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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
916
- 英文名:
EB scavenger
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
室温保存及运输
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京*化乙锭清除剂(EB清除剂)优惠促销,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京*化乙锭清除剂(EB清除剂)优惠促销
英文名:EB scavenger
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
规格:100次
本品通过与*化乙锭(EB)分子中的*基反应和断开EB分子中的含氮杂环而有效破坏EB的分子结构,达到去除EB污染的目的,适用于清除溶液和物体表面污染的EB。
产品特点:
1. 能消除EB的荧光,并使其致突变性降低99%以上。
2.适用范围广泛,可用于含EB污染的水、*化铯溶液、电泳缓冲液(TAE、TBE、MOPS等)、有机溶剂(乙醇、异丙醇、异戊醇、异丁醇等)和受污染的多种物体表面(玻璃、不锈钢、塑料、地板、紫外滤光片等)。
3. 使用简单、方便、迅速。
4. 无色或浅黄色透明液体、无毒但有腐蚀性和刺激性气味。
5. 本品暴露于空气中的时间不宜过长,使用完毕请立即密封、保存于避光、通风处。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 100ml |
| 溶液B | 200ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:室温保存及运输,有效期一年。
使用方法:
一:清除水溶性溶液(如水、Tris、MOPS、*化铯等)中的EB
1. 用水将溶液稀释使其EB浓度低于0.5mg/mL(如果EB浓度已经低于1mg/mL则可以直接进行下一步操作)。
2. 按溶液A:溶液B:被污染溶液=1:2:100的比例将溶液A和溶液B先后加入到溶液中(由于溶液混合初期会产生少量有害气体,所以整个操作必须在化学通风橱中小心操作)。
3. 搅拌五分钟,室温静置20小时。
4. 用自备的饱和碳酸**溶液中和使其pH变为中性。
5. 检查清除程度。
6. 弃废液。
二:清除*化铯饱和的异丙醇中的EB
1. 用水将*化铯饱和的异丙醇溶液稀释使其EB浓度低于1mg/mL(如果EB浓度已经低于1mg/mL则可以直接进行下一步操作)。
2. 按*化铯饱和的异丙醇溶液:EB Scavenger工作液=1:4的比例加入新鲜配制的EB Scavenger工作液(配制方法见五),室温搅拌20小时。
3. 用自备的饱和碳酸**溶液中和,使溶液pH为中性。
4. 倒弃废液。
三:清除异戊醇和丁醇中的EB
1. 用水将溶液稀释使其EB浓度低于1mg/mL(如果EB浓度已经低于1mg/mL则可以直接进行下一步操作)。
2. 按溶液:EB Scavenger工作液=1:4的比例加入新鲜配制的EB Scavenger工作液(配制方法见五),溶液分成两相,室温搅拌72小时。
3. 2克活性炭/100mL混合液的比例加入自备活性炭,再搅拌30分钟。
4. 过滤去活性炭。
5. 用饱和碳酸**中和液体混合液体使pH变为中性。
6. 倒弃废液。
四:清除物体表面的EB
1. 用浸泡过新鲜EB Scavenger工作液(配制方法见五)的纸巾擦洗物体表面污染处5次,每次更换新的纸巾。由于工作液pH为1.8,如果物体表面不耐酸(如玻璃、不锈钢、地板等),直接进入第二步操作。但一般紫外透射滤光片可以直接用工作液处理。
2. 再用浸泡过水的纸巾擦洗物体表面污染处5次,每次更换新的纸巾。
3. 用紫外灯检查清洁效果,如果看不见EB荧光,可以进行下一步操作。如果还有可见的EB荧光,则重复第二步。(对不便于直接用紫外灯照射的污染处,可以将所用的纸巾中的溶液挤出,放置在紫外灯下比较荧光的强弱,一般荧光会逐渐变弱)。
