北京现货大肠杆菌TOP10化学感受态细胞哪里买

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名称：北京现货大肠杆菌TOP10化学感受态细胞哪里买
编号：BTN80806
英文名：E.coli TOP10 Chemical Competent Cell
规格：0.1mL*10
品牌：百奥莱博
 本产品是采用大肠杆菌TOP10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。该菌株是一种用于铺制与培养质粒平板和粘粒平板的重级缺陷的抑制型株，其φ80lacZΔM15基因产物可与载体编码的β-半乳糖苷酶*基端实现α 互补，可用于蓝白斑筛选。使用pUC19质粒检测，转化效率可达108。本感受态细胞具有链霉素抗性。

菌株的基因型：F-mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80 lacZΔM15ΔlacX74 recA1 araΔ139Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL(Strr)endA1 nupG。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

北京现货大肠杆菌TOP10化学感受态细胞哪里买极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·AMV逆转录酶
编号：BTN90502
英文名称：AMV Reverse Transcriptase
规格：200U
AMV逆转录酶分离自禽类成髓细胞瘤病毒(AMV)，其方法由Houts等人的方法改进而来。分离得到的酶是分子量为157KD的αβ全酶。本酶经高度纯化，完全无核酸酶污染。本酶可用于cDNA合成，也可用于RNA和DNA的双脱氧测序。AMV逆转录酶以总RNA或polyA+ RNA为模板，具有以RNA为模板的DNA聚合酶活性，DNA为模板的DNA聚合酶活性和RNase H酶活性，最适反应温度在42-55℃，最高可达60℃，如果使用焦磷酸*，最适温度为37-41℃。按照标准使用方法可以得到长至10-12 kb cDNA。本AMV逆转录酶比普通AMV逆转录酶和MMLV逆转录酶能耐受更高的温度和合成更长的cDNA。

产品特点：
1．高灵敏度,可以1ng的总RNA进行cDNA合成。
2．反应温度可升高到60℃，可有效打开RNA二级结构，适用于二级结构复杂的RNA模板。
3．可合成长至10-12kb的cDNA。
4．可用于first strand cDNA合成、RT-PCR、RNA测序和双脱氧法DNA测序、引物延伸和DNA片段的3´-末端标记。
5．本酶具有内源性的RNase H活性，所以最好不要用于cDNA文库的构建。

产品组成：

 

成分	规格
AMV 逆转录酶(10U/μL)	20μl
5×AMV Buffer	200μl
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：以poly(rA)为模板，以oligo(dT)12-18 为引物，在37℃温度下，在10分钟将1nmol的dTMP掺入入到多核苷酸中所需酶量为一个单位。

使用方法：(合成1st-strand cDNA)
1．按下表配制RT反应体系:

加入物	加入量
总RNA 或poly(A)mRNA 或专一的RNA	500-2000ng 50-500ng 0.05pg-500ng
注：RNA样品不能有基因组DNA污染。
Oligo(dT)18(0.5ug/μL) 或随机引物(0.2ug/μL) 或RNA模板专一性引物	1μL 1μL 15-20pmol
注：随机引物于RNA模板的比例跟最后得到的cDNA的平均长度成反比
RNase-free水	补水到11μL

2．70℃保温5分钟后立即冰浴。
3．严格按下表顺序加入各成分：

5×AMV Buffer(本产品提供)	5μL
RNase Inhibitor(40U/μL,自备)	1μL
焦磷酸* 40mM(预热到42℃)	2.5μL
dNTP(10mM each,自备)	2.5μL
AMV逆转录酶	1-3μL(=10-30U)

4．补水使反应终体积为25μL。
5．42℃保温60分钟(对Oligo dT引物或模板专一引物)或37℃保温60分钟(对随机引物)。如果不使用焦磷酸*，反应温度可以提高到42-55℃，最高可达60℃。
6．70℃保温10分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的cDNA可以直接作为PCR模板使用，不需要纯化。50μL Taq DNA聚合酶催化的PCR体系中最多可以使用25μL的RT产物，一般使用10μL AMV催化的RT产物即可。


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·柱式植物DNA提取试剂盒
编号：BTN60602
英文名称：Plant DNA column extraction kit
规格：50次
本试剂盒是在植物DNA提取试剂盒基础上开发的柱式植物基因组DNA提取产品，可以用于多种植物基因组DNA(含叶绿体和线粒体DNA)的快速提取。

产品特点：
1. 纯度高，不含污染和抑制剂，可以直接用于酶切、PCR、real-time PCR、mμLtiplex PCR、RAPD、RFLP、AFLP、Southern Blotting，microsatellite analysis等各种后续分子生物学实验。
2.产率一般在3-30μg/100mg样品。OD260/280一般在1.8以上。DNA片段长度一般在40-50 Kb左右。
3.适用范围广，可以使用于绝大多数植物的各种组织。
4. 不会发生离心柱堵塞现象。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	40ml
溶液B	20ml
溶液C	50ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液2.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：
注意：溶液A和溶液B容易产生沉淀，溶液B比较粘稠，用前均需要放置在65℃预热使沉淀溶解、粘稠度降低，用前充分摇匀。

