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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
616
- 英文名:
E.coli XL10-Gold Chemical Competent Cell
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
干冰运输、-80℃保存
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京大肠杆菌XL10-Gold化学感受态细胞大量库存促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京大肠杆菌XL10-Gold化学感受态细胞大量库存促销
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
编号:BTN140431
英文名:E.coli XL10-Gold Chemical Competent Cell
本产品是采用大肠杆菌XL10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。本产品适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定复制,还适合非甲基化DNA的转化。使用pUC19质粒检测,本产品转化效率可达108。本感受态细胞具有四环素和*霉素抗性。
菌株基因型:Tetr D(mcrA)183 D(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac Hte [F- proAB lacIqZDM15 Tn10(Tetr)Amy Camr]
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μL感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μL无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
注意事项:
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA总量较少,可取200-300μL转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
关于北京大肠杆菌XL10-Gold化学感受态细胞大量库存促销的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·放线菌*(代"酮")
编号:BTN120688
英文名称:Actidione Solution
规格:1mL
本品为浓度为100mg/mL放线菌*(代"酮")的甲醇溶液。放线菌*(代"酮")(Cycloheximide from microbial;CHX;Naramycin A),化学式C15H23NO4分子量281.35,外观无色晶体熔点119.5-121℃。易溶于甲醇、乙醇和丙*(代"酮"),微溶于水。放线菌*(代"酮")拥有非常强烈的毒性,包括损害DNA、导致畸形胎儿和其它对繁殖过程的效应等,一般只用在体外研究中。放线菌*(代"酮")是一种在真核生物中对蛋白质生物合成过程有抑制效应的化合物,它是灰色链霉菌(Streptomyces griseus)的一种产物。它通过干扰蛋白质合成过程中的易位步骤而阻碍翻译过程。在分子生物学中放线菌*(代"酮")可用来确定蛋白质(酶)的半衰期;可作为植物生产调节剂;可用于筛选CHX抗性的酵母和真菌菌株。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期6个月。
·湿法电转液(干粉)
编号:BTN100928
英文名称:Wet Transfer Buffer Powder
规格:20L
本产品配制的溶液适用于湿转时,湿润、浸泡电转膜及垫子和用作电转工作缓冲液。用前直接加入蒸馏水与甲醇混匀即可。不含有机溶剂,便于储存和运输,且操作简便,一般适合分子量在100KD以上的蛋白。本产品可以回收重复使用2-3次,节约研发成本,如果转膜液颜色变成浅棕色或黄褐色,应该丢弃。
储存条件:常温运输、4℃保存,有效期一年。
北京大肠杆菌XL10-Gold化学感受态细胞大量库存促销关键词:BTN140431,E.coli XL10-Gold Chemical Competent Cell,大肠杆菌XL10-Gold化学感受态细胞
·胚胎裂解液
编号:BTN130806
英文名称:Embryonic Cell Lysis SolutionEmbryonic Cell Lysis Solution
规格:1mL
本产品是胚胎培养过程中分离单个胚胎细胞的裂解液。可用于分离得到不同时期的胚胎的单细胞,得到的单细胞可用于各种单细胞分析,核酸提取等实验。
储存条件:低温运输,4℃保存,有效期两年。
·PCR级海藻糖溶液
编号:BTN130506
英文名称:Trehalose Solution,PCR Grade
规格:1.5mL
本产品为浓度为5M的海藻糖的水溶液,可以直接添加到PCR反应体系或逆转录反应中提高酶的热稳定性和活性。
产品特点:
1.在反应体系中加入海藻糖,可以增加热敏感的酶在高温下的稳定性和活性。
2. 海藻糖能增加鼠白血病病毒逆转录酶(Reverse Transcripatase)的热稳定和热激活特性,使其在60℃仍具有全部活性,足以在mRNA二级结构诱导终止反应之前合成全长的cDNA,反应效率大大提高。
3. 有助于提高干燥保存的酶的活性。
储存条件:低温运输,4℃保存,保存期一年
使用方法:按照1/3体积,将本产品加入到PCR体系中即可。
北京大肠杆菌XL10-Gold化学感受态细胞大量库存促销关键词:BTN140431,E.coli XL10-Gold Chemical Competent Cell,大肠杆菌XL10-Gold化学感受态细胞
·Tricine-SDS PAGE上样液
编号:BTN81213
英文名称:Tricine-SDS-PAGE Loading Buffer
规格:1mL
