北京TdT加尾法DNA生物素标记试剂盒价格厂家

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百奥莱博专业生产供应北京TdT加尾法DNA生物素标记试剂盒价格厂家，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：北京TdT加尾法DNA生物素标记试剂盒价格厂家
产地：国产|进口
规格：5次
英文名：TdT-Tailing DNA Labeling Kit
编号：BTN90605B
本试剂盒是基于TdT末端转移酶能够在DNA的3´端添加dNTP尾巴的原理而设计，该反应的示意图如下：


产品特点：
1.快速，15分钟即可完成标记反应。
2. 不但可用于单链DNA和DNA Oligo标记，还可用于3´突出的双链DNA标记，但后者标记效率稍低。
3.可用同位素底物和非同位素底物(生物素和地高*(代"辛")标记的核苷酸等)。
4. 提供不带标记核苷酸、带生物素标记核苷酸和带地高*(代"辛")标记核苷酸三种选择。
5. 同时提供非标记的dATP，用户可以用其调节加尾长短和标记核苷酸掺入比例。
6. 标记的探针可用于电泳迁移率实验(EMSA)、原位杂交(ISH)、Northern Blot(不推荐用于低丰度RNA检测)、小RNA Northern、Southern Blot(不推荐用于单拷贝基因检测)、菌落杂交、斑点印迹杂交分析等。

试剂盒组成：

 

成分	规格
TdT缓冲液，5×	20μl
TdT(末端转移酶，10U/μL)	10μl
dATP，2mM	5μl
标记核苷酸	(A、B、C不同，见注)
超纯水	1ml
说明书	1份

注：A型用于自选标记，用户需自备标记核苷酸，本产品不提供标记核苷酸；B型提供5μl Biotin-11-dUTP；C型提供含5μl DIG-11-dUTP。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在0.2mL微量离心管中按下表设置一个20μl体系的标记反应(如果需要标记更多探针，请增加标记体积而不要增加探针DNA的浓度)：

成份	用量
探针DNA	100-200 pmol
TdT Buffer，5×	4μl
标记核苷酸，1mM (A型需自备标记核苷酸)	1μl
dATP，2mM	(见下注)
TdT末端转移酶(10U/μL)	2μl
超纯水	补到20μl

注：dATP可以不加，但这样得到的加尾全部是标记核苷酸，由于空间阻碍，灵敏度不一定最佳。如果杂交效果不好，掺入一定比例的dATP到标记核苷酸中，以控制标记的密度，提高比活。具体比例如何可以自己优化。
2. 37℃反应15分钟，延长到30分钟也可以。如果没有非标记核苷酸存在，一般可以加尾3-5个Biotin或DIG标记的核苷酸(标记物空间阻碍抑制延长)；如果有在加尾反应中加入一定比例的非标记核苷酸dATP(其他dNTP也可，只是本试剂盒只提供dATP而已)，每条探针上可加上约100个核苷酸，平均含5个标记核苷酸
3. 70℃ 10分钟灭活TdT酶。
4. 如果需要，可以PAGE电泳+银染(相关试剂需要另购)检测标记效率，带标记的探针泳动速度将低于没标记的探针。
5. 如果是非同位素标记，探针不需纯化可以直接用于杂交。如果需要纯化非同位素标记的探针，请不要酚/*仿抽提，因为非同位素标记物一般会使探针DNA进入有机相而丢失。
6. 使用时需将探针以1-8 ng/μL的终浓度加入到杂交液中(如果探针是双链DNA，加入前还需热变性)。如果不立即使用，非同位素标记的探针DNA可-20℃长期放置一年，同位素标记的探针DNA不能放置。

