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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
干冰运输、-80℃保存
- 保质期:
长期
- 英文名:
E.coli TKB1 Chemical Competent Cell
- 库存:
589
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京BTN160688型大肠杆菌TKB1化学感受态细胞价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京BTN160688型大肠杆菌TKB1化学感受态细胞价格
品牌:百奥莱博
编号:BTN160688
产地:国产|进口
大肠杆菌TKB1感受态细胞是由BL21(DE3)衍生而来,含有酪*酸激酶(TyrosineKinase)。BL21(DE3)TK感受态细胞,简写为TKB1,带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝,该基因的启动子是LacUV5。本产品作为E.coli B 宿主菌,主要用来进行蛋白表达,细胞内缺少lon蛋白酶和ompT外膜蛋白酶,能够有效避免目的蛋白的降解。
本产品通过IPTG 诱导表达的T7 RNA聚合酶,允许其下游目的蛋白表达,从而实现对下游目的蛋白的可控诱导型基因表达。TKB1感受态细胞内含有一个能有诱导表达酪*酸激酶基因的质粒(pTK)。TKB1感受态细胞能够转化进去ColE1 Origin 为复制起点的,包含有编码磷酸化目的基团或者蛋白的质粒。如果目的蛋白是构建在一个含有亲和标签的融合表达载体上面,那么对于磷酸化蛋白的纯化就会相对比较容易。从TKB1感受态细胞中纯化得到的目的蛋白,能够用来筛选表达库,或者亲和纯化和蛋白印记酪*酸磷酸化蛋白。
菌种的基因型为:F-dcm ompT hsdS(rB-mB-)gal λ(DE3)[pTK Tetr]。
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl,可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞处于冰水混合状态时,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被10-100 ng超螺旋质粒DNA 所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴25分钟。
3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟,晃动会降低转化效率。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,200rpm 振荡培养60分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含有相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃倒置培养12-16小时。
注意事项:
1. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
2. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(5000rpm,1分钟)收菌后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
3. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
4. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
除北京BTN160688型大肠杆菌TKB1化学感受态细胞价格外,我公司正在打折促销以下产品:
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北京BTN160688型大肠杆菌TKB1化学感受态细胞价格关键词:大肠杆菌TKB1化学感受态细胞,BTN160688,E.coli TKB1 Chemical Competent Cell
·β-巯基乙醇(蛋白级)
编号:BTN131052
英文名称:β-Mercaptoethanol,Protein Grade
规格:10mL
本产品用于将蛋白质的二硫键剪切成巯醇的温和的还原剂。也称为β- 巯基乙醇或BME。经常加入到酶溶液中来防止由于半胱*酸巯基氧化/ 二硫键形成造成的催化位点失活;经常作为添加的保护剂使用,终浓度为5 及20mM,含不含EDTA 均可。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
·单细胞全基因组扩增试剂盒
编号:BTN100938
英文名称:Single Cell Whole Genome Amplification Kit
规格:30次
本产品是用于从单细胞(或数个细胞)中制备和扩增全基因组的试剂盒,它是整合单细胞裂解液和全基因组扩增试剂盒而成。
产品特点:
1. 即开即用,不需要单独准备所需试剂。