本产品是专门用于Tricine-SDS-PAGE电泳样品上样用的缓冲液,其浓度为2×,配胶时即开即用,非常方便。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·绿如蓝核酸染料(可见光型)
编号:BTN121002
英文名称:DNAgreen(Visible Light)
规格:10mL
本品是国内首款可见光核酸染料,用于电泳时替代EB,在可见光下观察DNA或RNA的电泳。
产品特点:
1. 无毒。对人体和环境没有任何毒害,有利于保护使用者的健康和保护日益恶化的环境。
2. 实时染色。可以在电泳过程中实时观察DNA和RNA的泳动,不需要任何额外的仪器设备或光源。注:本产品在紫外条件下不发光。
3. 由于避免了UV 对DNA的伤害,胶回收片段的克隆效率比UV下回收的片段高2-10倍,非常适用于PCR或酶切回收。
4. 稳定。对光、水和热的稳定性很好,可加入琼脂糖凝胶中反复熔化。
5. 灵敏。检测灵敏度跟EB相当,能满足常规核酸电泳实验要求。
6. 使用方法多样。既可以电泳中染色,也可以电泳后染色;既可用于琼脂糖胶,还可用于PAGE。
7.跟各种常用的核酸电泳缓冲液(如超快核酸电泳液、TBE、TAE)兼容,但在超快核酸电泳液中背景最低。
储存条件:常温运输和保存(长期保存最好放4℃),保存期限一年。
使用方法之一:电泳中染色(琼脂糖电泳时使用)
1.在 100mL 融化的琼脂糖凝胶加入100μl 本产品,充分混合均匀后倒胶,凝固后凝胶将呈淡紫色。本产品不能跟其他任何核酸染料同时使用(如EB和SYBR Green I),否则会相互干扰,不会出现任何条带。使用时请严格按照此比例加入染料,否则将出现糊带现象。
2. 将凝固的琼脂糖凝胶放在 5分钟超快核酸电泳液、TEB或TAE中。为节约染料,不推荐将染料加到电泳缓冲液中。
3. 将DNA样品与6×A型DNAload 按5:1的比例混合后上样,由于本染料比EB 灵敏度稍低,所以DNA的上样量和DNA Marker的上样量最好比使用EB染料时多1倍。
注意:不推荐使用常规的含*酚蓝和二甲*蓝的上样液,因为这些染料的颜色跟DNA和RNA的颜色都将呈蓝色,将严重干扰条带的观察和解读。本产品提供的6×A型DNAload 只含相当于50bp大小的红色染料,不会干扰蓝色DNA和RNA 条带的观察。
4.电泳,电泳参数同常规的电泳。跑在前面的是红色的电泳示踪染料(来于上样液),其泳动速度相当于50bp的DNA。
5. 直接在光线明亮的位置直接观察电泳的进行,DNA和RNA 将呈现蓝色条带。如果有观察X光片用的灯箱,可以将电泳中的电泳槽或电泳后的凝胶平放在铺有塑料布的灯箱发光面的上面观察效果更佳。典型电泳结果如下:

6. 如果要回收DNA,则关闭电泳后直接切下所需条带,其余回收过程同常规方法。
使用方法之二:电泳后染色(PAGE胶染色必须使用电泳后染色法,琼脂糖电泳也可以选择本方法。不论是PAGE胶还是琼脂糖胶,本方法所需染料的用量比电泳中染色大2-10倍)
7. 按照常规方法进行 PAGE电泳或琼脂糖电泳。
8. 用电泳液将本产品稀释100-500倍(100mL 水需要加0.2-1mL 本产品),将胶放入,室温下摇晃染色1-10分钟即可看见蓝紫色的DNA和RNA条带。具体染色多长时间取决于DNA和RNA的浓度。
9.染色液可以避光放4℃保存,能反复使用数次。
疑难解答:
Q:为何电泳的前沿出现下图这种只出现一条带的情况呢?

A: 这是由于样品中有大量RNA小片段污染(基因组DNA提取时没有RNase处理的话常常会有大量RNA污染),这些小片段裹走了凝胶中的染料,使其后面的凝胶区域没有染料,因此后面的大片段没法染色。建议电泳后再染色观察大片段。
Q: 本产品可否用于RNA染色?
A:可以,也呈蓝紫色条带。
Q:本产品是否可以加入上样液中进行染色?
A:不行,本产品只能直接加入琼脂糖凝胶中进行染色或PAGE电泳后再染色。
Q:为何电泳时间长的话前端的DNA和RNA 条带很淡或根本看不见?
A:跟EB一样,电泳时本产品朝负极方向移动,当前端的DNA(最小片段)进入没有染料的区域时,已经跟DNA或RNA 结合的染料分子会逐渐脱落,所以条带会变淡或看不见。解决办法之一是缩短电泳时间或电泳后再染色。
Q:本产品在哪种缓冲液中效果最好?
A:本产品跟各种电泳缓冲液兼容,但背景最浅的是中超快核酸电泳液。
我公司正在优惠促销克隆与表达等系列产品,期待您的咨询选购北京大肠杆菌XL10-Gold化学感受态细胞大量库存促销。
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文献和实验的宿主菌基因型,并使细胞生长加快(当天获得菌落),已经成功应用于25kb超螺旋DNA和8kb连接DNA的克隆。XL10-Gold®,BL21-Gold,BL21-CodonPlus®,SoloPack® Gold 和96Pack® Gold等系列细胞都带有这个新的性状。超级感受态细胞 Stratagene提供多种>5 x 109 转化子/μg 超螺旋DNA转化效率的化学法超级感受态细胞正是克隆获得大质粒、连接DNA克隆和建库时最值得推荐的。电转化感受态细胞 Stratagene
开始做酵母双杂交了,计划用一个膜蛋白去筛库,已经做好了工作量大,而预期结果要靠点小运气的心理准备,面前真是一条很长的路要走! 在丁香园学习了很久,希望能将我这次试验过程中遇到的困难和思索记录下来,跟大家一同讨论,共同学习。 今天先说说实验之前的试剂准备,为了保证实验能顺利进行,我选择了clontech的matchmaker gold系统,订购了人脑cDNA文库(标准化的),还有培养基也是订的商品化的,再有一个提酵母质粒的KIT 1,GOLD系统式对系统3的升级版,替换了一个报告
标准”,是Stratagene的看家之宝,能够有效避免延伸过程中不需要的错配。试剂盒采用的是低次数的循环延伸而非PCR,有助于减少无意错配。只需要一次酶切和转化,实验可以在一天完成。这个试剂盒适用于质粒大小不超过8Kb的质粒。后来推出的QuikChange XL site-directed mutagenesis kit则是针对大于8Kb的质粒的定点突变的,通过优化试剂特别是其感受态细胞(XL10-Gold),使得较大的质粒的定点突变也一样简单。QuikChange由于操作简单快速,效率高( >80%)而受到普遍欢迎
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