TOP10化学感受态细胞哪里买

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括TOP10化学感受态细胞哪里买在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：TOP10化学感受态细胞哪里买
编号：SY0011
规格：100μl×10管
英文名：TOP10 Chemically Competent Cell
品牌：百奥莱博
本品是采用大肠杆菌TOP10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。本品使用pUC19质粒检测，转化效率可达108 cfu/μg，广泛适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。

TOP10感受态细胞基因型：F-mcrA △(mrr-hsd RMS-mcr BC) 80lacZ△M15 △lac X74 recA1 ara△139 △(ara-leu) 7697 galU galK rpsL (Strr) endA1 nupG

储存条件：-80℃
组份：
TOP10感受态细胞 100μl×10
pUC19(0.1 ng/μl) 5μl

注意事项
1）感受态细胞应保存在-80℃，不可反复冻融和放置时间过长，以免降低感受态细胞的转化效率。
2）整个转化操作，严格根据相应温度及无菌条件要求进行。
3）为确保最高转化效率，整个操作过程应尽量轻柔，并保持低温。
4）为防止转化不成功，可以保留部分连接反应液，以重新转化，最低化实验可能遇到的风险。

使用方法
1）取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。
【注】：一次转化感受态细胞的建议用量为50-100 μl，可以根据实际情况分装使用，应注意所用的DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。
2）向100 μl感受态细胞悬液中加入目的DNA，轻轻旋转离心管以混匀内容物，在冰浴中静置30min。
3）将离心管置于42℃水浴中放置60-90 s，然后快速将管转移到冰浴中，使细胞冷却2-3min，该过程不要摇动离心管。
4）向离心管中加入900μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床振荡培养45 min（150 rpm）， 目的是促使菌体复苏，抗性基因表达。
5）将离心管内容物混匀，吸取100μl已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB或LB固体琼脂培养基上，用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min，待液体被吸收后，倒置平板，37℃培养12-16 h。
【注】：涂布菌液多少可根据转化DNA量来调整。如果预计的克隆较少，可通过离心后吸除部分培养液，重新悬浮菌体后将其涂布在一个平板上。剩余菌液可置于4℃保存，一周之内可重新涂板。

我公司的TOP10化学感受态细胞哪里买，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销售下列产品：

·DAPI双链DNA染料
编号：SY0495
英文名称：DAPI dihydrochloride
规格：10mg
DAPI，也称DAPI dihydrochloride，是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。和EB(ethidium bromide)相比，对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。因为DAPI是含有特定AT序列DNA的一种嵌入剂，它能像Hoechst染料一样粘附在DNA双螺旋的小沟区。尽管DAPI不能通过活细胞膜，但却能穿透扰乱的细胞膜而对核染色。DAPI具有很高的光漂白承受水平，能用来检测酵母线粒体DNA，叶绿体DNA，病毒DNA，microplasm DNA以及染色体DNA。DAPI-DNA复合物的激发和发射波长分别为360nm和460nm。

DAPI染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。推荐工作浓度为0.5-10μg/ml。

CAS：28718-90-3
分子式：C16H17Cl2N5
分子量：350.25
纯度：>90% (from N)

注意事项
1)DAPI对人体有一定刺激性，请注意适当防护。
2)荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。
3)为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4)为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

·组织/细胞线粒体分离试剂盒
编号：SY0328
英文名称：Mitochondria Isolation Kit for Cell and Tissue
规格：50T
线粒体是绝大多数真核细胞内的一种基本的重要的细胞器，是细胞的动力工厂，细胞进行氧化磷酸化的场所。因此，对线粒体进行分离，以此为对象，对线粒体呼吸作用、mtDNA、mtRNA以及其他线粒体蛋白性能分析等具有重要意义。

本试剂盒可用于快速便捷分离组织/细胞线粒体，获得的线粒体纯度较高，且绝大部分都含有完整的内膜和外膜，可用于线粒体的生理功能等方面的研究，得到的线粒体也可被相应裂解液裂解得到线粒体蛋白，从而用于后续SDS-PAGE、Western、双向电泳及免疫共沉淀等分析。