4. 风干清洁过的物体表面。
5. 将用过的纸巾浸泡在EB Scavenger工作液中,静置至少一小时降解EB。
6. 丢弃纸巾。
7. 用自备的饱和碳酸**溶液中和工作液,使其pH为中性。
8. 倒弃废液。
五:新鲜EB Scavenger工作液的配制
1. 估计工作液的用量。
2. 按溶液A:溶液B:水=1:2:30的比例在化学通风橱中先后将水,溶液A和溶液B加入到大小合适的容器中室温搅拌10分钟混匀(由于配制时会产生少量有害气体,所以整个操作必须在化学通风橱中小心操作)。
3. 立即按上面的各种情况使用新鲜配制的工作液。使用者需戴手套,溅到皮肤上后立即用自来水冲洗。
关于北京*化乙锭清除剂(EB清除剂)优惠促销的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·甲基化PCR试剂盒2.0
编号:BTN130428
英文名称:Methylation-Specific PCR Kit 2.0
规格:150次
亚硫*(代"酸")*盐修饰DNA时要求DNA必须在单链状态,反应还必须在低温进行,常规的修饰试剂盒由于是在液相进行,要在低温下让DNA 不相互复性而保持单链状态非常棘手,所以常规修饰试剂盒的修饰效率一般都不高。此外,常规方法要切换反应液,有多次沉淀步骤,使得DNA的回收率一般都不超过50%。为克服这些缺点,本公司开发出了此升级产品。
产品特点:
1.用包埋的样品进行所有操作,免去所有沉淀和纯化步骤,极大简化了操作。
2.免去了DNA提取过程,所需实验材料比常规方法更少,最少几个细胞都可以,极大地节约了宝贵材料,尤其适用于珍稀材料。
3.包埋处理后,DNA在整个操作过程中都处于最适于修饰的单链状态,极大提高了修饰效率。
4.DNA 包埋于包埋块中,切换反应液非常方便,而且DNA 不会丢失,所以最终回收率都在90%以上。
5.适用于实体材料、悬浮细胞和纯化好的DNA样品。
6.本试剂盒提供的甲基化修饰试剂盒足够制备150多个10μL包埋块(如果用纯化好的DNA)或25个10μL包埋块(如果用悬浮细胞);本试剂盒提供的PCR试剂盒足够180次100μL体系的PCR反应。
试剂盒组成:
成分一:甲基化修饰试剂盒(BTN130301)
| 成分 | 规格 |
| 包埋液 | 1.5ml |
| 分子生物学级石蜡油 | 25ml |
| 包埋块裂解液 | 12.5ml |
| 蛋白酶K溶液(10mg/mL) | 150μl |
| 溶液A | 30ml |
| 溶液B成分一 | 2.3 g×5棕色瓶 |
| 溶液B成分二 | 110mg×5棕色管 |
| TE缓冲液,pH8.0 | 125ml |
| 说明书 | 1份 |
注:包埋液用1.5mL旋盖离心管包装,溶液B成分一用5mL棕色瓶包装,溶液B成分二用1.5mL旋盖棕色管包装。
成分二:即用型PCR 3.0(BTN90805)
| 成分 | 规格 |
| PCR MagicMix 3.0 | 9ml |
| 专用染料 | 360μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,保存期一年。但Proteinase K和即用型PCR Mix3.0 需要低温运输,-20℃保存。
使用方法:
一、准备试剂
1.在装有2.3g溶液B成分一干粉的瓶中加入3.9mL水和0.9mL溶液A,摇晃溶解得到4.8mL溶液B成分一。在装有110mg溶液B成分二干粉的离心管中加入1mL 50℃预热的超纯水,摇晃溶解,得到溶液B成分二。将0.6mL溶液B成分二加入到4.8mL溶液B成分一中,得到5.4mL溶液B,冰上放置待用。未用完的溶液B下次不得再使用。
2.每次实验前,将装有1.5mL 包埋液离心管在沸水浴上放置数分钟直到变成溶液,然后放80℃待用。
二、对微量组织材料(如果材料足够,可先纯化DNA,再按第三方案进行)
1.用常规的胰酶消化法处理动物实体组织或培养细胞,得到浓度不超过60细胞/μL的单细胞PBS 悬液。如果实验材料已经是单细胞悬浮液(如卵细胞),则PBS 洗涤后直接离心沉淀,再重悬在PBS中(浓度不超过60细胞/μL)。注:本试剂盒不含本步所需相关试剂。
