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北京BTN160688型大肠杆菌TKB1化学感受态细胞价格

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  • 百奥莱博
  • 北京
  • BTN160688-AYB
  • 2025年07月05日
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      干冰运输、-80℃保存

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      长期

    • 英文名

      E.coli TKB1 Chemical Competent Cell

    • 库存

      589

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产销*(代"售")北京BTN160688型大肠杆菌TKB1化学感受态细胞价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


    名称:北京BTN160688型大肠杆菌TKB1化学感受态细胞价格
    品牌:百奥莱博
    编号:BTN160688
    产地:国产|进口
     大肠杆菌TKB1感受态细胞是由BL21(DE3)衍生而来,含有酪*酸激酶(TyrosineKinase)。BL21(DE3)TK感受态细胞,简写为TKB1,带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝,该基因的启动子是LacUV5。本产品作为E.coli B 宿主菌,主要用来进行蛋白表达,细胞内缺少lon蛋白酶和ompT外膜蛋白酶,能够有效避免目的蛋白的降解。
     本产品通过IPTG 诱导表达的T7 RNA聚合酶,允许其下游目的蛋白表达,从而实现对下游目的蛋白的可控诱导型基因表达。TKB1感受态细胞内含有一个能有诱导表达酪*酸激酶基因的质粒(pTK)。TKB1感受态细胞能够转化进去ColE1 Origin 为复制起点的,包含有编码磷酸化目的基团或者蛋白的质粒。如果目的蛋白是构建在一个含有亲和标签的融合表达载体上面,那么对于磷酸化蛋白的纯化就会相对比较容易。从TKB1感受态细胞中纯化得到的目的蛋白,能够用来筛选表达库,或者亲和纯化和蛋白印记酪*酸磷酸化蛋白。

    菌种的基因型为:F-dcm ompT hsdS(rB-mB-)gal λ(DE3)[pTK Tetr]。

    储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。

    自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。

    使用方法:
    1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl,可以根据实际情况分装使用。
    以下实验以50μL感受态细胞为例。
    2. 待感受态细胞处于冰水混合状态时,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被10-100 ng超螺旋质粒DNA 所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴25分钟。
    3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟,晃动会降低转化效率。
    4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,200rpm 振荡培养60分钟使菌体复苏。
    5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含有相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃倒置培养12-16小时。

    注意事项:
    1. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
    2. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(5000rpm,1分钟)收菌后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
    3. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
    4. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

    北京BTN160688型大肠杆菌TKB1化学感受态细胞价格外,我公司正在打折促销以下产品:
    BTN121002 绿如蓝核酸染料(可见光型) DNAGREEN(Visible Light)
    ARB13655 兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)含量测试 Rabbit coagulation factor Ⅱ,fⅡ ELISA KIT
    草甘二磷 cyclic GMP 2439-99-8
    ARB10061 人B细胞连接蛋白(BLNK)Elisa分析 Human b-cell linker protein,blnk ELISA KIT
    9001-51-8 己糖激酶 Hexokinase
    ARB10325 人内皮素(ET)ELISA检测服务 
    CBZ-L-丙*酸 5′-IMP,2Na 1142-20-7
    磷酸盐缓冲液 Z-Gln-OH
    ARB13191 小鼠胰高血糖素样肽1(GLP-1)Elisa定量检测 Mouse ghcagons-like pepfide 1,glp-1 ELISA KIT
    ARB10599 人血小板活化因子(PAF)免费代测 Human platelet activating factor,paf ELISA KIT
    ARB11374 人前列腺素F2α(PGF2α)含量检测 Human prostaglandin f2α,pgf2α ELISA KIT
    ARB11197 人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)检测服务 Human tissue-type plasiminogen actilyse,t-pa ELISA KIT
    磷脂酶A2 Silver sulfate 9001-84-7
    北京BTN160688型大肠杆菌TKB1化学感受态细胞价格关键词:大肠杆菌TKB1化学感受态细胞,BTN160688,E.coli TKB1 Chemical Competent Cell