按照每个样品使用量（细胞1-5×107个；组织：100-200 mg），本试剂盒可分别进行50个个样品的抽提。

试剂盒组份：
试剂A：100ml
试剂B：50ml
试剂C：1ml

储存条件：-20℃，有效期1年。

使用方法

1 线粒体的抽提
1）样本处理
① 组织匀浆：称取100-200 mg新鲜组织，PBS或生理盐水冲洗干净，滤纸吸干，用剪刀剪成非常小的碎块放入小容量玻璃匀浆器内。加入1-2.5mL冰预冷的试剂A，混匀，孵育8-10min，匀浆10-30下左右，也可采用超声方法破膜。
② 培养细胞匀浆：消化细胞，PBS洗涤，800 g 离心5-10 min收集细胞。计数，每次提取需要1-5×107个细胞，加入1-2.5mL预冷的试剂A，重悬细胞，混匀，孵育8-10min，可以采用超声或匀浆器方法破膜。
2）将组织或细胞匀浆物转移到离心管，4 ºC，800 g 离心5 min。
【注】：细胞核、大的膜碎片、未裂解细胞等沉淀在管底。
3）收集上清液并转移到新的离心管。4 ºC，800 g 再次离心5 min。弃沉淀。
4）将上清液转移到新的离心管。4 ºC，12,000×g 离心10 min，小心去除上清，沉淀即为分离得到的细胞线粒体。
【注】：离心后的上清含胞浆成分，尽量除去上清。

2 线粒体蛋白的抽提
1）向每毫升预冷试剂B加入10μL试剂C混匀。冰上保存数分钟待用。
2）按每10μL线粒体压积中，加入100μL上述配制好的试剂B/C溶液。
3）置于4℃旋涡振荡15-30 min 。
4）10,000rpm，4℃离心15min，取上清，即为线粒体全蛋白提取物，进行蛋白定量。
5）分装保存于-70℃，避免反复冻融。


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·吖啶橙/EB检测试剂盒
编号：SY0576
英文名称：Acridine Orange/Ethidium Bromide(AO/EB) Assay Kit
规格：1Kit
本试剂盒主要通过将吖啶橙和EB结合染色的方式检测细胞凋亡情况，主要原理是：吖啶橙能透过胞膜完整的细胞，嵌入细胞核DNA，与双链DNA结合后发出绿色荧光，溴化乙锭(EB)仅能透过胞膜受损的细胞，嵌入核DNA，发橘红色荧光。经AO和EB双染后，在荧光显微镜下观察，可见四种细胞形态：
①正常细胞（normal cells），核染色质被AO着均匀绿色并呈正常结构分布于细胞中央；
②早期凋亡细胞（early apoptotic cells），核染色质被AO着绿色在细胞的一侧呈月牙状或颗粒状；
③晚期凋亡细胞（late apoptotic cells），核染色质被EB染色为橘红色倾斜于细胞内部并呈固缩状或圆珠状；
④坏死细胞（Necrotic cells），表现为细胞体积增大，核染色质被EB着色为橘红色，细胞轮廓模糊，细胞即将瓦解。

本产品AO、EB溶液浓度分别为100µg/ml，所含稳定剂不影响实验效果。

注意事项
1）AO、EB均为诱变剂，可与DNA结合，操作时务必小心谨慎！
2）含酚红培养基对观察有轻微影响。建议使用无酚红培养基。
3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存条件：4℃避光，有效期一年。


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·亲和硅烷
编号：SY0793
英文名称：Bind-Silane
规格：25ml
制备聚丙烯酰胺凝胶时，常使用Bind-Silane（亲和硅烷）处理长玻璃板，使凝胶与之粘贴。用Repel-Silane（剥离硅烷）处理短玻璃板，使凝胶易于分离。

使用方法
制备聚丙烯酰胺凝胶时，请先将长、短玻璃板用1M的NaOH浸泡一段时间，并用洗涤剂清洗一遍，之后用水洗掉洗涤剂，再用去离子水冲洗干净。最后用乙醇擦拭玻璃板。

1 长玻璃板的处理
每次铺胶前均需用亲和硅烷对长玻璃板进行处理。
1）用镜头纸蘸取少许亲和硅烷溶液（1ml左右，视玻璃板大小而定）涂在长玻璃板上，自上而下涂一次，从左至右涂一次，将整块玻璃板涂满，涂匀。
2）5-10分钟后，用干净的镜头纸轻轻擦拭玻璃板以除去多余的亲和硅烷。
【注】：或用95%的乙醇清洗长玻璃板3次，以去除多余的亲和硅烷。

2短玻璃板的处理
每次铺胶前均需用剥离硅烷对短玻璃板进行硅化处理。
1）处理短玻璃板前必需更换手套，以防手套上的亲和硅烷污染短玻璃板，使短玻璃板也粘胶。
2）用镜头纸蘸取适量剥离硅烷溶液（1.5ml左右，视玻璃板大小而定）涂在短玻璃板上，自上而下涂一次，从左至右涂一次，将整块玻璃板涂满，涂匀。
3）5-10分钟后，用干净的镜头纸轻轻擦拭玻璃板以除去多余的剥离硅烷。

储存条件：室温，有效期一年。

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