2.在一个2mL离心管中加入3μL细胞悬液,再迅速滴加7μL在80℃预热的包埋液。注:不需要吹打混匀以免混合液在抢头里面凝固。
3.加入500μL分子生物学级石蜡油,将离心管在沸冰浴中放置20分钟。
4.将离心管转移到冰上放置30分钟,低温下包埋液和细胞混合液将凝固成10μL的包埋块。
5.加入500μL 包埋块裂解液和5μL Proteinase K溶液,37℃保温过夜。加入的溶液比重都比石蜡油大,将会自动沉降到石蜡油下层,不需离心。
6.吸弃包埋块之外的所有溶液(包括石蜡油),用1mL TE缓冲液室温浸泡包埋块2次,每次15分钟。此步可去除残留包埋块裂解液。
7.酶切包埋块中的DNA:选定不识别PCR靶片段的内切酶(本试剂不提供该相关试剂),再用100μL选定内切酶的1×缓冲室温液浸泡包埋块15分钟,吸弃缓冲液后再加入100μL 选定内切酶的1×缓冲液和50U选定的内切酶,37℃保温2小时。
8.吸弃酶切反应液,再加入500μL 新鲜配制的处理液A(配制方法:100μL溶液A+400μL超纯水)室温放置15分钟,重复此步一次。此时DNA 将呈单链。
9.吸弃处理液A,用1mL新鲜配制的处理液B(配制方法:50μL溶液A+950μL超纯水)室温浸泡包埋块5分钟。
10.吸弃处理液B,加入750μL石蜡油,然后沸水浴20-30秒,使DNA单链彻底彼此分开。
11.奖离心管转移到冰上放置30分钟使包埋块重新凝固。
12.在离心管中加入1mL预冷的溶液B,溶液B将自动沉降到石蜡油下层。继续在冰上放置30分钟。此步用于修饰单链的DNA。
13.将离心管转移到50℃放置3.5小时。
14.吸弃溶液B,用1mL TE缓冲液常温洗涤包埋块2次,每次15分钟。
15.吸弃TE缓冲液,用500μL新鲜配制的处理液C(50μL溶液A+450μL超纯水)常温洗涤包埋块2次,每次15分钟。
16.吸弃处理液C,用1mL TE缓冲液常温洗涤包埋块3次,每次10分钟.
17.吸弃TE缓冲液,所得包埋块可以在4℃保存数月待用,也可以用超纯水洗涤两次(每次15分钟)后直接用做100μL体系甲基化PCR的模板。
三、对纯化好的DNA
18.选用不识别PCR 靶片段的合适内切酶酶切纯化的基因组DNA(本试剂不提供所需试剂),总体积不超过20μL,基因组DNA 不超过700ng。
19.酶切结束后,沸水浴5-10分钟灭活内切酶并变性DNA。
20.冰上放置并短暂离心数秒后,再加入4μL溶液A,50℃保温15分钟。
21.迅速加入50μL在80℃预热的包埋液,用手指快速弹击管底混匀溶液并继续放80℃待用。不要吹打混匀以避免包埋液在移液枪头中凝固。
22.在一个新的、2mL离心管中,加入1mL预冷的溶液B,再加上750mL石蜡油,并将离心管放冰上预冷。
23.迅速取80℃保温的混合液10μL,用在空中滴加的方式加到上步准备的预冷的离心管中,滴加的混合液遇冷将迅速在石蜡油中形成包埋块并自动沉入管底。注意:不要将枪头浸入到预冷的溶液中,否则包埋液将迅速在枪头内凝固。如果包埋块没有沉到管底,可以用枪头将其拨到石蜡层下面的液相中。
24.再重复上步操作,共可以得到7个包埋块(约含100ng DNA)。
25.将离心管(含7个包埋块)继续放冰上30分钟进行修饰。
26.后续操作同第13-17步。
四、甲基化专一性PCR(由于包埋块可能会抑制PCR,所以最好使用100μL体系的PCR进行甲基化检查,如果效果不好,建议使用巢式PCR)
27.在一干净的PCR 管中,加入下列成分(冰上操作):
| 成份 | 样品管 | 对照管 |
| PCR MagicMix 3.0 | 50μl | 50μl |
| DNA包埋块(修饰后DNA) | 1块(约含100ng DNA) | 无 |
| 对照DNA(修饰前DNA) | 无 | 100ng |
| 自备MSP引物F | 25 pmol | 无 |
| 自备MSP引物R | 25 pmol | 无 |
| 自备非甲基化PCR引物F | 无 | 25 pmol |
| 自备非甲基化PCR引物R | 无 | 25 pmol |