我公司的北京TdT加尾法DNA生物素标记试剂盒价格厂家，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：
25322-68-3 PEG6000   聚乙二醇
ARB12865 小鼠去甲肾上腺素(NE)尿液中含量检测 Mouse noradrenaline,ne ELISA KIT
Tris-HCl缓冲液(pH8.8)  1mol/L 100ml|500ml
PY02-288  MFC培养基  250克  
ARB12082 大鼠内脏脂肪特异性丝*酸蛋白酶抑制剂(vAspin)含量检测 Rat visceral adipose-specific serine protease inhibitor,vaspin ELISA KIT
ARB13806 豚鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量分析 Guinea pig tumor necrosis factor α,tnf-α ELISA KIT
ARB11775 人解整合素样金属蛋白酶33(ADAM33)elisa检测操作说明书 
ARB13058 小鼠肾上腺素能A1A受体(ADRA1A)代做ELISA实验 Mouse adrenergic alpha-1a receptor,adra1a ELISA KIT
CYB161058 鸡IgG(液体-pH7.2PBS)
PY02-160  明胶培养基基础  250克  
4,4-双(二甲*基)硫代二*甲酮 Acid brilliant red 1226-46-6
ARB13690 兔抑瘤素M(OSM)酶标法分析 Rabbit oncostatin-m,osm ELISA KIT
ARB13701 兔环磷酸腺苷(cAMP)ELISA代测服务 Rabbit cyclic adenosine monophosphate,camp ELISA KIT
BL1295 青链霉素混合液(100×)
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ARB12174 大鼠白介素9(IL-9)ELISA检测服务 Rat interleukin 9,IL-9 ELISA KIT
F030224 HRP标记兔抗牛IgG抗体 Rabbit Anti-Bovine IgG*HRP
59865-13-3 CYCLOSPORIN A 环孢霉素A
ARB11257 人胃蛋白酶(PP)Elisa方法检测 Human pepsin,pp ELISA KIT
BTN131128 动物种属鉴定PCR Mix Animal DNA Barcoding PCR Mix
ARB14152 大鼠血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)代做ELISA实验 
5-*-4*-3-吲哚N-乙酰-β-D-*基半乳糖苷 Alizarin red 129572-48-1
BL1170 通用基因组DNA提取试剂盒
ARB11187 人孤腓肽(OFQ/N)含量测试 Human orphanin fq/nociceptin,ofq/n ELISA KIT
亮绿指示剂   100ml
BL1183 亲和层析柱30ml(2.3*10)
脱落酸 BDU 14375-45-2
56-45-1 L-Serine  丝*酸
BL0936 生物素化羊抗人IgG抗体
ARB11886 人磷脂酰丝*酸(PS)代做ELISA实验 Human phosphatidylserine,ps ELISA KIT
ARB13670 兔主要组织相容性复合体I类(MHCI/RLAI)ELISA检测服务 Rabbit major Histocomp*(代"a")tibility complexi,mhci/rlai ELISA KIT
ARB12682 大鼠端粒酶(TE)Elisa分析 Rat telomerase,te ELISA KIT
ARB10555 人发动蛋白2(DNM2)含量测试 Human dynamin 2,dnm2 ELISA KIT
PLPD固定液   500ml
ARB11170 人单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA代测服务 Human monocyte chemotactic protein 1/monocyte chemotactic and activating factor,mcp-1/mcaf ELISA KIT
5934-29-2 L-Histidine L-组*酸盐*(代"酸")盐
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·柱式BAC载体DNA提取试剂盒
编号：BTN90607
英文名称：BAC carrier DNA column extraction kit
规格：50次
BAC是专门用于克隆长片段插入片段的载体，可以插入的片段一般在30-300 Kb，平均长度为130 Kb。但用常规的质粒DNA提取方法提取15 Kb以上的质粒DNA效果都不尽人意，为此本公司对常规的方法进行了诸多改良。

试剂盒特点：
1. 使用于不超过 100 kb的大型质粒DNA，包括BAC、PAC、P1和Cosmid等。如果超过100 kb，建议使用沉淀法或离子交换法。
2. 每 mL细菌培养液可纯化到50-150 ng左右的BAC和其他大型质粒DNA。
3. 安全，无酚*仿等危险的有机物抽提。
4. 柱式操作，比经典的沉淀法操作简单，重复性好，每次都能获得理想效果。
5. 得到的DNA 纯净，可以直接用于PCR、酶切和测序，不需要再纯化。
6.超值，性价比高。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	13ml
溶液B	13ml
溶液C	18ml
RNase A溶液(10mg/mL)	0.75ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存(RNase A溶液需要4℃保存)，有效期一年。

