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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输,4℃(短期)或-20℃保存,有
- 保质期:
长期
- 英文名:
RNA Loading Buffer
- 库存:
457
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京现货三合一RNA上样液(A型,6X)批发,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京现货三合一RNA上样液(A型,6X)批发
品牌:百奥莱博
英文名:RNA Loading Buffer
产地:国产|进口
规格:1.5mL
本品是集RNA变性RNA、上样、RNA染色三种功能于一体的即用型溶液。
产品特点:
1.能提高RNA上样速度,免去繁琐的准备步骤,减少污染。
2.其含有的RNase抑制剂能抑制RNA样品中残留RNase的活性,保证电泳过程中RNA的完整性。
3.所含甘油和染料(仅BTN3130A含EB染料),便于直接上样和UV观察RNA电泳条带,免去染色和脱色过程。
4.本产品与DNA/RNA两用快速电泳液SuperBuffer-2完全兼容。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 三合一RNA上样液 | 1.5ml |
| 说明书 | 1份 |
本产品为红色液体,含红色的EB(*化乙锭),有致癌性,避免用手直接接触。
另一红色电泳示踪剂的电泳速度相当于50nt的RNA。
储存条件:常温运输,4℃(短期)或-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 按1:1-1:3的比例将RNA样品与RNA上样液混合(如5μL RNA+15μL RNA上样液)。
2. 65-85℃水浴保温10分钟,。
3. 冰浴5分钟后即可直接上样电泳。
注:本产品含EB,所以琼脂糖凝胶中可以不必再加EB。本产品与甲醛琼脂糖变性凝胶或用DNA/RNA两用快速电泳液SuperBuffer-2配制的非变性琼脂糖变性凝胶兼容。
4.电泳完毕后可直接将凝胶放在紫外灯下观察结果,RNA 条带成红色。
疑难解答:
Q:为何RNA样品在甲醛变性胶中的电泳效果比普通非变性胶差?
A:这是因为在非变性胶中,即使内部有切口的RNA分子(实际已经是两条RNA分子)也会通过形成发夹结构而跟完整的分子等速电泳,而在变性胶中,完整RNA分子和内部有切口的RNA分子将以不同的速度泳动,所以变性胶看起来效果不好是反应了真实情况,非变性胶看起来好只是一种假象。要求严格的实验(如CDNA文库构建)最好还是使用甲醛变性胶判断RNA的质量好坏。
除北京现货三合一RNA上样液(A型,6X)批发外,我公司正在打折促销以下产品:
·SP6 RNA聚合酶
编号:BTN120307
英文名称:SP6 RNA Polymerase
规格:1000U
本酶是鼠伤寒沙门氏菌的噬菌体SP6 DNA编码的酶,对SP6启动子序列具有高度特异性,不能识别其它生物来源的启动子。本酶是依赖于DNA的RNA聚合酶,具有 5´→3´的RNA聚合酶活性,以含有SP6启动子序列的双链DNA为模板,以NTP为底物,合成与启动子下游的单链DNA互补的RNA。
产品用途:
1.为Northern杂交以及Southern杂交制作高标记探针。
2.制作RNA剪接反应的前体。
3.以帽类似物为引物,制作Capped mRNA。
产品组成:
| 成份 | 规格 |
| SP6 RNA聚合酶 | 50μL(20U/μL) |
| 5×转录缓冲液 | 0.25mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1个活性单位是指在37℃、60分钟内将1nmol的AMP合成掺入到寡聚核苷酸片段(DE-81光吸收形式)所需的酶量。
北京现货三合一RNA上样液(A型,6X)批发关键词:RNA Loading Buffer,三合一RNA上样液(A型,6X),BTN3130A
·Denhardt溶液(非同位素探针)
编号:BTN91104B
英文名称:Denhardt Solution
规格:250mL
本产品是最经典的、用于核酸膜杂交时降低膜对标记探针的非特异结合的试剂,早在Southern杂交出现前10年由Denhardt发明,该产品可用与Southern(含单拷贝基因)、Northern、非同位素杂交(B型规格),与硝酸纤维素膜、尼龙膜等各种常用的核酸杂交介质兼容。A和B分别适用于同位素和非同位素探针。
储存条件:低温运输、-20℃保存、有效期一年。
·牛血清γ球蛋白标准品(2mg/mL)
编号:BTN131071
英文名称:Bovine γ IgG Standard
规格:1mL
牛血清γ球蛋白标准品(BGG)经过滤除菌,质量稳定。本产品是考马斯(Bradford)分析实验的理想标准品,是使用任何方法测定抗体浓度的理想标准品。本产品浓度为2mg/mL。本品仅用于科研实验,不能用作医疗及临床诊断。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