| 补水到 | 100μl | 100μl |
28.将混合物混匀,放入PCR仪中进行热启动PCR,结束后取5-10μL PCR产品直接进行琼脂糖电泳。
北京*化乙锭清除剂(EB清除剂)优惠促销关键词:EB清除剂,*化乙锭清除剂(EB清除剂),EB scavenger,BTN3092
4-*基*乙酮 TRIS acetate salt 99-92-3
酸性磷酸酶染色液(偶氮偶联法) 4×2ml|4×10ml|4×20ml
磷酸酶B(兔肌) Sodium metavanadate 9012-69-5
BTN131077 组*酸标签蛋白染色试剂盒 Staining Kit for His-Tag
丙泊酚 Chromium picolinate 2078-54-8
BL1065 MH(A)培养基
ARB13385 牛棘球蚴(echInococcIosIs)代做ELISA实验
ARB12277 大鼠纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA检测服务 Rat plasminogen activator inhibitor,pai ELISA KIT
N-癸酰基-N-甲基葡糖胺 Pyridine hydrochloride 85261-20-7
ARB14145 大鼠β淀粉样蛋白(Aβ)elisa检测
BL1092 澳洲胎牛血清
Western封闭液II(奶粉) 100ml
ARB11450 人铁蛋白(FE)酶联免疫定量检测 Human ferritin,fe ELISA KIT
F040316 鸭IgY抗原 Duck IgY
北京*化乙锭清除剂(EB清除剂)优惠促销关键词:EB清除剂,*化乙锭清除剂(EB清除剂),EB scavenger,BTN3092
·重组蛋白A/G
编号:BTN131081
英文名称:Recombinant Protein A/G
规格:1mg
·噻孢霉素溶液
编号:BTN120684
英文名称:Cefotaxime Solution
规格:1mL
本产品为浓度100mg/mL的噻孢霉素水溶液。参考浓度50mg/mL。噻孢霉素(头孢噻肟*)分子式为:C16H16N5NaO7S2,分子量:477.45,CAS号:64485-93-4。效价:916-964μg/mg,溶于水。噻孢霉素为β-半乳糖苷酶抑制型抗菌素,能抑制肽聚糖的交联,从而抑制细菌细胞壁合成,常用于植物组织培养中抑制农杆菌。
储存条件:低温运输,-20℃避光保存,有效期6个月。
·农杆菌LBA4404化学感受态细胞
编号:BTN140385
英文名称:E.coli LBA4404 Chemical Competent Cell
规格:10×100μL
本产品为LBA4404农杆菌化学感受态细胞,其具有利福平和链霉素抗性,适用于玉米、烟草等植物的转基因操作,经pCAMBIA2301质粒检测转化效率高达103cfu/μg。
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期一年。
自备试剂:质粒DNA、液氮等
使用方法:
转化前准备
1.冰水浴和37℃水浴。
2.液氮或干冰/乙醇混合物。
3.将抗性平板在28℃培养箱中平衡至少15分钟。
转化方法
1.取-80℃保存的农杆菌感受态细胞于冰水浴中融化。
2.无菌条件下,向刚刚融化的感受态细胞悬液中加入需要转化的质粒,每100μL感受态细胞加1ug质粒DNA,轻柔混匀。冰水浴中静置10分钟。
3.将离心管置于液氮中速冻5分钟(注:也可以用干冰和无水乙醇混合物替代液氮)。
4.迅速将离心管置于37℃水浴静置中5分钟,不要晃动水面。然后快速转至冰水浴中静置5分钟。
5.加入800μl无抗生素的2×YT或LB液体培养基,28-30℃振荡培养2~3小时。使菌体复苏,表达抗性。
6.5000rpm离心1分钟收菌,保留100μL左右上清,轻轻吹打重悬菌体,均匀涂布到含有相应抗生素的LB固体培养基平板上,待平板中的液体完全吸收后,倒置平板,28-30℃培养48-72小时。
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