使用方法：
1. 接种单个菌落到 2-5mL LB培养基中，37℃摇晃过夜培养。注意：不要使用Terrific Broth或2×YT培养基等高营养培养基，因为这样得到的菌液细菌密度太高，纯化BAC时，蛋白质和RNA污染较多，反而会影响BAC的产率。
2. 12000～15000×g 4℃离心5分钟，弃上清(培养基)，再短暂离心，吸弃残留液体(培养基)，得到细菌沉淀。
3. 用 250μL溶液A(第一次用前需先将全部RNase A溶液加入到13mL溶液A中，摇匀后再取用。未用完的溶液A最好在4℃保存)重悬细胞沉淀，必要时用枪头充分吹打使菌体重悬已保证没有成团的细菌块。
4. 冰上放置5分钟。
5. 加入250μL溶液B(如果溶液B有沉淀，用前须37℃加热溶解后冷却到室温方可使用)，温和反复颠倒混匀4-6次，看到溶液变粘即可。此步处理不能超过5分钟，否则DNA的碱损伤比较严重。千万不要剧烈振荡，否则基因组DNA 断裂产生的片段非常容易污染BAC DNA。
6. 冰上放置4分钟。注意：一定要严格控制时间，时间超过4分钟，BAC产率将大大降低。
7. 加入350μL溶液C，轻柔颠倒混匀4-6次，可见白色沉淀物产生。
8. 冰上放置5分钟。
9.室温 12000～15000g离心10分钟，小心将上清液转移到离心吸附柱中。由于此时的溶液比重较大，有时候出现沉淀漂浮是正常现象，取上清时避开漂浮的沉淀即可。
10. 静置 2分钟以让BAC DNA与吸附柱充分结合，此步十分重要。
11.室温 12000～15000g离心1分钟，弃收集管中的废液。
12. 加入500μL的通用洗柱液，室温12000～15000g离心1分钟，弃收集管中废液。注意：通用洗柱液中含乙醇，用后需要将盖拧紧存放，否则乙醇会挥发。
13. 重复上步1次。
14.室温 12000～15000g离心1分钟，甩干残留液体。此步不能省略，否则残留乙醇会影响DNA的后续使用(如DNA上样时不能沉淀到加样孔中)。
15. 将离心吸附柱置于一个新的1.5mL塑料离心管(自备)中，加入30-50μL 65-80℃预热的DNA 洗脱液，室温放置2分钟。常温的DNA 洗脱液也可以用于洗脱，但产量稍微有所降低。
16.室温 12000～15000g离心1分钟，离心管底溶液即BAC DNA。
17. 由于百奥莱博的吸附柱结合DNA 能力较强，如果再加适量DNA洗脱液到离心吸附柱中，往往还能洗脱下很多BAC DNA(相当于第一次洗脱的20-30%)，但注意不要使用上步得到的DNA 洗脱液来洗脱。
18. 得到的BAC DNA即可用于后续的检测或实验。

其他处理：
1. 如果要制备无内毒素BAC DNA，则需要用液相内毒素清除剂(需要另购)处理BAC DNA溶液。或者在提取BAC DNA之前，用菌体内毒素清除剂(需要另购)处理细菌。
2. 如果有基因组 DNA污染，可以用线状DNA 清除剂(需要另购)将其酶解。
3. 如果有 RNA污染，可以加入RNase酶解，然后用酚*仿抽提，再用乙醇沉淀。
4. 如果有蛋白质污染，可以用酚*仿抽提，再用乙醇沉淀。

我公司正在优惠促销探针标记及检测等系列产品，期待您的咨询选购北京TdT加尾法DNA生物素标记试剂盒价格厂家。