原理是银离子(Ag+)可与核酸形成稳定的复合物，然后用还原剂如甲醛在碱性环境下使Ag+还原成银颗粒，可把核酸电泳带染成黑褐色。它主要用于聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳染色，也用于琼脂糖凝胶染色，其灵敏度比EB高200倍，常用于检测SSR标记、SNP标记。但常规的银染方法由固定、氧化、染色、显影、终止等步骤组成，操作十分繁琐，尤其不适用于大批量实验。为解决此问题，本公司推出本产品。

产品特点：
1.超快，整个过程只需要20分钟。
2. 操作简单，只有染色和显影两步。
3. 灵敏度跟常规方法相当，EB高200倍，能检测到10ng的DNA 条带。
4. 两个成分都是现用现配，可重复性好。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A组分一(干粉)	2g
溶液A组分二，10×	100ml
溶液A组分三，10×	100ml
溶液B组分一，10×	100ml
溶液B组分二	5ml
说明书	1份

注：1000mL规格指可配制的溶液A(染色液)的体积，实际使用次数根据PAGE胶大小不同而不同。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：

一：配制溶液A100mL
需要配制的溶液A(染色液)的体积完全跟PAGE胶的大小相关，一般的mini-PAGE胶需要20-30mL。下面的用量是针对配制100mL溶液A。如果配制的溶液A的体积不是100mL，则需按比例改变各成分用量。在一干净烧杯中加入下列成分搅拌混匀即可。
溶液A需要新鲜配制。

成分	用量
去离子水	80ml
溶液A成分一	0.2g
溶液A成分二	10ml
溶液A组分三	10ml

二：配制溶液B100mL
需要配制的溶液B(显色液)的体积完全跟PAGE胶的大小相关，一般的mini-PAGE胶需要20-30mL。下面的用量是针对配制100mL溶液B。如果配制的溶液B的体积不是100mL，则需按比例改变各成分用量。在一干净烧杯中加入下列成分搅拌混匀即可。
溶液B需要新鲜配制。

成分	用量
去离子水	89.5ml
溶液B成分一	10ml
溶液B组分二	0.5ml

三：染色
1. PAGE电泳结束后，将PAGE胶转移到装有去离子水的瓷盘中，漂洗2次，每次2分钟。
2. 将PAGE胶转移到适当体积的溶液A，使溶液A在轻柔摇晃过程中能够淹没PAGE胶。室温染色时间10分钟。
3. 倒掉溶液A，用去离子水快速漂洗2次，每次半分钟。
4. 将PAGE胶转移到适当体积的溶液B，使溶液B在轻柔摇晃过程中能够淹没PAGE胶。室温摇晃直到颜色显现，一般需要10分钟左右。
5. 将PAGE胶置于适当背景下照相。


大肠杆菌Rosetta(DE3)plysS感受态细胞 克隆与表达关键词：大肠杆菌Rosetta(DE3)plysS感受态细胞,BTN130558,E.coli Rosetta(DE3)plysS Rosetta Competent Cell


·长效期SDS-PAGE上样液
编号：BTN100911
英文名称：Stable SDS-PAGE Loading Buffer
规格：1mL
本产品是专门用于长效SDS-PAGE电泳的上样液(5×)，即开即用，简便快捷。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

·PCR法DNA探针标记试剂盒
编号：BTN90604A
英文名称：PCR DNA Labeling Kit
规格：5次
PCR标记的原理是用带标记的dNTP进行PCR，最后得到的PCR产物将带有标记，可以直接用于杂交试验。其原理示意图如下：


产品特点：
1.一站式，本试剂盒提供经过优化的试剂，不需要用户自己摸索。
2. 足够10次50μl体系的常规PCR(用于制备标记反应的模板和设置对照反应)和5次50μl体系的标记反应。
3.一次标记可以得到μg级的双链DNA探针或约700ng的单链DNA探针，足够多次杂交实验用。
4. 既可用于制备双链探针，也可以用于单链探针。
5. 90604A需自备含标记核苷酸的dNTP，90604B和90604C分别含生物素和地高*(代"辛")标记的底物。自备的标记包括fluorescein-dUTP、hydroxycoumarin-dUTP、resorufin-dUTP和aminoallyl-dUTP等。
6. 本产品得到的探针参入率一般为4-5%(每100个核苷酸中有4-5个将带有非同位素标记)，有效降低了空间阻碍，检测效果最佳。
7.可以用于Southern和Northern Blot、原位杂交、菌落和斑点印迹杂交等分析。