2.可以扩增单个细胞的基因组达上万倍。
3. 具有全基因组扩增的所有特点,包括高产量和高保真性。
4.可使用各种来源的样品,包括培养细胞和胚胎细胞等。
5.产物可用于多种后续试验,包括多重PCR、长片端PCR、定量PCR、克隆、文库构建、单倍型分析、测序、基因芯片分析、各种遗传分析(片段差异,微卫星差异、SNP、STR)等。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 单细胞裂解液A | 100μl |
| 单细胞裂解液B | 100μl |
| 单细胞专用WGA Mix | 0.3ml |
| Phi 29 DNA聚合酶(10U/μL) | 15μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 将细胞悬浮在自备的PBS缓冲液或其他合适的缓冲液中,在显微镜下用毛细管转移单个细胞(或数个细胞,总体积不超过2.5μL)到含有2.5μl单细胞裂解液A的0.2mL PCR管中,室温放置2分钟。如果使用纯化好的DNA溶液,则直接将2.5μl的DNA溶液和2.5μl的单细胞裂解液A混合,室温放置2分钟。
2. 加入5μl 单细胞裂解液B,95℃保温5分钟,室温短暂离心半分钟。
3. 然后冰上放置5-10分钟。
4. 加入10μl 单细胞专用WGA Mix,轻柔吹打混合均匀。
5. 加入0.5μl Phi 29 DNA聚合酶(10U/μL),轻柔吹打混合均匀。
6. 30℃保温3-12小时。最好使用PCR仪进行30℃保温并打开热盖保温。如果采用30℃水浴,最好在样品管中加入30-50μl石蜡油以防水分蒸发,因为30℃长时间的水浴也能使水分蒸发到管壁,从而改变反应体系中各成分的浓度、降低WGA反应效率。如果模板DNA量比较高,WGA三小时即可检测到DNA扩增。
7. 65℃保温10分钟使phi29 DNA聚合酶灭活。注:由于phi29 DNA聚合酶有DNA外切活性,所以最好将其灭活以免干扰后续反应。
8. 立即取3-5μl WGA反应液进行电泳检测扩增效果。
注意:WGA缓冲液中不含有甘油和电泳染料,所以需要先加上样缓冲液。
9.扩增的DNA可以用于后续试验或冰箱长期保存。
北京BTN160688型大肠杆菌TKB1化学感受态细胞价格关键词:大肠杆菌TKB1化学感受态细胞,BTN160688,E.coli TKB1 Chemical Competent Cell
·尿嘧啶切刻酶
编号:BTN130666
英文名称:Uracile Nicking Enzyme
规格:50U
本产品在尿嘧啶位置产生一个单核苷酸缺口,它是尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG)和DNA糖基化酶-裂解酶 Endo Ⅷ的混合物。UDG催化尿嘧啶碱基的切割,形成一个脱碱基(脱嘧啶)位点,但保持磷酸二酯骨架结构完整。Endo Ⅷ的裂解酶活力使脱碱基位点 3´和5´端的磷酸二酯键断裂,释放无碱基的脱氧核糖。其反应示意图如下:
产品特点:
1.PCR产物的克隆;
2.在DNA的尿嘧啶处产生缺口。
产品组成:
| 成份 | 规格 |
| 尿嘧啶切刻酶(1000U/mL) | 50μL |
| 10×Buffer | 1mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指在10μl反应体系中,37℃条件下,15分钟使10pmol的含有单一尿嘧啶碱基的34bp寡核苷酸双链产生切刻所需要的酶量。
我公司生产供应销*(代"售")的克隆与表达正全品类优惠促销,十分期待您的咨询选购北京BTN160688型大肠杆菌TKB1化学感受态细胞价格。
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文献和实验β-半乳糖苷酶活性,在含有X-gal培养板上为白色菌落,而载体自身环化后转化的细菌为蓝色菌落。由于这种颜色标志,重组子与非重组子的区别一目了然,可以很容易将之区分。 (二)限制酶图谱筛选(电泳筛选) (三)核酸杂交筛选 (四)免疫化学筛选 四.操作步骤 1.将大肠杆菌DH5α 在LB平板上划线,37 ℃培养16-20hr(或过夜) 2.从平板上挑取一个2-3mm大小的单菌落移至2-5ml LB液体培养基中,37
感染体系配合,实现组织特异性基因敲减。 *与英茂盛业病毒表达系统兼容。 原理 pRI-CMV/GFP-miRNA载体采用CMV启动子高效表达人工设计的miRNA,后者从肠道转录本被加工,进而导致特异性的miRNA降解。 服务流程 1)针对特定基因,设计miRNA序列,合成寡核苷酸 并退火成双链DNA。 2)将DNA与pRI-CMV/GFP-miRNA载体连接,转化大肠杆菌 感受态细胞。 3)测序
Capsule HF-120型微量离心装置,Millipore公司; 7. THZ-C恒温振荡器,江苏省太仓市实验设备厂; 8. BL150S型电子天平,德国Sartorius公司; 9. GB 1302型天平,Mettler-Toledo仪器(上海)有限公司 10. C-90-1型电热恒温水浴锅,广州市越秀区医疗器械厂; 11. 微波炉,日本Sharp; 12. DYCD-31D型水平电泳槽,北京六一仪器厂; 13
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