自备试剂:0.9% NaCl溶液或PBS缓冲液、BCA工作液。
使用方法:
本产品可应用于蛋白分析定量(BCA蛋白分析、考马斯-Bradford分析等)、抗体脱盐回收或其他层析操作的对照、SDS-PAGE电泳和分光光度计紫外灯的常规校准(吸收峰在280nm)等实验。由于蛋白操作彼此差别太大,本手册只列出此产品用于BCA蛋白分析的实验流程,其他流程不在此详述。
1.标准品溶液的稀释方法见下表。此标准品溶液的稀释可使用去离子水、0.9% NaCl或PBS。
| 2mg/mL本品(μL) | 稀释液(μL) | 稀释后产品终浓度(μg/mL) |
| 120 | 0 | 2000 |
| 90 | 30 | 1500 |
| 60 | 60 | 1000 |
| 45 | 75 | 750 |
| 30 | 90 | 500 |
| 15 | 105 | 250 |
| 10 | 110 | 125 |
| 0 | 120 | 0(空白对照) |
2.本产品标准曲线的制备
1)分别取50μL稀释后的本标准品溶液加入到1.5mL离心管中,每个浓度取2个平行样。
2)在每管中各加入1mL工作液后,立即混匀。
3)37℃水浴槽中反应30分钟后,冷却至室温。
4)使用分光光度计测定562nm处的吸光度值。测定时,使用1mL比色皿,用水校零。尽可能在20分钟内检测完毕所有样品。
5)各浓度本标准品溶液的吸光度值减去空白对照的平均值,绘制本标准品溶液的标准曲线。
3.检测样品的测定
检测样品建议与本标准品溶液同时进行测定,测定方法同上,与本标准品的测定方法一致。如果必要也可选择与本标准品溶液相同的稀释方法稀释检测样品后测定。
北京现货三合一RNA上样液(A型,6X)批发关键词:RNA Loading Buffer,三合一RNA上样液(A型,6X),BTN3130A
·大肠杆菌TKB1化学感受态细胞
编号:BTN160688
英文名称:E.coli TKB1 Chemical Competent Cell
规格:0.1mL*10
大肠杆菌TKB1感受态细胞是由BL21(DE3)衍生而来,含有酪*酸激酶(TyrosineKinase)。BL21(DE3)TK感受态细胞,简写为TKB1,带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝,该基因的启动子是LacUV5。本产品作为E.coli B 宿主菌,主要用来进行蛋白表达,细胞内缺少lon蛋白酶和ompT外膜蛋白酶,能够有效避免目的蛋白的降解。
本产品通过IPTG 诱导表达的T7 RNA聚合酶,允许其下游目的蛋白表达,从而实现对下游目的蛋白的可控诱导型基因表达。TKB1感受态细胞内含有一个能有诱导表达酪*酸激酶基因的质粒(pTK)。TKB1感受态细胞能够转化进去ColE1 Origin 为复制起点的,包含有编码磷酸化目的基团或者蛋白的质粒。如果目的蛋白是构建在一个含有亲和标签的融合表达载体上面,那么对于磷酸化蛋白的纯化就会相对比较容易。从TKB1感受态细胞中纯化得到的目的蛋白,能够用来筛选表达库,或者亲和纯化和蛋白印记酪*酸磷酸化蛋白。
菌种的基因型为:F-dcm ompT hsdS(rB-mB-)gal λ(DE3)[pTK Tetr]。
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl,可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞处于冰水混合状态时,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被10-100 ng超螺旋质粒DNA 所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴25分钟。
3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟,晃动会降低转化效率。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,200rpm 振荡培养60分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含有相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃倒置培养12-16小时。
注意事项:
1. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
2. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(5000rpm,1分钟)收菌后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
3. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
4. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
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