试剂盒组成：

成分	规格
2×标记专用PCR Mix	500μl
dNTP，2mM each	50μl
含Biotin-11-dUTP的dNTP	25μL(仅B有)
含DIG-11-dUTP的dNTP	25μL(仅C有)
超纯水	1ml
说明书	1份

注：标记专用PCR Mix不含dNTP。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一：准备工作
1. 按常规的方法设计PCR引物，使探针长度在400-800bp之间。过短则标记参入少，探针杂交信号强度减弱；过长则非特异杂交增加，背景变强。
2. 根据PCR引物优化PCR条件。
3. 由于标记的dNTP比较珍贵，所以本试剂盒不推荐以基因组DNA或其他复杂DNA为模板直接进行PCR标记，而是建议采取下述的两步法标记来提高成功率，即先制备非标记PCR产物，再以之为模板制备标记的PCR产物。
二：非标记PCR产物的制备
4. 设置50μL PCR的反应体系：

成份	用量
2×标记专用PCR Mix	25μl
dNTP，2mM each	5μl
自备的探针引物一(10pmol/μL)	1μL(10μM)
自备的探针引物二(10pmol/μL)	1μL(10μM)
自备的模板DNA	1μg基因组DNA或1ng质粒DNA
超纯水	补到50μL

5. 按已经优化的PCR参数进行PCR。
6.电泳检测和胶回收所需的PCR产物，并定量。用10 pmol引物一般能得到1μg左右的PCR产物(具体取决于PCR产物的长度)。注意：最好采取胶回收而不是PCR回收以避免残留引物干扰后续的标记PCR。
三：标记PCR反应(最好做一个不加标记的对照用于定量)
说明：在设置下面反应时，如果加一种引物，就得到单链标记的PCR产物；如果加两种引物，则得到双链标记的PCR产物。由于双链PCR探针在杂交前虽然要变性成单链后使用，但杂交时变性的双链彼此还会复性，这种复性会与探针-靶DNA杂交反应相竞争，降低杂交效率，因此强烈推荐使用单链标记的DNA探针。

成份	样品	对照
2×标记专用PCR Mix	25μl	25μl
含Biotin-11-dUTP的dNTP或 含DIG-11-dUTP的dNTP或 自备的含其他标记dUTP的dNTP	5μl	不加
dNTP，2mM	不加	5μl
双链标记：探针引物一和引物二 单链标记：探针引物一或引物二	每种50 pmol 一种50 pmol	每种50 pmol 一种50 pmol
上步胶纯化所得PCR产物 (单链标记可用100ng)	10 ng	10 ng
超纯水	补到50μL	补到50μL

 注意：本试剂盒提供的dNTP混合物中，标记底物与非标记底物的比例已经进过优化，如果自备标记dUTP，其与dTTP的最佳比例需要优化，标记不同，比例不同。对DIG-11-dUTP，最佳比例1：3；对BrdUTP，最佳比例为1：1。
7. 按第5步的PCR参数进行标记PCR，但需要进行下列修改：一是循环数增加到35-55个循环。由于模板为纯化后的PCR产物，探针对扩增长度完整性要求不高(长度不均的探针由于能形成网络结构，效果反而更好)，所以可以增加循环数；二是延伸时间增加15秒，因为标记dUTP参入到DNA的速度比常规的dTTP慢；三是降低复性温度5-7℃，因为标记核苷酸参入到DNA后，新模板的Tm值将降低。
8. 标记探针的定量：取标记反应和对照反应的产物1-5μl，在琼脂糖凝胶上跟浓度已知的DNA marker一起电泳，并判断探针的浓度。由于标记反应的PCR产物中额外带有非同位素的配体(生物素，地高*(代"辛")等)、因此其泳动速度将慢于非标记PCR产物(但同位素标记不能用此法)。
 注意：如果扩增的是单链DNA探针，其结合EB的能力远低于双链DNA(EB是嵌合到双链碱基对之间的，而单链DNA没有碱基对，只有一些局部区域折叠形成的有限双链区，因此能结合的EB很少)，因此EB染色的强弱不能准确反应DNA的浓度，可以采用银染定量(跟marker比较)。一般100ng模板按上述条件经过单链PCR扩增可得到700ng左右探针。
9. 剩余的PCR标记产物可以不经过纯化，直接加入(对单链PCR探针)杂或加热变性并急冷后加入(对双链PCR探针)到杂交液中使用。如果暂时不用请放-20℃长期保存。如果需要纯化，请使用乙酸铵/乙醇沉淀法。

我公司生产供应销*(代"售")的克隆与表达正全品类优惠促销，十分期待您的咨询选购大肠杆菌Rosetta(DE3)plysS感受态细胞 克隆与表达。