    ·β-巯基乙醇(蛋白级)
    编号:BTN131052
    英文名称:β-Mercaptoethanol,Protein Grade
    规格:10mL
    本产品用于将蛋白质的二硫键剪切成巯醇的温和的还原剂。也称为β- 巯基乙醇或BME。经常加入到酶溶液中来防止由于半胱*酸巯基氧化/ 二硫键形成造成的催化位点失活;经常作为添加的保护剂使用,终浓度为5 及20mM,含不含EDTA 均可。

    储存条件:常温运输和保存,有效期一年。

    ·单细胞全基因组扩增试剂盒
    编号:BTN100938
    英文名称:Single Cell Whole Genome Amplification Kit
    规格:30次
    本产品是用于从单细胞(或数个细胞)中制备和扩增全基因组的试剂盒,它是整合单细胞裂解液和全基因组扩增试剂盒而成。

    产品特点:
    1. 即开即用,不需要单独准备所需试剂。
    2.可以扩增单个细胞的基因组达上万倍。
    3. 具有全基因组扩增的所有特点,包括高产量和高保真性。
    4.可使用各种来源的样品,包括培养细胞和胚胎细胞等。
    5.产物可用于多种后续试验,包括多重PCR、长片端PCR、定量PCR、克隆、文库构建、单倍型分析、测序、基因芯片分析、各种遗传分析(片段差异,微卫星差异、SNP、STR)等。

    试剂盒组成:

     
    成分 规格
    单细胞裂解液A 100μl
    单细胞裂解液B 100μl
    单细胞专用WGA Mix 0.3ml
    Phi 29 DNA聚合酶(10U/μL) 15μl
    说明书 1份


    储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。

    使用方法:
    1. 将细胞悬浮在自备的PBS缓冲液或其他合适的缓冲液中,在显微镜下用毛细管转移单个细胞(或数个细胞,总体积不超过2.5μL)到含有2.5μl单细胞裂解液A的0.2mL PCR管中,室温放置2分钟。如果使用纯化好的DNA溶液,则直接将2.5μl的DNA溶液和2.5μl的单细胞裂解液A混合,室温放置2分钟。
    2. 加入5μl 单细胞裂解液B,95℃保温5分钟,室温短暂离心半分钟。
    3. 然后冰上放置5-10分钟。
    4. 加入10μl 单细胞专用WGA Mix,轻柔吹打混合均匀。
    5. 加入0.5μl Phi 29 DNA聚合酶(10U/μL),轻柔吹打混合均匀。
    6. 30℃保温3-12小时。最好使用PCR仪进行30℃保温并打开热盖保温。如果采用30℃水浴,最好在样品管中加入30-50μl石蜡油以防水分蒸发,因为30℃长时间的水浴也能使水分蒸发到管壁,从而改变反应体系中各成分的浓度、降低WGA反应效率。如果模板DNA量比较高,WGA三小时即可检测到DNA扩增。
    7. 65℃保温10分钟使phi29 DNA聚合酶灭活。注:由于phi29 DNA聚合酶有DNA外切活性,所以最好将其灭活以免干扰后续反应。
    8. 立即取3-5μl WGA反应液进行电泳检测扩增效果。
     注意:WGA缓冲液中不含有甘油和电泳染料,所以需要先加上样缓冲液。
    9.扩增的DNA可以用于后续试验或冰箱长期保存。


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    ·尿嘧啶切刻酶
    编号:BTN130666
    英文名称:Uracile Nicking Enzyme
    规格:50U
    本产品在尿嘧啶位置产生一个单核苷酸缺口,它是尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG)和DNA糖基化酶-裂解酶 Endo Ⅷ的混合物。UDG催化尿嘧啶碱基的切割,形成一个脱碱基(脱嘧啶)位点,但保持磷酸二酯骨架结构完整。Endo Ⅷ的裂解酶活力使脱碱基位点 3´和5´端的磷酸二酯键断裂,释放无碱基的脱氧核糖。其反应示意图如下:
    尿嘧啶切刻酶反应示意图

    产品特点:
    1.PCR产物的克隆;
    2.在DNA的尿嘧啶处产生缺口。

    产品组成:
    成份 规格
    尿嘧啶切刻酶(1000U/mL) 50μL
    10×Buffer 1mL
    使用手册 1份


    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    活性定义:1单位指在10μl反应体系中,37℃条件下,15分钟使10pmol的含有单一尿嘧啶碱基的34bp寡核苷酸双链产生切刻所需要的酶量。



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