1. 65℃预热柱式植物DNA提取试剂盒溶液A，待其沉淀溶化后，充分混匀，取0.75mL加入到10mL塑料离心管中并放置于65℃待用。
2. 称取植物组织0.1-0.5 g左右，剪成微小的碎片，加入到有溶液A的10mL塑料离心管中并短暂匀浆。也可以液氮研磨后将粉末加入到管中(建议不要在陶器或玻璃研钵中破碎细胞，因为二氧化硅会非特异地吸附DNA，降低DNA 回收量。但可以在塑料研钵中研磨)。匀浆过程中将产生大量泡沫，属于正常现象。
3. 将匀浆液(包括植物碎片)全部转移到新的1.5mL塑料离心管(此时匀浆液较为粘稠，可将枪头剪去一截后转移上清，不能吸取的植物碎片可以小心倒入)。
4.在匀浆液中加入0.5倍体积预热的溶液B到离心管中，颠倒数次混匀。此时溶液中可能有白色丝状悬浮物产生。(由于溶液B比较粘稠，可以将1mL枪头剪去一截再吸取)。
5. 65℃水浴3～5分钟。如果室温放置，DNA产量会降低10-20%。
6. 加入200μl自备*仿，震荡混匀10-30秒，此时溶液将呈乳白色。
7. 12000rpm室温离心2分钟。此时上清液将变得透明，中间层有白膜。小心转移上清液到一个新的1.5mL塑料离心管中，避免触及中间层的白膜。
8. 加入1.5倍体积的溶液C，颠倒混匀后全部转移到离心吸附柱中，室温放置至少2分钟。
9. 12000rpm室温离心1分钟，DNA 将吸附在离心吸附柱的膜上，倒弃收集管中的穿透液。
10. 将0.5mL通用洗柱液加入离心柱中，12000rpm室温离心1分钟，弃穿透液。
11. 重复上步操作一次。
12. 空甩半分钟去除残留液体,将离心吸附柱转移到新的1.5mL离心管中。
13. 将离心吸附柱放置在一新的1.5mL塑料离心管中，加50-100μL DNA 洗脱液2.0，室温放置3～5分钟。
14. 12000rpm室温离心1分钟即得植物DNA溶液。
15. 由于本产品使用的离心吸附柱吸附DNA的能力较强，可以重复上步操作一次，以洗脱得到更多的DNA。
16. 直接取5-10μL电泳检测DNA，其余放冰箱备用。

使用效果：

图注：用本产品提取0.1g牵牛花叶片基因组DNA，60μL洗脱液洗脱，取15μL检测。泳道3和4为本产品提取效果，泳道1和2为某公司同类产品提取效果。本公司提取的牵牛花叶片基因组DNA 条带清晰，产量高。M为本公司Marker，染料为本公司绿如蓝核酸染料(BTN70909)。


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ARB13056 小鼠转铁蛋白受体(TFR/CD71)尿液中含量检测 Mouse transferrin receptor,tfr ELISA KIT
叔丁基*(代"*")乙*(代"腈")肟碳酸酯 L-2-Aminobutyric acid 58632-95-4
DAB辣根过氧化物酶显色试剂盒(20×)   2×3ml|2×10ml
ARB13774 豚鼠(NPC1L1)检测服务 
M0503 10X HRP标记抗体保存液(用于浓标记物的长期保存)                     
9041-37-6 Sephadex LH-20 (葡聚糖凝胶LH-20)
BL0277 琼脂糖凝胶FF DEAE Sepharose Fast Flow
PY02-356  2216E  250克  
002019 肝素*抗凝牛血 100ml|500ml
CYB165008 生物素化羊抗人IGM
ARB11102 人金属硫蛋白2(MT2)elisa检测 Human metallothionein 2,mt2 ELISA KIT
BTN60403 红细胞裂解液A型(核酸纯化) Red Cell Lysis Solution ,Type A
37326-33-3 Hyaluronidase   透明质酸酶
69-78-3 DTNB 5,5二巯基-2,2-二硝基*(代"*")甲醛
L-甲状腺素* DAB 25416-65-3
CYB162004 兔抗人纤维蛋白原(抗血清) 0.5ml
1003-85-0 L(+)鼠李糖
尼罗蓝指示剂   100ml
PY04-072  10%*化*卵黄液  5ml/支×10支  每支添加于95ml卵黄*化*琼脂培养基基础中，用于金黄色葡萄球菌的分离培养

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